• 한국환경보건학회지
• /
• 제23권4호
• /
• pp.45-49
• /
• 1997

Clostridium perfringens A형이 생산하는 장독소를 검색해본 결과, RPLA법에 있어서는 2배로 희석한 용액으로부터 64배로 희석한 용액 (NCTC 8239 Hobbs serotype 3 CPE$^+$)에서까지 양성반응을 보였으며 PCR 기법에 있어서는 10 pg 희석 용액까지 364 bp의 장독소 DNA fragment(NCTC 8238 Hobbs serotype 2 CPE$^+$)를 확인 할수 있었다. 그러므로 장독소를 검색하기 위해서는 PCR기법이 RPLA법에 비하여 훨씬 감도가 높음을 확인할 수 있었다.

• 한국식품영양학회지
• /
• 제13권1호
• /
• pp.1-5
• /
• 2000

Detection for heat-labile enterotoxin(LT) of enterotoxigenic Escherichia coli(ETEC, EC81, O148:H28) and enterotoxin of enterotoxigentic Clostridium perfringents type A(CP, NCTC8238, Hobbs serotype 2) by use of a polymerase chain reaction (PCR) assay were positive reaction, which using LT gene-specific primers of ETEC with a detection limit equivalent from 100ng/${\mu}\ell$ to 1 pg of a DNA fragment of 417-bp in EC81 and enterotoxin gene-specific primers of CP with a detection limit equivalent from 100ng/${\mu}\ell$ to 10pg of a DNA fragment of 364-bp in NCTC8238. Detection for a LT gene of ETEC highly appeared 10-fold sensitivity than an enterotoxin gene of CP.

• 한국식품과학회지
• /
• 제35권1호
• /
• pp.97-102
• /
• 2003

Cook-chill 제품의 원료로 사용하는 시금치와 수세한 시금치에 대해 Aeromonas hydrophila, Escherichia coli O157:H7, Plesiomonas shigelloides, Pseudomonas aeruginosa, Salmonella spp., Shigella spp., Yersinia enterocolitica, Bacillus cereus, Campylococcus spp., Clostridium perfringens, Listeria monocytogenes, Staphylococcus aureus 등 12종류의 병원성세균의 존재 여부를 확인하였다. 이들 시금치로부터 4종의 병원성세균을 분리하여 API kit와 ATB 자동 동정기를 포함한 형태학적 및 생화학적 방법에 의해 동정하였다. MacConkey agar에서 분리된 균은 그람 음성 간균으로 glucose를 이용하여 gas를 생성하며, lactose 음성, sucrose 양성, lysine 양성으로 ATP system에서 A. hydrophila 종에 대해 99.9%의 상동성을 보였다. Cereus Selective agar에서 분리된 균은 그람 양성 간균, 포자 형성균으로 catalase 양성, mannitol 음성, lecithinase 양성, Simmon's citrate 음성, $NO_2$ 생성 양성, arginine 양성균으로 ATB system에서 B. cereus 종에 대해 99.8%의 상동성을 보였다. Clostridium Perfringens agar에서 분리된 균은 그람 양성 간균, 혐기성균으로 포자를 형성하며, mannitol 양성, lecithinase 양성으로 ATB system에서 C. perfringens 종에 대해 99.9%의 상동성을 보였다. Baird-Parker agar에서 분리된 균주는 그람 양성 구균으로 mannitol, lecithinase, lactose, clumping factor, coagulase 및 hemolysin 양성, xylose 음성으로 ATB system에서 S. aureus 종에 대해 97.8%의 상동성을 보였다. Salmonella spp., E. coli O157:H7, Y. enterocolitica를 포함한 다른 병원성세균은 분리되지 않았다. 시금치에서 분리한 S. aureus 5균주 중 2균주는 SET-RPLA kit에서 enterotoxin type A를 생성하였고 3균주는 enterotoxin을 생성하지 않았다. B. cereus 5균주는 CRET-RPLA kit에서 모두 enterotoxin을 생성하였다.

• Journal of Preventive Veterinary Medicine
• /
• 제42권4호
• /
• pp.148-156
• /
• 2018

Clostridium perfringens (C. perfringens) may cause diarrhea and enterotoxemia in adult and young livestock, leading to problems in the production and management of farms. Four hundred fecal samples were collected from 25 goat farms located in Gyeongsangbuk-do Province in the Republic of Korea. Sixteen C. perfringens strains were isolates from fecal samples, and the isolates were identified as type A (n=11) and type D (n=5). Additionally, ${\alpha}$- and ${\varepsilon}$-toxin genes were detected in 16 and 5 strains by PCR, respectively, and the enterotoxin gene was presented in 2 strains. The antibiotic susceptibility test was performed using the disk diffusion method and E-test method. In the disk diffusion method, ampicillin (n=16) and chloramphenicol (n=15) were highly susceptible to 16 C. perfringens isolates. In the E-test method, ampicillin, amoxicillin, amoxicillin/clavulanic acid and meropenem were susceptible to more than 14 of 16 C. perfringens isolates. This study indicates that administration of antibiotics such as ampicillin, amoxicillin/clavulanic acid and meropenem can prevent and treat C. perfringens infections in goats.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
• /
• 제16권2호
• /
• pp.291-294
• /
• 2006

Clostridium perfringens strains were isolated from swine diarrhea in Korea. Three out of nineteen (15.8%) isolates of C. perfringens were found to be enterotoxigenic by PCR analysis. PCR-based genotyping of the three enterotoxigenic isolates of C. perfringens revealed that they were types A, C and D, respectively. These results suggest that various types of enterotoxigenic C. perfringens can cause swine diarrhea, and that the presence of enterotoxigenic type A strain, known to be strongly associated with food poisoning, may cause public health problem in Korea.

• 한국식품위생안전성학회지
• /
• 제36권1호
• /
• pp.93-99
• /
• 2021

본 연구에서는 PCR법을 이용하여 농산물 중 enterotoxin 생성 Clostridium perfringens를 신속 분석할 수 있도록 전 처리법을 확립하고자 수행하였다. 이를 위하여 C. perfringens 포자를 상추, 토마토, 고추, 들깻잎에 102, 103, 104, 105, 106, 107 spore/g 농도로 포자를 접종하였다. 포자가 접종된 농산물들은 pulsifier, stomacher, sonicator로 처리하고 boiling법 혹은 상용화 된 kit로 DNA를 추출한 후 PCR법을 수행하고 검출한계를 비교하였다. 그 결과, 3가지 전처리법에 있어서는 pulsifier가, DNA 추출에 있어서는 상용화된 DNA 추출 kit를 활용하는 것이 농산물 중 C. perfringens의 검출한계를 10-100배 낮출 수 있었다. 특히 들깻잎, 방울토마토처럼 전처리 방법에 따른 탁도의 변화가 큰 농산물은 전처리법과 DNA 추출법이 PCR 반응에 미치는 영향이 큰 것으로 나타났다. 따라서 본 연구 결과를 통해 볼 때 PCR법을 이용한 농산물 중 C. perfringens를 검출하는데 있어 검출감도를 높이기 위해서는 pulsifier를 이용하여 전처리하고 상용화된 DNA 추출 kit를 사용하는 것이 적절한 것으로 판단된다.