사과 '홍로' 품종은 품질이 우수하여 재배면적이 증가되고 있는 중요한 품종으로 최근 일부 농가에서 과실 크기가 작아지면서 과육이 딱딱해지고 과즙이 거의 없어지는 소과증상이 발생되고 있어 재배현장에서 문제가 제기되고 있다. '홍로' 품종의 소과증상은 주요 재배지역에서 조사한 결과 조사농가당 홍로품종 재배주수의 평균 12%정도 발생되고 있었으며 ELISA에 의한 바이러스 진단 결과 소과 발생나무에서 고농도의 ACLSV가 100% 검출되었다. 즙액 접종한 C. quinoa에서 ACLSV가 분리되었으며, 접목 접종한 목본지표식물에서도 잎 상편생장 및 줄기괴사 병징을 나타내어 접목전염성이 확인되었다. 소과증상의 원인 구명을 위해 열처리와 생장점배양으로 육성된 바이러스 무독주에 인위적으로 ACLSV 등 바이러스를 접목접종 한 다음 결실된 과실의 특성을 조사한 결과 ACLSV 접종주에서 소과증상이 발생되는 것을 확인할 수 있었다. 결론적으로, 소과증상을 일으키는 주된 요인이 ACLSV 감염에 의한 것으로 판단되며 국내 육성종인 '홍로' 품종은 ACLSV에 대한 감수성 품종으로 분류될 수 있을 것으로 판단된다.
전라북도의 진안, 장수, 정읍 등의 3개 지역에서 재배하고 있는 지황에 바이러스 병징이 관찰되어 ELISA 방법으로 TMV의 감염 여부를 확인한 결과 3개 지역 모두에서 ELISA 양성 반응을 나타내었다. N. glutinosa를 이용, 순수분리 및 증식한 이병주의 바이러스 입자를 관찰한 결과, 폭 18nm, 길이 300nm의 막대 모양의 바이러스가 관찰되었다. 또한 epoxy수지를 통해 이병조직의 세포질내에서 많은 바이러스 입자가 군집 또는 산재되어 있음이 관찰되었다. TMV의 병징은 즙액 접종 4주 후부터 담배 잎의 본엽에 부분적으로 반점이 보이다가 46주 후에는 황화 현상과 괴사 현상이 나타났다. 이병주로부터 total RNA를 분리하여 RTPCR을 수행한 결과 531bp DNA 증폭 산물을 얻었으며 genetyx win program을 이용하여 외피단백질의 염기수준에서 비교 분석한 결과, TMVT, V, To 세 계통에서 각각 94.83%로 가장 높게 나타났고, TMVP계통에서 67.35%로 가장 낮게 나타났다. 아미노산 수준에서는 TMVT, V, To 세 계통에서 각각 97.65%로 가장 높게 나타났고, TMVP계통에서 72.22%로 가장 낮게 나타났다. 기타 계통들간에는 TMV152, F 계통에서 94.05%, TMVC 계통에서 68.63% 유사도를 나타냈다.
Geumji Seung;Jiye Kim;Hyobi Kim;Ji-Yeon Kim;Yang-Ho Jang;Yeon-Hee Kim;Moon Her;Seong-Joon Yi;Keun-Woo Lee;Il Jang;Young Ju Lee
대한수의학회지
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제62권4호
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pp.29.1-29.7
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2022
Vaccination against Newcastle disease (ND) is the most effective means of controlling the disease, and these vaccines are commercialized only after their safety and effectiveness have been verified through tests that comply with Korean Standards of National Lot Release for Veterinary Biologics. This study investigated whether a relatively convenient and safe serological test can be used in place of the challenge test using highly virulent ND virus. Hemagglutination inhibition (HI) assay and enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) were considered positive of log2 2 or more and cutoff value of 200 or more, respectively, in both live and inactivated vaccines. However, when the antibody levels of the live and inactivated vaccines induced using the Ulster 2C, KBNP-C4152R2L, and K148/08 strains were compared, the antibody titers for inactivated vaccines were significantly higher than those for live vaccines in both the HI assay and ELISA. A strong positive correlation was observed between HI and ELISA antibody titers. The live vaccines corresponded to a survival rates of ≥ 80% and the inactivated vaccines corresponded to 100% survival rates. This study confirmed that standard efficacy tests can serve as serological tests, and can replace the challenge test and that the vaccine approval process can be improved.
