분만전후 Sprague Darwley 암컷 쥐에서 양적으로 식이를 계한하여 임의로 먹인 Control group의 일일평균섭취량이 1/2의 시중사료를 식이제한 group에게 주었다. Control group은 실험기간 동안 임의로 먹게 두었고, Deficient I group은 임신중에는 임의로 먹였고 분만후부터 이유시까지는 1일 20g의 사료를 주었다. Deficient II group은 임신 15일부터 분만시까지 1일 15g의 사료를 주었고 분만후부터 이유시까지는 1일 20g의 사료를 주었다. 각 group에서 새끼쥐가 출생한 날을 0일로 해서, 0, 3, 7, 10, 14, 21일에 새끼쥐의 serotonin, ca-techolamine 및 tryosine의 함량을 측정했다. 새끼쥐 뇌의serotonin함량은 control group에 비해 식이제한 group에서 출생 7일부터 유의적으로 낮아졌으며, 두 식이제한 group사이에서는 출생 14일과 21일에 유의적인 차를 보였다. 뇌에서 norepinephrine과 dopamine같은 catecholamine은 Control group보다 식이제한 group에서 유의적으로 낮았지만, 두 식이제한 group사이에서는 유의적 차를 보이지 않았다. Catecholamine의 전구체인 tyrosine은 식이제한 group의 뇌에서보다 Control group에서 출생 3일에 유의적으로 낮았으며, 출생 14일에는 Deficient I group의 tyrosine함량이 Control group과 Deficient II group의 뇌에서 보다 유의적으로 낮았다. 임신 마지막 주와 수유시의 어미쥐의 식이제한은 새끼쥐 뇌에서 정상적인 catecholamine합성을 지연시켜 주는 것으로 추측되며, 만일 식이제한을 시키는 기간을 이유 후로 연장시켜 주면, 뇌에서 유의적으로 낮은 catecholamine의 함량이 정상으로 회복될 수 있으리라 기대된다. 본 연구결과를 통하여 볼 때, 분란전후의 어미쥐에게 영양부족을 시키면, 새끼쥐 뇌성장발육과 조성이 정상적으로 될 수 없음을 알 수 있다.
L-theanine Is an amino acid in green tea and has been known to decrease serotonin and increase norepinephrine in rat brains, and also reported to produce mental relaxation, lower blood pressure and improve learning ability in human beings. But, few studies on these effects for human beings have been conducted so far. This study was conducted to evaluate the effect of L-theanine on the release of brain alpha waves known to be related with mental relaxation and concentration. Twenty healthy male volunteers aged 18 to 30 years without any Physical and Psychological diseases were recruited through written advertisement. Alpha power values of EEG as a surrogate marker of mental relaxation and concentration were measured in frontal and occipital regions for 40 minutes after administration of four placebo or test tablets and 20 minute resting period. The same procedure crossed over at 7-day intervals. We analyzed average alpha power values in frontal and occipital regions at 10 minute intervals. Repeated ANOVA revealed that there were significant differences of occipital alpha power values between placebo and test groups with high anxiety (p < 0.05). The mean values at 20,30,40,50 and 60 minute intervals were 0.23, 024, 0.28, 0.25 and 0.34 in placebo, respectively and 0.23, 0.29, 0.40, 0.34, and 0.45 in test, respectively. But there were no significant differences of frontal and occipital alpha power values between placebo and test groups with low anxiety (p > 0.05) . The results of this study suggest that L-theanine containing tablets promote the release of alpha waves related to mental relaxation and concentration in young adult males.
Brain dopamine systems play a central role in the control of movement, hormone release, and many complex behavior. The action of dopamine at its synapse is terminated predominately by high affinity reuptake into presynaptic terminals by dopamine transporter (DAT). The dopamine transporter(DAT) is membrane protein localized to dopamine-containing nerve terminals and closely related with cocaine abuse, Parkinsonism, and schizophrenia. In present study, the recombinant plasmid pRc/CMV-DAT, constructed by subcloning of a cDNA encoding a bovine DAT into eukaryotic expression vector pRc/CMV, was stably transfected into CV-1 cells(monkey kidney cell line). The DAT activities in the cell lines selected by Geneticin$^{R}$ were determined by measuring the uptake of $[^3H]$-dopamine. The transfected cell lines showed 30-50 fold higher activities than untransfected CV-1 cell line, and this result implies that DAT is well expressed and localized in transfected cells. The transfected cells accumulated $[^3H]$-dopamine in a dose-dependent manner with a $K_{m}$ of 991.6nM. Even though high doses of norepinephrine, epinephrine, serotonin, and choline neurotransmitters inhibited the uptake of $[^3H]$-dopamine, DAT in transfected cell line was proven to be much more specific to dopamine. The psychotropic drugs such as GBR12909, CFT, normifensine, clomipramine, desipramine, and imipramine inhibited significantly the dopamine uptake in tissue culture cells stably transfected with DAT cDNA. Radioactive in situ hybridization was done to map the cellular localization of DAT mRNA-containing cells in the adult rat central nervous system. The strong hybridization signals were detected only in the substantia nigra pars compacta and ventral tegmental area. The restricted anatomical localization of DAT mRNA-containing cells confirms the DAT as a presynaptic marker of dopamine-containing cells in the rat brain.
