Candida albicans, a polymorphic fungus, causes systemic and local infections. Recent reports show that the fungus is a main etiological agent for the arthritis. For trea tment, antifungal drugs and/or rheumatoid drugs are used, but resistance and side effects limit application of the drugs. In search of new sources for treatment of the fungal arthritis, we choose Egb 761 (extract of Ginkgo leaves 761), one of the most popular over-the-counter herbal medicines. The Egb 761 contains two major ingredients such as terpene and flavonoid. In the present study, we examined if the terpene portion of Egb 761 had anti-inflammatory activity against C.albicans-caused arthritis. The terpene was extracted with combination of methanol and water from the Egb 761, followed by gel-permeation chromatography. Presence of terpene was determined by the Salkowski colorimetric method and HPLC analysis. For an animal model of inflammation induction, mice were given an emulsion form of C.albicans cell wall mixed with Complete Freund's Adjuvant (CFA) by footpad-injection. Results showed that intraperitoneal administration of the water-soluble portion that contained terpene and flavonoid reduced the inflammation. Whereas the terpene had anti-inflammatory activity, flavonoid portion had no such activity, For determination of possible mechanism of the activity, the terpene seemed to be suppression of nitric oxide (NO) production from LPS-treated macrophages. Taken together the Ginkgo terpene may have anti-inflammatory effect against C.albicans-caused arthritis, possibly by blocking NO production.
Objectives: This in vitro study aimed to investigate the ability of Candida albicans (C. albicans) and Enterococcus faecalis (E. faecalis) to penetrate dentinal tubules of instrumented and retreated root canal surface of split human teeth. Materials and Methods: Sixty intact extracted human single-rooted teeth were divided into 4 groups, negative control, positive control without canal instrumentation, instrumented, and retreated. Root canals in the instrumented group were enlarged with endodontic instruments, while root canals in the retreated group were enlarged, filled, and then removed the canal filling materials. The teeth were split longitudinally after canal preparation in 3 groups except the negative control group. The teeth were inoculated with both microorganisms separately and in combination. Teeth specimens were examined by scanning electron microscopy (SEM), and the depth of penetration into the dentinal tubules was assessed using the SMILE view software (JEOL Ltd). Results: Penetration of C. albicans and E. faecalis into the dentinal tubules was observed in all 3 groups, although penetration was partially restricted by dentin debris of tubules in the instrumented group and remnants of canal filling materials in the retreated group. In all 3 groups, E. faecalis penetrated deeper into the dentinal tubules by way of cell division than C. albicans which built colonies and penetrated by means of hyphae. Conclusions: Microorganisms can easily penetrate dentinal tubules of root canals with different appearance based on the microorganism size and status of dentinal tubules.
Using two drugs, tunicamycin and brefeldin A, which affect protein processing, we investigated the intracellular processing mechanism of secreted aspartyl proteinase 1 (SAPl) of Candide albicans. Three intracellular forms of SAPI were detected by immunoblotting using menoclonal antibody (MAb) CAPl. Their molecular weights were approximately 40, 41 and 45 kDa, respectively. The 41 kDa protein is a glycoprotein and may be the same as the extracellular form judging by its molecular mass. The 40 kDa protein was the unglycosylated form and its molecular mass coincided with deglycosylated SAPl and the 45 kDa protein was also the unglycosylated form. Neither the 40 and 45 kDa proteins were detected in the culture supernatant of C. albicans. These suggested that the 40 and 45 kDa proteins might be intracellular precursor forms of SAPI. These results show that SAPI is translated as a 45 kDa precusor form in the endoplasmic reticulum and the 45 kDa precursor farm undergoes proteolytic cleavage after translocation into the Golgi apparatus, generating the 40 kDa precursor form. This 40 kDa precursor is converted into a 41 kDa mature form through glycosylation in the Golgi apparatus. The mature form of the 41 kDa protein is sorted into secretary vesicles and finally released into the extracellular space through membrane fusion. When the glycan region of SAPl was digested with N-glycosidase F, both stability and activity of the enzyme decreased. These results indicate that the glycan attached to the enzyme may, at least in parti be related to enzyme stability and activity.