Objective: Graves' disease encompasses hyperthyroidism and diffused goiter associated with auto-antibodies to the thyroid stimulating hormone(TSH) receptors. In clinical environment, treatments of Graves' disease have many side effects such as recurrence and hypothyroidism. We've studied the effects of Sipyukmiyukieum on DNA synthesis, cAMP synthesis, and MHC-class II expression of FRTL-5 thyroid cells were studied. Methods: DNA synthesis was investigated by using BrdU staining and cAMP synthesis by ELISA kit, and expression of $interferon-{\gamma}$ activated MHC class II by Flow cytometer. Results: After introduction of Sipyukmiyukieum, significant inhibition of DNA synthesis. cAMP synthesis, and expression of $interferon-{\gamma}$ activated MHC class II of FRTL-5 thyroid cells was observed. Conclusions: Judging from these results, Sipyukmiyukieum has potential as a potent herbal treatment for inhibiting the enlargement of goiter, synthesis of abnormal thyroidal hormones, and autoimmuine responses of Graves' disease.
Background: A red seaweed, Callophyllis japonica has been traditionally eaten in the oriental area. In a recent study, it has been demonstrated that the ethanol extract of C. japonica have antioxidant activity. However, there are few studies about the effects of C. japonica on the function of immune cells. We investigated the immunomodulatory effects of C. japonica on the function of dendritic cells, the potent antigen-presenting cells. Methods: Bone marrow-derived dendritic cells (DCs) were used and the viability was measured by 3-[4,5-dimethylthiazol-2-yl]-2,5-diphenyltetrazolium bromide assay and trypan blue exclusion test. Cytokine and nitric oxide (NO) levels were determined by using ELISA and Griess reagent, respectively. The expression levels of DC surface markers were measured by flow cytometric analysis. Results: C. japonica ethanol extract did not significantly affect the DCs viability and the IL-12 production from DCs, irrespective of the presence of lipopolysaccharide (LPS). In addition, it did not significantly change the expression of DC surface markers. However, C. japonica ethanol extract significantly inhibited the LPS-induced NO production and also increased the proliferation of allogeneic lymphocytes activated by DCs. Conclusion: Our data suggests that C. japonica ethanol extract enhances the proliferation of allogeneic lymphocytes activated by DCs which is associated with inhibition of NO production from DCs induced by LPS.
Among the various receptor molecules discovered so far the ${\beta}$2-adrenergic receptors have been regarded as excellent model systems for the so called 7 transmembrane helix receptor and have been the focus of extensive studies. For the analysis of receptor structure and function a monoclonal antibody plays a crucial role, thus providing useful tools for the study of receptor. However, because of the minute quantity of receptor molecules which could be obtained from natural sources, the generation of specific monoclonal antibody against receptor molecules from the purified receptors has been regarded as virtually impractical in consideration of cost and experimental times. The purpose of the present study was to generate and characterize a monoclonal antibody against human ${\beta}$2-adrenergic receptor. For the production of antibody, C-terminal regions of the human ${\beta}$2-adrenergic receptor was produced as a fusion protein with Glutathion S-transferase (GST) in E. Coli. The expression of the fusion protein was identified by SDS-PAGE and Western blot using monoclonal anti-GST antibody. The fusion protein was purified to an apparent homogeniety by affinity chromatography with Glutathion Sepharose CL-4B and used as an antigen for the immunization of BALB/C mice. The Production of monoclonal antibody was achieved by fusion of the immunized spleen cells and SP/2-0 myeloma cells. Positive hybridomas were screened by ELISA and were cloned by two consecutive rounds of limiting dilution. The monoclonal antibody produced in this study (mAb${\beta}$C02) was IgM type and purified by immunoaffinity chromatography using anti-mouse IgM agarose as an affinity matrix. MAb${\beta}$C02 showed strong and specific immunoreactivity against both the fusion protein and human ${\beta}$2-adrenergic receptor in ELISA and Western blot. The molecular weight of immunoreactive band was 64 kDa and exactly coincided with the previously reported molecular weight of ${\beta}$2-adrenergic recepters. The results of the present study suggest that mAb${\beta}$C02 may be used for the study of receptor function and regulation in normal or nonphysiological status.
