Seahorse, a syngnathidae fish, is one of the important organisms used in Chinese traditional medicine. Hippocampus abdominalis, a seahorse species successfully cultured in Korea, was validated for use in food by the Ministry of Food and Drug Safety in February 2016; however. the validation was restricted to 50% of the entire composition. Therefore, to use H. abdominalis as a food ingredient, H. abdominalis has to be prepared as a mixture by adding other materials. In this study, the effect of H. abdominalis on muscles was investigated to scientifically verify its potential bioactivity. In addition, the anti-fatigue activity of a mixture comprising H. abdominalis and red ginseng (RG) was evaluated to commercially utilize H. abdominalis in food industry. H. abdominalis was hydrolyzed using Alcalase, a protease, and the effect of H. abdominalis hydrolysate (HH) on the muscles was assessed in C2C12 myoblasts by measuring cell proliferation and glycogen content. In addition, the mixtures comprising HH and RG were prepared at different percentages of RG to HH (20, 30, 40, 50, 60, 70, and 80% RG), and the anti-fatigue activity of these mixtures against oxidative stress was assessed in C2C12 myoblasts. In C2C12 myoblasts, $H_2O_2$-induced oxidative stress caused a decrease in viability and physical fatigue-related biomarkers such as glycogen and ATP contents. However, treatment with RG and HH mixtures increased cell viability and the content of fatigue-related biomarkers. In particular, the 80% RG mixture showed an optimum effect on cell viability and ATP synthesis activity. In this study, all results indicated that HH had anti-fatigue activity at concentrations approved for use in food by the law in Korea. Especially, an 80% RG to HH mixture can be used in food for ameliorating fatigue.
CLA 이성체 mixture와 trans-10,cis-12 CLA는 살아있는 TSU-Prl 세포 수를 감소시키는 반면 LA와 cis-9,trans-11 CLA는 세포 수에 아무런 효과가 없었다. 세포 수를 감소시키는 CLA 이성체 mixture와 tran-10, cis-12 CLA는 apoptotic cell death를 유도하는 것을 관찰하였고, 특히 trans-10,cis-12 CLA는 Bcl-2/Bax 비율을 감소시켰다. Trans-10,cis-12 CLA에 의해 Bax와 Bcl-2 mRNA의 수준이 변하지 않았으므로 이 지방산에 의한 Bcl-2의 변화는 mRNA 전사 후에 일어나는 단계에서 일어난다고 결론지을 수 있다. 이로써 CLA에 의한 세포증식 억제는 부분적으로 TSU-Prl 세포의 apoptosis를 유도함으로서 이루어지는 것이라 할 수 있다.
Kwak, Seong Eun;Shin, Hyung Eun;Zhang, Di Di;Lee, Jihyun;Yoon, Kyung Jin;Bae, Jun Hyun;Moon, Hyo Youl;Song, Wook
운동영양학회지
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제23권2호
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pp.28-33
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2019
[Purpose] Recent studies have shown that glucose-6-phosphate isomerase (GPI)-which is a glycolysis interconversion enzyme-reduces oxidative stress. However, these studies are limited to tumors such as fibrosarcoma, and there are no studies that have examined the effects of exercise on GPI expression in mice skeletal muscle. Furthermore, GPI acts in an autocrine manner thorough its receptor, autocrine motility factor receptor (AMFR); therefore, we investigated expression level changes of secreted GPI from skeletal muscle in in vitro study to examine the potential role of GPI on skeletal muscle. [Methods] First, we performed an in vitro study, to identify the condition that upregulates GPI levels in skeletal muscle cells; we treated C2C12 muscle cells with an exercise-mimicking chemical, AICAR. AICAR treatment upregulated GPI expression level in C2C12 cell and its secretomes. To confirm the direct effect of GPI on skeletal muscle cells, we treated C2C12 cells with GPI recombinant protein. [Results] We found that GPI improved the viability of C2C12 cells. In the in vivo study, the exercise-treated mice group showed upregulated GPI expression in skeletal muscle. Based on the in vitro study results, we speculated that expression level of GPI in skeletal muscle might be associated with muscle function. We analyzed the association between GPI expression level and the grip strength of the all mice group. The mice group's grip strengths were upregulated after 2 weeks of treadmill exercise, and GPI expression level positively correlated with the grip strength. [Conclusion] These results suggested that the exercise-induced GPI expression in skeletal muscle might have a positive effect on skeletal muscle function.