포유동물에서 뇌와 부신에서 합성ㆍ분비되는 카테콜아민(Catecholamine, CA)계 신경전달물질인 dopamine(DA), norepinephrine(NE), epinephrine(E)은 체내 각종 생리현상의 조절에 필수적이며, 생식과 관련된 기능으로는 시상하부와 뇌하수체 사이의 GnRH-gonadotropin 호르몬 축의 활성을 조절함 외에도 번식과 연관된 여러 행동양식을 조절함이 잘 알려져 있다. 본 연구는 카테콜아민 생합성 효소인 tyrosine hydroxylase(TH), dopamine $\beta$ -hydroxylase(DBH), phenylethaolamine-N-methyl transferase(PNMT)의 유전자 발현에 영향을 미치는 sex steroid의 영향을 조사하였다. 성숙한 암컷 흰쥐의 난소를 제거(ovariectomy, OVX)하고 1주 경과 후 실험군과 대조군에 각각 17$\beta$-estradiol(E$_2$; 500$\mu\textrm{g}$/m1)이 들어 있는 silastic capsule과 sesame oil이 들어 있는 silastic capsule을 이식시키고 48시간 후에 희생시켰다. 채취된 조직에서 mRNA를 추출한 후 semi-quantitative reverse transcription-polymerase chain reaction(RT-PCR)을 시행하였다. 그 결과로 (i) TH의 발현 정도는 OVX+Oil군에서는 시상하부 > Substantia nigra(SNc) > 부신 순으로, OVX+E$_2$군에서는 SNc ) 시상하부 > 부신 순으로 나타났다. TH발현에 미치는 estradiol의 효과로 SNc와 부신에서는 유의한 증가를 보인데 비해 시상하부에서는 유의한 감소를 관찰하였다. (ⅱ) DBH 발현 정도는 OVX+Oil군과 OVXi+E$_2$군에서 모두 부신 > SNc > 시상하부 순으로 나타났다. DBH 발현에 미치는 estradiol의 효과로 SNc에서는 유의한 감소를, 부신에서는 유의한 증가를, 그리고 시상하부에서는 감소하였으나 통계적 유의성이 없었다. (ⅲ) PNMT의 발현의 경우 SNc와 시상하부에서는 이미 알려진 바와 같이 alternative splicing에 의해 110bp 차이의 크고 작은 두 형태의 cDNA(PNMT과 PNMTSs가 증폭되었으나 부신에서는 작은 cDNA(PNMTs)만이 관찰되었다. PNMT1의 발현은 SNc가 시상하부보다 다소 높은 경향이었으나 유의성이 없었고, PNMTs의 발현정도는 OVX+Oil군과 OVX+E$_2$군 모두에서 부신 > SNC >시상하부 순으로 나타났다. PNMTs 발현에 미치는 estradiol의 효과로 SNc에서는 유의한 감소를, 부신에서는 유의한 증가를, 그리고 시상하부에서는 통계적 유의성은 없으나 증가하는 경향을 보였다. 본 연구에서는 카테콜아민 생합성 효소들의 유전자 발현의 조절에 미치는 estrogen의 영향이 세포기원이 neural crest cell인 부신 수질은 물론 뇌의 상이한 지역간에서도 조직특이적임을 관찰하였다. 이러한 결과는 각 조직에서의 estrogen 수용체 유형의 차이, 작용 모드와 각 효소 유전자 발현 사이에 중요한 상관관계가 있음을 시사한다.
