This study was carried out to investigate the efficacy of antifungal and antibacterial activity of Veratri Herba, which was used as insecticide in the clinical part of oriental dermatology for a long time. Sample herb was selected with Veratrum maackii in the middle of 5 veratrum species. The experimental results of this herb were as follows. Crude extract showed various relative inhibitory rates from 68.9% to 95.6% in 2mg/disc against Fusarium oxysporum, Botrytis cineria, Saccharomyces cerevisiae, Escherichiae coli, and Bacillus subtilis on the basis of inhibitory range against B. cineria, and the inhibitory effect was decreased depending on density. In the extract of various organic solvent, chloroform and ethyl acetate fraction show the various size of dear zone against all microbes. And in the subfraction assay from ethyl acetate fraction, crude alkaloids show the antibacterial and antifungal effect significantly.
A bactirium prohibiting the growth of fungus Botrytis cineria KT 433 was isolate and identified from soil. The isolated strain was gram positive, aerobic bacteria with cream color, round and mucoid. It showed ord form of 0.45$\times$1.1 ${\mu}{\textrm}{m}$ at the cultivated for 24 hrs and the ellipsoided endospore wer observed after culting for 72 hrs. The optimum growth temperature and pH wer 35$^{\circ}C$ and pH 5.0~8.0, respectively. It could assimilate daxtrin, maltose, glucose, mannose, ribose and collobiose as a sole carbon source. The isolated was confirmed to be a Bacillus sp. strain from the findings. The antibiotic from the isolated strain was stable up to 121$^{\circ}C$. The strain, especially, showed specific activity for mold and yeast. However, there was not significant antibacterial activity.
새로운 3-(4-치환-phenyl)-1-(2-furyl)propenone, 1과 3-(4-치환-phenyl)-1-(2-furyl)-3-thiophenylpropanones, 2 유도체를 합성하여 in vitro에서 잿빛 곰팡이균(Botrytis cineria, BC), 사과 부란병균(Valsa ceratosperma, VC), 마늘 균핵병균(Sclerotium cepivorum, SC) 및 고추 역병균(Phytophthora capsici, PC) 등의 곰팡이 균류에 대한 구조-항균활성 관계(SAR)를 알아보았다. 그 결과, 2보다 1이 비교적 큰 항균활성을 나타내었으며 특히, E(Syn)형의 4-chloro group 치환체, 1d나 비 치환체, 1a가 4가지 균중의 BC균에 대하여 가장 강력한 항균활성$(EC_{50}=10{\sim}11\;ppm)$을 보였다. 1의 가수분해 반응속도상수(logk)와 ${\sigma}$상수사이에 좋은 상관성 $(r^2=0.90)$으로부터 치환기 (X)의 음하전과 ${\beta}$탄소원자의 양하전에 의존적인 항균활성을 나타낼 것으로 예상되었다.
본 연구에서는 천연 항균물질의 개발 이용을 위해 황기 종자로부터 인체에 무해한 천연 항균 단백질을 ion exchange chromatography 및 gel filteration을 이용하여, 순수 분리하고 특성을 조사하였다. 황기종자로부터 추출한 천연 항균 단백질은 Aspergillus ocraceus, Penicillium expensum, P. digitatum, Botrytis cineria의 포자 발아 및 효모인 Candida albicans의 생육을 현저하게 저해하였으며 ammonium sulfate 포화도가 0.4일 때 단백질의 침전량이 122.6 $\mu\textrm{g}$/$m\ell$로 가장 많았고 항균력도 15.2 mm로 가장 높게 나타났다. 강력한 cation exchange chromatography인 Mono-S를 이용하여 FPLC에서 단백질을 분획하였을때 첫번째 peak에서 분획된 단백질군이 항균력을 보였으며 Superose 12HR gel filteration column을 이용하여 2차 분획 하였을 때 분자량이 19 kDa되는 단일 단백질만을 순수분리 할 수 있었다. 전기 영동한 polyacrylamide gel위에 곰팡이 포자를 중층하는 bio autography로 19 kDa 단백질 band의 항균력을 직접 확인하였으며 분리된 항균 단백질의 아미노 말단의 아미 노산 22잔기를 sequencing하고 thaumatin 및 zeamatin 유사 단백질들과 상동성을 측정한 결과 50%내외의 homology를 나타내었다. 분리된 항균 단백질은 곰팡이 균사가 성장하는 선단부위에 가장 먼저 침투하여 channel을 형성함으로 osmolysis를 일으켜 곰팡이의 생육을 억제하는 것으로 추측할 수 있었다.