Ali, M. Yusuf;Khan, M.L.A.;Shakir, M.A.;Kobayashi, K. Fukami;Nishikawa, Ken;Siddiqui, Shahid S.
BMB Reports
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제33권2호
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pp.138-146
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2000
In eukaryotes, chromosomes undergo a series of complex and coordinated movements during cell division. The kinesin motor proteins, such as the chicken Chromokinesin, are known to bind DNA and transport chromosomes on spindle microtubles. We previously cloned a family of retrograde C-terminus kinesins in Caenorhabditis elegans that mediate chromosomal movement during embryonic development. Here we report the cloning of a C. elegans klp-12 cDNA, encoding an ortholog of chicken Chromokinesin and mouse KIF4. The KLP-12 protein contains 1609 amino acid and harbors two leucine zipper motifs. The insitu RNA hybridization in embryonic stages shows that the klp-12 gene is expressed during the entire embryonic development. The RNA interference assay reveals that, similar to the role of Chromokinesin, klp-12 functions in chromosome segregation. These results support the notion that during mitosis both types, the anterograde N-terminus kinesins such as KLP-12 and the retrograde C-terminus kinesins, such as KLP-3, KLP-15, KLP-16, and KLP-17, may coordinate chromosome assembly at the metaphase plate and chromosomal segregation towards the spindle poles in C. elegans.
병원성 미생물인 Vibrio fluvialis로부터 hemolysin을 분리정제 하였다. 즉, hemolysin의 정제는 균 배양액을 황산암모늄, ion exchange chromatography를 행하였으며 SDS-PAGE를 통해 그 단백질의 크기가 약 79kDa임을 알게되었다. 정제된 hemolysin (VFH)는 35$^{\circ}C$에서 최적활성을 나타내었고, 4$0^{\circ}C$에서는 그 활성이 감소되었다. RTG-2 어류유래 세포주에 hemolysin (VFH)의 처리로 세포독성을 측정한 결과 50$\mu\textrm{g}$의 VFH가 약 80%의 cell line을 사멸시켰다. 또한 현미경을 통한 관찰에서도 세포의 형태변화를 관찰할 수 있었다.
Conjugated linoleic acid (CLA) is a collective term for positional and geometric isomers of octadecadienoic acid in which the double bonds are conjugated. CLA has anticancer activity in a variety of animal cancer models, and cis-9, trans-11 (c9t11) and trans-10, cis-12(t10c12) CLA are the most predominant isomers present in the synthetic preparations utilized in these animal studies. To compare the ability of c9t11, t10c12 and an isomeric mixture of CLA to inhibit TSU-Prl cell growth, cells were incubated in a serum-free medium with various concentrations of these fatty acids. The isomeric mixture inhibited cell growth in a dose-dependent manner (1-3 $\mu$M) with a 41 $\pm$ 1% inhibition observed at 3 $\mu$M concentration after 48 hours. T10c12 also inhibited cell proliferation in a dote-dependent manner, However, the efficacy and potency of this isomer was much greater than that of the isomeric mixture with a 49 $\pm$ 2% inhibition observed at 0.3 $\mu$M concentration after 48 hours. By contrast, c9t11 slightly increased cell proliferation. To determine whether the growth-inhibiting effect of CLA is related to the changes in production of insulin-like growth factors (IGF) and IGF-binding proteins (IGFBP) by these cells, serum-free conditioned media were collected. Immunoblot analysis of conditioned media using a monoclonal anti-IGF-II antibody showed that both the isomeric mixture and t10c12 inhibited secretion of both mature 7,500 Mr and higher Mr forms of pro IGF-II, whereas c9t11 had no effect. Ligand blot analysis with 125I-IGF-II revealed the presence of two types of IGFBPs : 24,000 Mr IGFBP-4 and 30,000 Mr IGFBP-6. The production of IGFBP-4 slightly decreased at the highest concentrations of the isomeric mixture and t10c12. These results indicate that CLA inhibits human prostate cancer cell growth, an effect largely due to the action of t10c12. The growth inhibition may result, at least in part, from decreased production of IGF-II and IGFBP-4 by these cells.