Silibinin, a natural flavonoid antioxidant isolated from extracts of the milk thistle herb, has recently been identified as having anti-hepatotoxic and anticancer properties. In this paper, we investigated the effects of silibinin on behavior and neuroplasticity in mice subjected to chronic unpredictable mild stress (CUMS). After 5 consecutive weeks of CUMS, the mice were treated with silibinin (100 mg/kg, 200 mg/kg and 400 mg/kg by oral gavage) for 3 consecutive weeks. The results showed that silibinin administration significantly alleviated the CUMS-induced depressive-like behavior, including the total number of squares crossed and the frequency of rearing in the open field test, the immobility time in the tail suspension test and the forced swimming test. Furthermore, silibinin treatment increased the levels of brain-derived neurotrophic factor (BDNF), serotonin (5-HT) and norepinephrine (NE) in the prefrontal cortex and hippocampus. Our study provides new insight into the protective effects of silibinin on the depressive status of CUMS mice, specifically by improving neuroplasticity and neurotransmission.
카테콜아민 생합성에 관여하는 마지막 효소인 phenylethanolamine Nmethyltransferase는 norepinephrine 을 epinephrine으로 전환시키는 중요한 효소이다. PNMT효소의 발현은 epinephrine 신경세표의 발현에 필수적이다.따라서 PNMT 유전자를 크로닝하여 그 구조를 결정하고,유전자 발현연구를 하는 것은 상당히 중요한 일이다.그러나 최근에 저자가 bovine 및 human cDA 를 처음으로 분리하여 그 구조를 보고한 것 외에는 아직까지 인간과 백서 전체 genomic DNA 의 분리 보고는 없다.이에 저자들은 인간과 백서 PNMT유전자의 전체구조와 여러종(species)사이의 진화적인 관계를 규명하기 위해서 human 과 Rat genomic library 를 만들고,이 library 를 이용하여 bovine cDNA 를 probe로 13.1kb와 13.2kb길이의 인간과 백서의 genomic clone 을 분리 크리닝하는데 성공하여 유전자의 구조적 규명하였다.
The word of stress was wsed in the field of physics as a external force from 17th century, but the meaning of this stress had chafed to the internal and exteral demand fort the human body in medical area. All the stumulants which make stress was called as j stressor. When animals get stress blucose excreted from liver to adapt for the emergent state ant some related hormone secrete convert protein and lipid to glucose for the purpose of energy supply to muscle. As a results heart rate, blood pressure, respiration rate are increased and musclse are strengthed. These physiolgical reactions ate controlled by autonomic nerve system under the control of hyothalamus in brain. Autonomic nerve system and endocrinary system are react harmoiously to stress reaction. According to the stress reaction, adrenomedullary system are stimulated, and epinephrine, morepinephrine are exceted. Author experimented the effect of the immobilizational stress to rat by analyzing the variaition of catecholamine secrction, the Na concentration and the effect of the antistresf effect by Panax Ginseng which is a traditional Korean herb medicine. The concentration of the norepinephrine, epinephrin, and dopamin in normal rat are 1 578 ng/ml, 0.365 ng/ml, and 0.731 ng/ml respectively, but in the immobilyzed stress groIn the concentration were increased to 1.915 ng.ml, 0.854 ng/ml, and 2,361 ng/ml which she the high show the higher concentration of catecholamine to stressor.