병원성 미생물을 방제하기 위하여 국내의 고추 재배지에서 탄저병균에 감염된 고추로부터 Bacillus속 균주를 분리하였다. 이들 중 고추탄저병균인 C. gloeosporioides 균주와 식물에 회색곰팡이병을 일으키는 Botrytis cinerea 균주에 대한 길항작용이 가장 우수한 Bacillus sp. IUB158-03을 선발하였다. 선발된 균주의 형태적, 생리 생화학적 특성과 MicroLog 방법을 이용하여 동정된된 균주는 B. amyloliquefaciens IUB158-03로 명명하였다. 항진균물질 생산을 위한 최적배지 조건은 2% soluble starch, 3% yeast extract, 0.5% tryptone, 0.5% $NH_4H_2PO_4$, 1% NaCl의 pH 6.0에서 $25^{\circ}C$, 72시간 배양한 추출물에서 가장 높은 항진균활성을 나타내었다. B. amyloliquefaciens IUB158-03이 생산한 항진균물질을 butanol로 추출한 후 silica gel column chromatography, preparative thin layer chromatography, and HPLC을 이용하여 항진균물질을 정제하였다. 정제된 항진균물질은 TLC plate 상에서 $R_f$값이 0.27인 것이 확인되었으며, 이 물질은 식물병원균인 Fusarium solani, Rhizoctonia solani, Botrytis cineria, Alternata alternaria와 인체병원성 진균인 Trichophyton mentagrophytes, Epidermophyton floccosum, Cryptococcus neoformans 등에만 선택적으로 높은 항진균 활성을 보였다.
Park, Young-Goo;Choi, Myung-Suk;Yang, Jae-Kyung;Paik, Ki-Hyon
Journal of the Korean Wood Science and Technology
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제29권3호
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pp.92-98
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2001
Allelopathic effects of the cork tree (Phellodendron amurense Rupr.) on several crops and soil miro-organisms were assessed using germination bioassay and antimicrobial assay, and allelochemicals were identified. In a germination bioassay, extract of cork tree inhibited at high concentration on germination of several crop seeds such as cabbage, lettuce, and cucumber. However, aqueous extracts inhibited powerfully growth of test organisms such as Streptococus aureus, S. aureus, S. typhimurium, and E. coli as bacteria, and Candida albicans as yeast, and Botrytis cineria and Alternata alternaria as fungi.. The cork tree extract showed strong antimicrobial activities against isolated soil fungi. The allelochemicals were separated using Silica gel, Sephadex LH-20 gel column chromatography and HPLC. The substances were analyzed by UV spectrometry and EI-mass spectrometry. The active allelochemicals were identified as isoquinoline alkaloids, berberine and palmatine.
1999년 5월 경남 남해군 비닐하우스 내에 재배중인 네트멜론(품종: VIP)의 성숙기 과일에서 잿빛곰팡이병이 발견되었다. 병정은 멜론 과일의 꽃자리 부분 또는 옆면이 부패되고 그 위에 잿빛곰팡이가 아주 많이 형성되고 과육이 부패되었다. 병원균의 분생포자의 크기는 $8.8{\sim}21.2{\times}6.5{\sim}13.1\;{\mu}m$이고 타원형 또는 도란형이고 무색내지 담황색이다. 분생자병의 폭은 $4.3{\sim}11.4\;{\mu}m$이고 무색이고 윗부분에 분생포자가 아주 많이 형성되었다. 병반에서 분리한 병원균은 Botrytis cenerea로 동정되었고, 분생포자 현탁액을 과일에 인공접종한 결과 포장에서 발병한 과일에서의 병징과 동일한 병징이 형성되었다. 균사생육적온은 $15^{\circ}C$에서 $25^{\circ}C$였다. 조사한 포장에서 발병과율은 2.2%정도였다. 재배기간 중 시설내의 비교적 낮은 온도와 높은 습도는 잿빛곰팡이병의 발생을 야기시킨 중요한 요인이 된 것으로 추정되며 이 병을 국내에서 처음 보고한다.