본 논문에서는 철 이외에 사이데로포 생성에 관여하는 요인을 연구하였다. 약산성(pH6)에서 세포의 양은 감소하는 반면에 세포당 사이데로포의 생성은 증가하였다. 사이데로포 생성의 적정온도는 7NSK2 균주가 $12^{\circ}C$이고 ANP15은 $19^{\circ}C$였다. 배지의 C : N 비율에 따른 사이데로포 생성력을 보면 C : N율이 낮은 배지에서는 사이데로포 생성과 세포생장은 감소됐다. 서로 다른 배지에서 사이데로포 생성을 조사한 바에 의하면 citrate를 탄소원으로 했을 경우 세포의 철 흡수능력이 증가했으며 사이데로포 생성도 감소되었다. 그러나 Glucose나 Succiuate에 비해서 citrate 배치의 세포량에는 별 차이가 나타나지 않았다. 이상의 결과로 보아 환경요인으로 작용할 수 있는 pH나 온도, 탄소원 등은 철분 외에도 사이데로포의 생성에 영향을 미칠 수 있음을 확인하게 되었다.
Background: Propofol (2.6-diisopropylphenol) is a widely used intravenous anesthetic agent for the induction and maintenance of anesthesia during surgeries and sedation for ICU patients. Propofol has a structural similarity to the endogenous antioxidant vitamin E and exhibits antioxidant activities.13) However, the mechanism of propofol on hypoxia/reoxygenation (H/R) injury has yet to be fully elucidated. We investigated how P-PostC influences the autophagy and cell death, a cellular damage occurring during the H/R injury. Methods: The groups were randomly divided into the following groups: Control: cells were incubated in normoxia (5% CO2, 21% O2, and 74% N2) without propofol treatment. H/R: cells were exposed to 24 h of hypoxia (5% CO2, 1% O2, and 94% N2) followed by 12 h of reoxygenation (5% CO2, 21% O2, and 74% N2). H/R + P-PostC: cells post-treated with propofol were exposed to 24 h of hypoxia followed by 12 h of reoxygenation. 3-MA + P-PostC: cells pretreated with 3-MA and post-treated propofol were exposed to 24 h of hypoxia followed by 12 h of reoxygenation Results: The results of our present study provides a new direction of research on mechanisms of propofol-mediated cytoprotection. There are three principal findings of these studies. First, the application of P-PostC at the onset of reoxygenation after hypoxia significantly increased COS-7 cell viability. Second, the cellular protective effect of P-PostC in H/R induced COS-7 cells was probably related to activation of intra-cellular autophagy. And third, the autophagy pathway inhibitor 3-MA blocked the protective effect of P-PostC on cell viability, suggesting a key role of autophagy in cellular protective effect of P-PostC. Conclusions: These data provided evidence that P-PostC reduced cell death in H/R model of COS-7 cells, which was in agreement with the protection by P-PostC demonstrated in isolated COS-7 cells exposed to H/R injury. Although the this study could not represent the protection by P-PostC in vivo, the data demonstrate another model in which endogenous mechanisms evoked by P-PostC protected the COS-7 cells exposed to H/R injury from cell death.