1) Urethane 마취가토(痲醉家兎)의 내뇌(腦內)(측뇌실(刻腦室) 또는 소뇌연수조내(小腦延髓槽內)에 norepinephrine (NE), clonidine을 주입(注入)할 때 일어나는 심박감소(心搏減少), 혈압하강(血壓下降)에 관한 이들 약물(藥物)의 작용점(作用點)을 조사(調査)할 것을 시도(試圖)하였다. 2) NE의 뇌내주입(腦內注入)은 심박감소(心搏減少)를 일으켰으나 혈압(血壓)에 미치는 영향(影響)은 뚜렷치 않았다. Clonidine은 심박감소(心搏減少), 혈압하강(血壓下降)을 일으켰다. 3) 측뇌실내주입(刻腦室內注入) 소뇌연수조내주입간(小腦延髓槽內注入間)에는 NE, clonidine, phenylephrine, isoproterenol의 심박(心搏), 혈압효과(血壓效果)에 차이(差異)가 없었다. 또 NE에 의한 심박감소효과(心搏減少效果)의 출현(出現)은 소뇌연수조내주입시(小腦延髓槽內注入時) 더 빨랐다. 4) 약(約) 2시간(時間) 간격(間隔)으로 NE를 반복(反復) 주입(注入)할 때 심박효과(心搏效果)에는 거의 변동(變動)이 없었으나 혈압효과(血壓效果)는 반복주입(反復注入)함에 따라 혈압상승효과(血壓上昇效果)가 현저(顯著)히 나타났다. Clonidine의 심박감소(心搏減少) 및 혈압하강효과(血壓下降效果)는 반복주입(反復注入)에 따라 점차 약화(弱化)되었다. 5) NE 주입후(注入後) NE 효과(效果)가 지속(持續)하고 있을 때 clonidine은 더 이상(以上)의 심박감소(心搏減少)를 일으키지 않고, 혈압하강(血壓下降)도 일으키지 않았다. Clonidine 주입후(注入後) clonidine 효과(效果)가 지속(持續)하고 있을 때 NE는 더 이상(以上)의 심박감소(心搏減少)를 일으키지 않았고 현저(顯著)한 혈압상승(血壓上昇)을 일으켰다. 6) Regitine 또는 desmethylimipramine의 뇌내주입후(腦內注入後) NE는 심박(心搏)에 거의 변동(變動)을 일으키지 않았으나 현저(顯著)한 혈압상승(血壓上昇)을 일으켰다. Clonidine은 심박(心搏), 혈압(血壓)에 거의 변동(變動)을 일으키지 않았다. 7) Reserpine 처리가토(處理家兎)에서는 NE는 심박증가(心搏增加)와 혈압상승(血壓上昇)을 일으켰으며, clonidine은 심박(心搏)에는 거의 변동(變動)을 일으키지 않았고 경미(輕微)한 혈압상승(血壓上昇)을 일으켰다. 8) NE 및 clonidine에 의한 심박감소(心搏減少), clonidine에 의한 혈압하강(血壓下降)은 주(主)로 presynaptic ${\alpha}$-adrenoceptor를 중개(仲介)하여 일어나나, NE 및 clonidine에 의한 혈압상승(血壓上昇)은 presynaptic site 이외(以外)의 부위(部位)를 중개(仲介)하여 일어나는것 같다.
최근에 개발된 생체내 미세투석법을 이용하여 정상혈압 흰쥐(WKY)와 자연발생성 고혈압 흰쥐(SHR)의 후 시상하부에서 세포외액의 모노아민과 그 대사체들을 측정하였다. 뇌정위 고정장치에 의해서 미세투석관을 후 시상하부에 위치시킨후 링거액으로 관류하였다. 모노아민과 그 대사체들은 고속액체 크로마토그라피와 전기화학 검출기를 이용하여 정량하였다. 미세투석관의 시험관내 회수율 검사 결과, 관류액의 유속과 신경화학물질의 상대적 회수율 사이에는 역비례 관계가 있음이 확인되었다. 정상 혈압 흰쥐에서 후 사상하부의 관류액으로 부터 축정한 각종 신경화학물질의 세포외액 농도는 도파민 32nM, 노르에피네프린 50nM, 에피네프린 50nM, 세로토닌 73nM, 3.4-dihydroxyphenylacetic acid(DOPAC) 281 nM, homovanillic acid(HVA) 181 nM, 5-hydroxyindoleacetic acid(5HIAA) 3767nM이었다. 후 시상하부에서 측정된 신경전달물질의 기준치는 WHY와 SHR사이에 차이가 없었으나, DOPAC, HVA, 5HIAA의 기준치는 WKY에 비해서 SHR에서 유의하게 높게 나타났다. 본 연구는 중추 신경화학물질들의 생체내 측정에 미세투석법을 이용할 수 있음을 보여주었다.
This study was undertaken to invesigate the effect of early nutritional deprivation and environment on neurotransmitter concentrations and behavior in later life. The restoring process of rats fed foods ad libitum after 50% restriction of the casein or the Korean diet during the prenatal and/or the lactating periods was observed. There were two rearing conditions, isolated and enriched, after weaning. Behavioral development was measured by the Y- shaped water maze and the open field test. The neurotransmitters were analyzed after sacrifice at the age of 21 weeks. The results are summarized as follows. 1) The body weight impairment by dietary restriction during the prenatal and lactating periods could be restored within 18 weeks after weaning in case of living in a classical cage. The effect of quantitative restriction was bigger in the Korean diet than in the casein diet. 2) The brain weight was decreased by nutritional deprivation. Environmental enrichment increased it slightly. 3) The concentration of neurotransmitters, norepinephrine, dopamine, and serotonin, were not shown any traces of the dietary restriction at the age of 21 weeks. 4) In the maze test, the deprived rats made more errors than the nourished and the rats fed the Korean diet more than those fed the cascin dict. The environmental enrichment could decrease the number of errors. 5) In the open field test, the dietary deprived groups showed less reaction time, more squares entered in the field, and less number of fecal boli than the nourished among the environmentally isolated rats. However, rats living in the enriched cage without experience of nutritional stress showed the lowest emotionality and the elevated exploratory activity.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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