• 한국동물번식학회:학술대회논문집
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• 한국동물번식학회 2002년도 춘계학술발표대회 발표논문초록집
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• pp.58-58
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• 2002

Currently, the technique of pronuclear microinjection is the most successful and most widely-used method for producing transgenic animals. Among this technique, surperovulation and embryo transfer are the crucial steps for obtaining a large number of fertilized eggs and birth as much as potential founders from the transferred embryos. (omitted)

• 한국가축번식학회지
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• 제25권1호
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• pp.71-77
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• 2001

본 실험은 phospholipase C (PLC)-$\beta$-3 및 peroxiredoxin (Prx) II 유전자가 적중 ($\Delta$)된 J1 마우스 배아주 (embryonic stem) 세포로부터 생식선이행 카이미라 마우스생산을 위한 제반조건 및 배아주세포의 배양조건을 확립하기 위하여 수행되었다. 80% 이상의 정상핵형을 보이는 유전자 적중된 4개의 클론 ($\Delta$Pu II C3, $\Delta$Pu II C3, C10 및 15)으로부터 카이미라를 생산하였을 때 형태적으로 분화정도가 높은 클론 ($\Delta$PLC$\beta$-3 C3)의 이용은 카이미라의 생산율 (21.1%)과는 무관하게 카이미리즘 (＜ 20%)이 낮았고, 수컷 카이미라의 생산 빈도 (7/15, 46%)도 낮아지는 것으로 나타났다. 그러나 형태적으로 안정된 3개의 클론 ($\Delta$Prx II C3, C10 및 15)은 80% 이상의 높은 카이미리즘을 지닌 마우스 (9/13, 69.2%)를 생산하였고, 수컷 카이미라의 생산율 (l1/13, 84.6%)도 증대된 것으로 나타났다. 따라서 80% 이상의 정상핵형을 지닌 배아주 세포를 형태적으로 안정하게 유지하는 것이 카이미리즘이 높은 마우스를 생산하는데 결정적 요인으로 작용할 수 있는 것으로 확인되었다. 미세주입용 배반포를 효율적으로 생산하기 위해 5~10주령 사이의 C57BL/6J 암컷마우스를 교배 한 결과, 10주령 마우스가 미세주입가능한 3.5일령 배반포를 가장 많이 생산 (2.94개/마리)하였다. 또한 미세주입된 배반포를 이식하기 위해 ICR 및 ICR$\times$C57BL/6J F1 (IBF1)위임신 대리모를 사용하였을 때, IBF1이 복당 산자수 (2.8 vs. 5.6)가 많았고 카이미라 생산율 (0 vs. 35.3%)도 매우 높았다. 따라서 공여마우스의 주령 및 대리모의 선택이 카이미라 생산효율 향상에 중요한 요인으로 부각되었다. 결과적으로 핵형이 안정된 ES 세포를 동정하는 것은 물론 클로닝 과정중에 형태적으로 분화가 없도록 ES세포를 배양하는 것이 카이미리즘이 높은 마우스를 생산하고 아울러 생식선 이행 빈도를 증가시키는데 결정적인 역할을 하는 것으로 확인되었다.

• Radiation Oncology Journal
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• 제19권2호
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• pp.146-152
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• 2001

목적 : 마우스 대뇌조직에 방사선이 조사되었을 경우 아포토시스와 세포주기의 조절작용에 어떤 영향을 미치는 지를 연구하고자 하였다. 대상 및 방법 : 8주간 성숙된 C57B1/6J 마우스의 전뇌에 코발트 방사선조사기로 25 Gy의 방사선을 단일 조사하였다. 방사선조사후 1, 2, 4, 8, 24시간 간격으로 마우스를 경추 탈구사시킨 후 뇌조직을 채취하였다. 채취한 뇌조직을 TUNEL 분석법에 의하며 아포토시스 유도 수준을 평가하였으며 Western blotting법을 이용하여 유전자 산물인 p53, Bcl-2, Bax 그리고 세포주기 조절인자인 cyclin Bl, Dl, E, cdk2, cdk4, $p34^{cdc2}$를 분석하였다. 세포주기의 변화는 유세포분석법에 의하여 분석되었다. 결과 : 아포토시스는 방사선조사후 8시간에서 최고치를 보였고 아포토시스 지수는 $24.0{\pm}0.25$ (p<0.05)였다. 세포주기에서 조절인자의 변화는 cyclin D1를 제외하고는 특이하지 않았다. 결론 : 마우스의 전뇌에 방사선을 조사한 결과 아포토시스는 대뇌의 상의하(subependyma)에서 주로 일어났으며 세포주기의 조절인자에는 영향을 미치지 않는 것으로 판명되었다.