참당귀로부터 열수추출 및 에탄올 침전법을 이용해 조다당을 분리하고 DEAE-Sepharose FF와 Sephadex G-100을 이용하여 얻은 정제 다당 AGE-2c-I을 대상으로 선천 면역 활성 및 항종양 전이 효과를 확인하고자 하였다. 인체의 초기 면역 반응에 있어 중추적인 역할을 수행하는 보체계 활성화 및 활성화 경로를 확인한 결과, AGE-2c-I은 운지버섯 유래 시판 면역증강제인 PSK에 준하는 우수한 활성을 나타내는 것으로 확인되었으며. 본 활성은 주로 고전경로를 통하여 활성화되며 일부 부경로를 경유하는 것으로 최종 확인되었다. 또한 AGE-2c-I은 mouse 복강 유래 대식세포에 대해 직접적인 독성을 나타내지 않으며 종양세포주 YAC-1 및 B16BL6에 대한 직접적인 독성 또한 나타나지 않음을 확인함으로써 시료의 직접적인 독성에 근거한 항암 효과는 없는 것으로 확인되었다. 반면에 비장으로부터 분리한 림프구는 8 ㎍/mL의 AGE-2c-I 처리에 의해 증식능이 관찰되었다. AGE-2c-I이 대식세포의 cytokine 분비능에 미치는 효과를 확인한 결과, 우수한 IL-6, IL-12 및 TNF-α 분비능을 보였으며 시료를 200 ㎍ 및 1,000 ㎍의 고농도로 처리한 실험군에서 IL-10이 분비된 것으로 보아 AGE-2c-I은 immune-stimulator의 역할뿐만 아니라 immune-suppressor로서의 작용 또한 가능한 것으로 확인되었다. 한편 종양 및 암세포에 대하여 직접적인 살해 활성을 나타내는 NK cell 활성을 확인한 실험에서는 농도 의존적인 종양 세포 살해능을 확인할 수 있었으며 100 ㎍/mouse 농도에서 NC 대비 약 1.5배 높은 NK cell 활성을 나타냈을 뿐만 아니라, 폐에 대한 고전이성 종양세포주인 B16BL6 melanoma 세포를 이용한 실험동물 종양 전이 모델에선 100 ㎍/mouse 농도로 처리한 실험군이 NC 대비 58%의 colony가 감소한 것을 확인할 수 있었다. 이상의 결과로 부터 참당귀 유래 RG-I 구조의 다당은 높은 선천면역계 자극 활성, 특히 보체계, 대식세포, 림프구 증식, NK cell의 활성화를 통해 우수한 항종양 전이 효과를 갖는 것으로 최종 확인되었으며 건강기능성식품 소재로의 개발가치가 우수한 것으로 판단되었다.
We present high-voltage liquid-electrolyte microbatteries, inspired from the high-voltage generation mechanism of electric eels using serially connected multiple-cell arrays. In the microbatteries, we purge air into the electrolyte filled in a channel layer to isolate serially connected multiple cell arrays using three surface-tension valves (cell-front, outlet, and cell-end valves). Compared to the previous multi-cell stack or interconnection, present microbatteries provide a reduced multi-cell charging time. We have designed and characterized four different prototypes C1, C10, C20, and C40 having 1, 10, 20, and 40 cells, respectively. In the experimental study, the threshold pressures of cell-front, outlet, and cell-end valves were measured as $460{\pm}47$, $1,000{\pm}53$, and $2,800{\pm}170$ Pa, respectively. The average charging time for C40 was measured as $26.8{\pm}4.9$ seconds where the electrolyte and air flow-rates are 100 and $10{\mu}l/min$, respectively. Microbatteries showed the maximum voltage of 12 V (C40), the maximum power density of $110{\mu}W/cm^2$ (C40), and the maximum power capacity of $2.1{\mu}Ah/cm^2$ (C40). We also proposed a tapered-channel to remove the reaction gas from the cell chamber using a surface tension effect. The present microbatteries are applicable to high-voltage portable power devices.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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