본 연구에서는 Candida albicans로 유도한 염증반응에 대해 스쿠알렌의 처치를 통해 염증반응을 경감시키는가에 대해 확인하였다. 실험동물은 (ICR계 생쥐) 각 실험군별 7마리씩을 사용하여 생체 내 실험을 하였다. Candida albicans-유도 염증인자 중 종양괴사인자-알파, 인터루킨-6, 산화질소는 ELISA kits 방법을 이용하여 관찰하였다. 실험을 통해 다음과 같은 결론을 얻었다. 1. Candida albicans를 감염시킨 군에서 1, 3일째 모두 신장조직 내에서의 산화질소 생성량을 감소시키는 것을 확인할 수 있었다 (p< 0.05). 2. 스쿠알렌 (80ml/kg)을 7일간 1일 1회 전 처치(복강투여)한 다음, Candida albicans를 감염시킨 군에서 3일째 군에서만 신장 조직 내에서의 종양괴사인자-알파 생성량을 감소시키는 것을 확인할 수 있었다(p< 0.05). 3. 스쿠알렌 (80m/kg)을 7일간 1일 1회 전 처치(복강투여)한 다음. Candida albicans를 감염 시킨 군에서 3일째 군에서만 신장 조직 내에서의 인터루킨-6 생성량을 감소시키는 것을 확인할 수 있었다(p< 0.05). 결론적으로 스쿠알렌이 Candida albicans-유도 염증인자들의 억제를 위해서는 예방적 차원에서 스쿠알렌을 공급하는 것이 효과가 있음을 알 수 있었다. 따라서 스쿠알렌 처치가 Candida albicans-유도 면역억제에 대해 회복 효과를 기대할 수 있을 것으로 사료된다.
Objectives : In the present study, we investigated anti-inflammatory effects of chloroform fraction of Coptidis rhizoma (CR-C) on the production of inflammatory mediators such as nitric oxide (NO) and proinflammatory cytokines, tumor necrosis factor-alpha (TNF-${\alpha}$) and interleukin-1beta (IL-1${\beta}$) in LPS-stimulated BV2 microglial cells. Methods : Copriditis rhizoma was extracted with 80% methanol, and then extracted with chloroform. BV2 cells were pre-treated with CR-C, and stimulated with LPS. The cytotoxicity was determined by MTT assay. The production of NO and cytokines was measured by Griess assay and ELISA. The mRNA expression of inducible nirtic oxide synthase (iNOS) and cytokines were determined by RT-PCR. Results : CR-C significantly inhibited the production of NO. TNF-${\alpha}$ and IL-1${\beta}$ in a dose-dependent manner in LPS-stimulated BV2 cells. In addition, CR-C suppressed the mRNA expressions of iNOS and inflammatory cytokines induced by LPS stimulation. These results indicate that CR-C was involved in anti-inflammatory effects in activated microglia. Conclusion : The present study suggests that chloroform extract of Coptidis rhizoma can be useful as a potential anti-inflammatory agent for treatment of various neurodegenerative diseases.
We observed the time gap between oocyst shedding and antibody responses in mice (3-week-old C57BL/6J females) infected with Cryptosporidium parvum. Oocyst shedding was verified by modified acid-fast staining. The individually collected mouse sera were assessed for C. parvum IgM and IgG antibodies by enzyme-linked immunosorbent assay from 5 to 25 weeks after infection. The results showed that C. parvum oocysts were shed from day 5 to 51 post-infection (PI). The IgM antibody titers to C. parvum peaked at week 5 PI, whereas the IgG antibody titers achieved maximum levels at week 25 PI. The results revealed that IgM responses to C. parvum infection occurred during the early stage of infection and overlapped with the oocyst shedding period, whereas IgG responses occurred during the late stage and was not correlated with oocyst shedding. Hence, IgM antibody detection may prove helpful for the diagnosis of acute cryptosporidiosis, and IgG antibody detection may prove effective for the detection of past infection and endemicity.
Wasabies showing mosaic symptoms were collected and extracted for virus purification. Tobacco mosaic virus (TMV) was identified as causal agent by electron microscopy and nucleic acid and coat protein analyses. TMV strains were determined by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). TMV was identified as W and C strain in wasabi. The results of host reaction indicated that this virus induced local lesions on Nicotiana tabacum cv. Bright Yellow and N. glutinosa, leaf spots on Chenopodium amaranticolor and mosaic symptoms on wasabi. Rot shape virus particles were observed and was about 300 nm in length. About 6.5 kb single RNA molecule was observed from extracted viral RNA sample and 26 KDa coat protein was detected in denatured acrylamide gel. Infection ratio of TMV was 8% for the first cultivation year, but was 22% for the second year when TMV-W antiserum was used. The results of this experiment showed that infection ratios of both TMV-W and TMV-C strains were higher compared to that of TMV-P strain.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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