• 한국가축번식학회지
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• 제18권3호
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• pp.191-197
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• 1994

광수용기에서 특이적 발현을 유도하는 로돕신 유전자에 존재하는 다양한 점 돌연변이 의해서 일반적으로 색소성 망막염을 초래한다. 이 질병의 측징은 광수용기 세포의 퇴화로 인한 광수용기의 기능상실을 초래하고, 결과적으로 시각상실을 유발한다. 로돕신 유전자는 광수용기의 바깥분절에 존재하며, 빛 에너지를 흡수하여, 시각반응을 야기한다. 본 실험에 사용된 로돕신 유전자는 총 12.5kb의 돼지 로돕신 게놈 유전자로서, 망막에서 특이발현을 유도하는 4kb의 프로모터, 돌연변이를 지닌 5.6kb의 유전자, 그리고 poly A site로 구성되어 있다. 호르몬 투여에 의해 과배란이 유기된 C57BL/6J 생쥐 난자의 웅성전핵에 미세주입법에 의해 도입한 후, 위임신한 생쥐의 난관에 이식하였다. 그 결과 태어난 산자로부터 돌연변이 로돕신 유전자를 지닌 6마리의 형질전환동물을 PCR과 Southern blot analysis를 통하여 확인할 수 있었다. 또한, 이 형질전환 동물들은 로돕신 유전자를 그 자손에게 안정적으로 전달하는 것을 확인하였다. 본 연구는 광수용기 퇴화의 원인규명 및 치료방법을 연구하기 위하여 돌연변이를 지닌 질환모델동물을 생산하는데 있다. 이들 형질전환 동물은 로돕신 유전자의 돌연변이에 의해 야기되는 시각상실의 기전에 관한 연구와 사람의 장님을 치료하기 위한 질환모델동물로서 유용하게 이용될 것이다.

• Nutrition Research and Practice
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• 제10권5호
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• pp.501-506
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• 2016

BACKGROUNG/OBJECTIVES: Corn silk (CS) extract contains large amounts of maysin, which is a major flavonoid in CS. However, studies regarding the effect of CS extract on cholesterol metabolism is limited. Therefore, the purpose of this study was to determine the effect of CS extract on cholesterol metabolism in C57BL/6J mouse fed high-fat diets. MATERIALS/METHODS: Normal-fat group fed 7% fat diet, high-fat (HF) group fed 25% fat diet, and high-fat with corn silk (HFCS) group were orally administered CS extract (100 mg/kg body weight) daily. Serum and hepatic levels of total lipids, triglycerides, and total cholesterol as well as serum free fatty acid, glucose, and insulin levels were determined. The mRNA expression levels of acyl-CoA: cholesterol acyltransferase (ACAT), cholesterol 7-alpha hydroxylase (CYP7A1), farnesoid X receptor (FXR), lecithin cholesterol acyltransferase (LCAT), low-density lipoprotein receptor, 3-hyroxy-3-methylglutaryl-coenzyme A reductase (HMG-CoA reductase), adiponectin, leptin, and tumor necrosis factor ${\alpha}$ were determined. RESULTS: Oral administration of CS extract with HF improved serum glucose and insulin levels as well as attenuated HF-induced fatty liver. CS extracts significantly elevated mRNA expression levels of adipocytokines and reduced mRNA expression levels of HMG-CoA reductase, ACAT, and FXR. The mRNA expression levels of CYP7A1 and LCAT between the HF group and HFCS group were not statistically different. CONCLUSIONS: CS extract supplementation with a high-fat diet improves levels of adipocytokine secretion and glucose homeostasis. CS extract is also effective in decreasing the regulatory pool of hepatic cholesterol, in line with decreased blood and hepatic levels of cholesterol though modulation of mRNA expression levels of HMG-CoA reductase, ACAT, and FXR.

• Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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• 제27권1호
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• pp.123-130
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• 2014

The A-type lamin deficient mouse line ($Lmna^{-/-}$) has become one of the most frequently used models for providing insights into many different aspects of A-type lamin function. To elucidate the function of Lmna in the growth and metabolism of mice, tissue growth and blood biochemistry were monitored in Lmna-deficient mice, heterozygous ($Lmna^{+/-}$) and wide-type ($Lmna^{+/+}$) backcrossed to C57BL/6 background. At 4 weeks after birth, the weight of various organs of the $Lmna^{-/-}$, $Lmna^{+/-}$ and $Lmna^{+/+}$ mice was measured. A panel of biochemical analyses consisting of 15 serological tests was examined. The results showed that Lmna deficient mice had significantly decreased body weight and increased the ratio of organ to body weight in most of tissues. Compared with $Lmna^{+/+}$ and $Lmna^{+/-}$ mice, $Lmna^{-/-}$ mice exhibited lower levels of ALP (alkaline phosphatase), Chol (cholesterol), CR (creatinine), GLU (glucose), HDL (high-density lipoprotein cholesterol) and higher levels of ALT (alanine aminotransferase) (p<0.05). $Lmna^{-/-}$ mice displayed higher AST (aspartate aminotransferase) values and lower LDL (lowdensity lipoprotein cholesterol), CK-MB (creatine kinase-MB) levels than $Lmna^{+/+}$ mice (p<0.05). There were no significant differences among the three groups of mice with respect to BUN (blood urea nitrogen), CK (creatine kinase), Cyc C (cystatin C), TP (total protein), TG (triacylglycerols) and UA (uric acid) levels (p>0.05). These changes of serological parameters may provide an experimental basis for the elucidation of Lmna gene functions.

• 대한의생명과학회지
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• 제16권4호
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• pp.381-385
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• 2010

Indole-3-carbinol (I3C), one of naturally occurring main components in cauliflower vegetables, is supposed to have a chemopreventive potential in experimental animals and humans. This study was investigated to examine chemopreventive effect of I3C on colon carcinogenesis induced by azoxymethane (AOM) using C57BL/6J mice. Mice were divided into three groups (10 or 9 mice/group). All mice were subcutaneously injected with AOM (5 mg/kg body weight, four times at weekly interval). After AOM treatment, animals of group 1 were fed by AIN-76A pellets as a basal diet. Animals of groups 2 and 3 were given I3C containing diets (100 and 300 ppm in diets, respectively) for 6 weeks until sacrifice. All mice were sacrificed at week 10 and the aberrant crypt foci (ACF) of the colonic mucosa were assessed after staining with methylene blue. Total numbers of ACF/colon in group 2 ($10.1{\pm}5.1$) or group 3 ($10.6{\pm}5.3$) were decreased compared to the values of group 1 ($14.4{\pm}10.2$). Among numbers of ACF formation, 5, 7, 8 and 10 ACF in group 2 and 3 were greatly different those of group 1. Total numbers of aberrant crypts (AC)/colon of group 2 ($20.1{\pm}10.1$) or group 3 ($22.0{\pm}10.9$) were decreased compared to the value of group 1 ($33.7{\pm}24.7$). Taken together, it suggests that I3C treatment may retard mouse colon carcinogenesis even after administration of AOM.

• Biomolecules & Therapeutics
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• 제18권2호
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• pp.171-177
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• 2010

Appetite is inhibited by the anorexigenic neuropeptides POMC (proopiomelanocortin) and CART (cocaine-amphetamine-regulated transcript) in the hypothalamus. The present study was performed to examine the inhibitory effects of baicalin against food intake and the upregulation of POMC/CART. Short-term food intake (48 h) was significantly inhibited by treatment with baicalin (10 mg/kg, p<0.05) in C57BL/6 mice. Immunohistochemical analysis showed that baicalin upregulated POMC and CART levels in the arcuate nucleus of the hypothalamus. These effects were also examined using an in vitro system. pPOMC-Luc or pCART-Luc plasmids were transformed into mouse N29-2 neuronal and human SH-SY5Y cells, and the activities of baicalin were examined in these cells. Baicalin increased POMC and CART promoter-driven luciferase activity in a dose-dependent manner without cytotoxic effects. These results suggest that baicalin downregulates short-term food intake while upregulating POMC and CART expression.