Plasma membrane from the fungal cells (Aspergillus phoenicis, Rhizopus acidus, Candida albicans) treated with sodium benzoate (S.B), potassium sorbate (P.S) and calcium propionate (C.P) during the cultivation were separated. The contents and patterns of plasma membrane proteins compared with those of the control. The growth of A. phoenicis was decreased by the average 64.0% in the S.B treatment. That of R. acidus was inhibited by the average 69.0% in the P.S treatment. Also, That of C. albicans was showed the deminution of the average 59.5% in the S.B treatment. The contents of protein involved in the plasma membrane of the each fungal cells were inhibited the average 41.0%, 41.7% and 59.5% in the S.B treatment, respectively. In case of A. phoenicis, the changes in the protein pattern involved in the plasma membraneshowed the aspect similar to the control on the 1st day and 2nd day of cultivation in the treatment group, but $116\;KD{\sim}97\;KD$ band almost disappeared in the 5th day of cultivation, and $45\;KD{\sim}29\;KD$ band was uncleared through the cultivation. In S.B treatment group R. acidus was showed the loss of $116\;KD{\sim}97\;KD$ band from the middle stage of cultivation and P.S, and C.P treatment group were started the loss at the early stage and completely lost at the 36 hours of cultivation. In C. albicans, $116\;KD{\sim}97\;KD$ band were started the loss at the early stage to compare with the control and $66\;KD{\sim}45\;KD$ band were dimmed at the 96 hours of cultivation. Especially, the C.P treatment group were perfectly lost at the 96 hours of cultivation.
Park, Kang-Sik;Kang, Heui-Il;Lee, Jong-Wook;Paik, Young-Ki
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.14
no.4
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pp.693-697
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2004
YH-1715R, (2R,3R)-2-(2,4-difluorophenyl)-3-(3-methoxy-1,2,4-isothiazol-3-yl-thio)-1-( 1H-1,2,4-triazol-l-yl)-2-butanol, a new triazole derivative obtained by the structural modification of fluconazole, was found to exhibit potent anti-Candida activity against a wide variety of Candida albicans (C. albicans) (MIC: 0.4-12.5 mg/l). To investigate the mode of action of YH-1715R, its effect on ergosterol biosynthesis in cell-free extracts and whole cells of C. albicans was examined. The inhibitory activity of YH-1715R was approximately ten-fold higher than that of fluconazole. To determine the primary action mechanism of YH-1715R, its inhibitory activity against lanosterol $14\alpha$-demethylase (14$\alpha$-DM), a major target for azole, was measured using gas-liquid chromatography. YH-1715R and fluconazole were found to inhibit 14a-DM with an $IC_{50}$ of 0.015 $\mu$M and 0.01$8\mu$M, respectively, plus the mode of inhibition of YH-1715R and fluconozole was noncompetitive with a $K_i$ of 0.0533$\mu$M and 0.0975$\mu$M.
Proceedings of the Korean Biophysical Society Conference
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2003.06a
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pp.61-61
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2003
We have cloned the CGR1 gene encoding glutathione reductase (GR) which catalyzes the reduction of oxidized glutathione (GSSG) to reduced glutathione (GSH) from Candida albicans. The cgr1/cgr1 mutants were not viable when CaMAL2 promoter repressed the CGR1 expression. The growth of the mutants could be partially overcome by thiol compounds such as GSH, dithiothreitol, cysteine, N-acetylcysteine and GSSG. Interestingly, C. albicans with CGR1 overexpressed showed defective hyphal growth on solid medium and attenuated virulence. We have also cloned the GCS1 gene encoding ${\gamma}$-glutamylcysteine synthetase which catalyzes the first step of glutathione biosynthesis. The gcs1/gcs1 mutants were nonviable in minimal defined medium. The growth of the mutants could be resumed by supplementing with GSH, GSSG and ${\gamma}$-glutamylcysteine in the medium. The mutants had increased intracellular D-erythroascorbic acid level up to 2.25-fold when transferred to GSH-free medium. When the mutants were depleted of GSH, they showed typical markers of apoptosis. In conclusion, these results suggest that glutathione is an essential metabolite, and involved in hyphal growth, virulence and apoptosis in C. albicans.