다양한 세균 종이 갯벌이나 젓갈 등 염분이 많은 환경에서 서식하고 있으며, 이들에 대한 단백질 분해능과 염분내성에 관한 많은 보고가 있지만 상대적으로 이들 세균의 식물에 대한 항진균 활성에 대한 연구는 부족한 실정이다. 본 연구에서는 고염분의 환경에서 서식하는 세균의 식물 병원균에 대한 항균활성을 검정하고자 수행되었으며, Sclerotinia sclerotiornm, Fusarium oxysporum, Phytophthora capsici, Botrytis cineria, Collectotrichum acutatum, Pythium ultimum의 6종에 대한 항균활성 세균을 1차적으로 선발하였다. 갯벌토양과 젓갈에서 형태적인 특성에 따라 분리된 총 423 점의 세균균주 중 40균주가 항균활성 균주로 선발되었으며, MIDI shorlock gas chromatography system 균체 지방산분석에 의해 이들의 종을 동정하였다. 갯벌토양에서 분리된 세균은 6속 10종에 속하는 것으로 확인되었으며 이들 17점의 세균 중 Paenibacillus macerans가 5점으로 가장 많았다. 젓갈에서 분리된 세균은 3속 7종에 속하는 것으로 확인되었으며, 이들 23점의 세균 중 Bacillus atrophaeus가 12점으로 가장 많았다.
해양 원유 오염원의 제거 및 항진균 활성을 가진 균주를 분리하기 위해 1% crude oil을 탄소원으로 이용하여 생육하는 수십 종의 균주를 분리하였다. 분리된 균주 중 biosurfactant를 생성하는 균주를 1% tributyrin에서 투명환 생성 유무를 통해 선별되었으며, 이를 Bacillus sp. DYL130으로 명명하였다. Bacillus sp. DYL130의 표면장력은 최저 28 mN/m까지 감소되었다. 이 균주로부터 biosurfactant를 정제하기 위해 배양 상등액을 친화성 크로마토그래피와 TLC를 이용하여 정제된 biosurfactant를 얻었다. TLC 결과 0.78정도의 Rf값을 확인하였다. 정제된 biosurfactant의 CMC 값은 35 mg/l인 것으로 나타났으며, 유화활성과 안정성은 soybean oil을 기질로 사용하였을 경우 최대인 것으로 나타났다. Botrytis cineria에 대한 길항작용도 우수한 것으로 보인다.
새로운 10종의 N-[1-(benzotriazol-1-yl)alkyl]aniline유도체(4)를 합성하여 그중 4h의 결정을 확인한 바, 단사정계이고 S형의 절대배열을 나타내었으며 분자간에는 1개의 수소결합($N_{11}-H_{11}{\cdots}N3$)이 $2.300(11){\AA}$길이로 존재함을 알았다. 또한, 4 유도체들의 구조와 잿빛 곰팡이균(Botriyis cineria, BC), 고추 역병균(Phytophthora casici, PC), 및 마늘 흑색썩음균핵병(Sclerotium cepinorum, SC)등 곰팡이균에 대한 항균 활성값($pI_{50}$)과의 관계(SAR)를 검토한 바, SC>BC>PC의 순서로 SC에 대하여 가장 큰 항균활성을 보였다. X-치환체보다는 주로 Z의 소수성(${\pi}$)이 클수록 큰 항균활성을 나타내는 경향이었으며 bromo 치환체인 4f가 3종의 균에 대하여 가장 큰 항균활성을 나타내었다. 그리고 항균활성에 미치는 치환기들의 자유에너지 관계(LFER)를 검토하였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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