• 생명과학회지
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• 제21권5호
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• pp.647-655
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• 2011

Amyloid ${\beta}$ ($A{\beta}$)의 신경독성은 알츠하이머병의 주된 원인이 되고 이러한 신경독성은 일련의 신경세포 사멸반응에 의해 일어난다고 알려져 있다. 본 연구에서는 알츠하이머병의 실험모델로 mouse primary neuronal cell에 $A{\beta}_{25-35}$를 처리하여 세포독성을 유도하는 세포실험모델과 C57BL/6J mouse 뇌실에 $A{\beta}_{25-35}$를 주입하여 인지장애를 일으키는 동물실험모델을 이용하여 phosphodiesterase III 억제제인 cilostazol의 신경보호 효과에 대해 조사하였다. $A{\beta}_{25-35}$를 신경세포에 처리하면 세포생존율이 감소되었고, 세포사멸이 일어난 세포의 수도 증가되었다. 이러한 $A{\beta}_{25-35}$에 의한 세포독성이 cilostazol처리에 의해 회복되었으며, peroxisome proliferator-activated receptor(PPAR)-${\gamma}$ 항진제인 rosiglitazone 또한 동일한 회복효과를 나타내었다. Cilostazol과 rosiglitazone에 의한 이러한 회복효과가 PPAR-${\gamma}$ 길항제인 GW9662에 의해 다시 억제되는 결과를 통해 cilostazol의 효과는 PPAR-${\gamma}$가 매개하는 신호전달이 관여함을 알 수 있었다. 직접 PPAR-${\gamma}$ 활성화 정도를 측정한 결과, $A{\beta}_{25-35}$ 처리에 의해 감소된 PPAR-${\gamma}$ 활성화 정도가 cilostazol과 rosiglitazone에 의해 증가함을 관찰할 수 있었고, 이는 GW9662에 의해 다시 억제됨을 확인하였다. 게다가, cilostazol은 세포사멸이 일어난 세포의 수와 세포사멸 조절단백질인 Bax/Bcl-2의 비율도 감소시켰다. Cilostazol (20 mg/kg, 구강투여)을 C57BL/6J mice 뇌실에 $A{\beta}_{25-35}$를 주입하기 2주 동안 전처리하고, $A{\beta}_{25-35}$ 주입 후 4주 동안 처리하면, 기억력과 학습능력을 증진시킨다는 결과를 water maze 실험을 통해 알 수 있었으며, rosiglitazone (10 mg/kg)을 먹인 동물에서도 동일한 결과를 얻을 수 있었다. 본 연구를 통해서 cilostazol이 PPAR-${\gamma}$ 활성화를 통해 $A{\beta}_{25-35}$로 인한 신경세포 손상과 세포사멸을 약화시켜, 신경세포의 생존을 증진시키고, 알츠하이머에서 인지장애를 개선할 것으로 생각된다. 따라서, phosphodiesterase III 억제제인 cilostazol은 알츠하이머 질병 치료에 새로운 전략이 될 수 있을 것이다.

• 대한한방내과학회지
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• 제37권3호
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• pp.467-483
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• 2016

Objective: This study was performed to investigate the effect of IUS (Inulsan, an extract of Artemisiae capillaris (茵蔯), Curcumae longae (鬱金), and Crataegi fructus (山査)) on anti-hyperlipidemia, anti-oxidation, and anti-inflammation.Method: We administered water extracts of Artemisiae capillaris, Curcumae longae, and Crataegi fructus for three weeks to db/db mice (C57BL/Ks), animal models induced with type 2 diabetes mellitus. Mice were divided into three groups: normal (C57BL/6J mice group), control group (db/db mice without administration of IUS) and IUS group (db/db mice treated with IUS). Then we measured total cholesterol, LDL cholesterol, HDL cholesterol, and triglyceride in the serum after the oral administration of IUS.Results: 1. IUS did not show any cytotoxicity in RAW 264.7 cells. 2. IUS decreased AST, ALP, and creatinine levelsand did not show any liver or renal toxicity in the db/db mice. 3. IUS increased DPPH and ABTS radical scavenging activity and decreased ROS production in RAW 264.7 cells. 4. IUS significantly decreased IL-1β, IL-6, and TNF-α production in RAW 264.7 cells. 5. IUS increased HDL cholesterol and significantly decreased total cholesterol and triglyceride in db/db mice. 6. IUS significantly decreased the atherogenic index and cardiac risk factor. 7. In contrast with the control group, fat infiltration in the liver and aorta decreased in IUS treated mice. The cell nucleus was located in the central area in H&E staining of liver. And endomembranes also were more thinner than the control group in H&E staining of aorta.Conclusions: These results suggest that IUS might be effective in the prevention and treatment of dyslipidemia.