Bud6p is a component of a polarisome that controls cell polarity in Saccharomyces cerevisiae. In this study, we investigated the role of the Candide albicans Bud6 protein (CaBud6p) in cell polarity and hyphal development. CaBud6p, which consists of 703 amino acids, had 37% amino-acid sequence identity with the Bud6 protein of S. cerevisiae. The homozygous knock-out of CaBUD6 resulted in several abnormal phenotypes, such as a round and enlarged cells, widened bud necks, and a random budding pattern. In hypha-inducing media, the mutant cells had markedly swollen tips and a reduced ability to switch from yeast to hypha. In addition, a yeast two-Hybrid analysis showed a physical interaction between CaBud6p and CaAct1p, which suggests that CaBud6p may be involved in actin cable organization, like Bud6p in S. cerevisiae. Taken together, these results indicate that CaBud6 plays an important role in the polarized growth of C. albicans.
IL-33 is a multifunctional cytokine that is released in response to a variety of intrinsic and extrinsic stimuli. The role of IL-33 in Candida albicans infections is just beginning to be revealed. This cytokine has beneficial effects on host defense against systemic C. albicans infections, and it promotes resistance mechanisms by which the immune system eliminates the invading fungal pathogens; and it also elevates host tolerance by reducing the inflammatory response and thereby, potentially, tissue damage. Thus, IL-33 is classified as a cytokine that has evolved functionally to protect the host from damage by pathogens and immunopathology.
Glutathione (GSH) is a vital compound composed of glutamic acid, cysteine, and glycine, crucial for cellular functions including oxidative stress defense and detoxification. It has widespread applications in pharmaceuticals, cosmetics, and food industries due to its antioxidant properties and immune system support. Two primary methods for GSH synthesis are enzymatic and microbial fermentation. Enzymatic synthesis is efficient but costly, while microbial fermentation, particularly using yeast strains like Candida albicans, offers a cost-effective alternative. This study focuses on genetically modifying C. albicans mutants, specifically targeting glutathione reductase (GLR1) and gamma-glutamylcysteine synthetase (GCS1) genes, integral to GSH synthesis. By optimizing these mutants, the research aims to develop a model for efficient GSH production, potentially expanding its applications in the food industry.
HWANG EUI IL;YUN BONG SIK;YEO WOON HYUNG;LEE SANG HAN;MOON JAE SUN;KIM YOUNG KOOK;LIM SE JIN;KIM SUNG UK
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.15
no.4
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pp.909-912
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2005
In the course of screening for selective growth inhibitors against the mycelial form of Candida albicans, we isolated a Streptomyces sp. A6792 from soils. The inhibitor was isolated from the above bacterium and identified through several spectral analyses with UV and mass spectrophotometries, and various NMR. The compound was determined to be a macrocyclic dilactone antibiotic, IKD-8344 (molecular weight: 844, molecular formula: $C_{48}H_{76}O_{12}$). The compound selectively inhibited the growth of mycelial form of C. albicans with an MIC of 6.25 ${\mu}g/ml$. It also exhibited strong inhibitory effect preferentially on the mycelial form of various Candida spp. including C. krusei, C. tropicalis, and C. lusitaniae, with MICs ranging from 1.56 to 25 ${\mu}g$/ml. Furthermore, the compound showed no significant toxicity against SPF ICR mice up to 60 mg/kg. These results suggest that IKD-8344 is a useful lead compound for the development of novel antifungal agents, based on the preferential growth inhibition against Candida spp.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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