In order to evaluate the antifungal activity of bacteria against plant pathogenic fungi, 8 bacteria were isolated from mushroom compost hot spring, seaweed, and forest soil and mutants from them were induced by $LD_{95}$ gamma radiation($^{60}Co$). Bacillus circulans K1, Burkholderia gladioli K4 and Bacillus subtilis YS1 showed wide antifungal spectrum against 12 kinds of plant pathogenic fungi. From the radiation sensitivity test, B. gladioli K4 was very sensitive to gamma radiation and its $D_{10}$ value was 0.11 kGy. Antifungal activities of B. circulans Kl-1004 and B. subtilis YS1-1009, which were induced by the radiation of $^{60}Co$ increased against Botryosphaeria dothidea. The mutant strains, B. subtilis YS1-1006 and B. subtilis YS1-1009 were resistant to tebuconazole and copper hydroxide. SAR535, SAR5108, and SAR5118 mutated from Streptomyces sp. SAR01 were antifungal activity deficient mutants against 5 kinds of plant pathogenic fungi compared to wild strain, so that they could be supposed to be model strains far studying antifungal mechanism. It is suggested that various functional types of mutants could be induced by gamma radiation and applied usefully.
Incidence rates of bacterial canker, bacterial leaf spot and postharvest fruit rot on the Korean yellow-fleshed kiwifruit cv. Haegeum were compared with those on the most popular green-fleshed kiwifruit cv. Hayward grown in several naturally infected kiwifruit orchards in 2013 and 2014. The percentages of diseased leaves caused by bacterial canker were 18.5% and 17.3% on Hayward in 2013 and 2014, but those on Haegeum were 1.2% and 0%, respectively. The percentages of diseased leaves caused by bacterial leaf spot on Hayward were 63.5% and 16.2% in 2013 and 2014, respectively, but no bacterial leaf spots were observed on Haegeum in both years. The average percentages of diseased fruits caused by postharvest fruit rot were 24.2% and 20.5% on Hayward in 2013 and 2014, while 6.3% and 4.4% and Haegeum, respectively. Botryosphaeria dothidea was turned out to be the major pathogen of postharvest fruit rot on both cultivars.
An imperfect fungus Fusiococcum species was isolated from Quercus dentata. A naturally infected Daimyo oak tree was collected and showed elongate wounds on the stem. The fungal cultures were initially white and cottony, and later turned dark gray. Numerous solitary pycnidia were developed on the medium surface, and typically spherical. Yellowish conidial masses were exuded from pycnidia on the culture plates. Conidial masses were swollen and measured as approximately 100 to $300{\mu}m$ in length. It appeared that conidia were usually held together in globose to oval drops. Conidia were hyaline, single-celled (nonseptate), ellipsoid to fusoid, and measured as approximately $8.0{\times}2.7{\mu}m$. Based on these cultural and morphological characteristics, the fungal isolate was identified as a species of Fusicoccum Corda. To preserve and examine fungal spores exuded from pycnidia on the medium surface, a vapor fixation procedure for scanning electron microscopy was employed in this study. The specimens were exposed to the vapor of 2% (v/v) glutaraldehyde and 2% (w/v) osmium tetroxide each for 2 h. With the vapor fixation we obtained excellent retention of conidial masses in this study. The simple and versatile procedure for demonstrating fungal spores and their exudation from fruiting bodies would facilitate characterization of diverse pathological and environmental isolates as they are in native environments.
Antifungal activity of Korean and Chinese lichen-forming fungi(LFF) was evaluated against plant pathogenic fungi of Botryosphaeria dothidea, Botrytis cinerea, Diaporthe actinidiae, Pestalotiopsis longiseta, Pythium sp., Rhizoctonia solani, and Sclerotium cepivorum. The LFF were isolated from Cladonia scabriuscula, Melanelia sp., Nephromopsis asahinae, Nephromopsis pallescens, Parmelia laevior, Pertusaria sp., Ramalina conduplicans, Ramalina sinensis, Ramalina sp., Umbilicaria proboscidea and Vulpicida sp. with discharged spore method. The isolates were deposited in the herbarium of Korean Lichen Research Institute(KoLRI) in Sunchon National University. The LFF of Melanelia sp., P. laevior, Pertusaria sp., R. conduplican and Ramalina sp. exhibited strong antifungal activity against all of the pathogenic fungi examined. Among them, LFF of P. laevior showed more than 90% of inhibition in fungal hyphae growth, compared with control. The results imply that LFF can be served as a promising bioresource to develop novel biofungicides. Mass cultivation of the LFF is now under progress in laboratory conditions for chemical identification of antifungal substances.
Kim, Min-Jung;Kwon, Youngho;Shin, Mi Hee;Kim, Jin Gook;Kwak, Youn-Sig;Kwack, Yong-Bum
Korean Journal of Soil Science and Fertilizer
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v.50
no.4
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pp.215-225
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2017
Kiwifruit is prone to damage by frost in the harvest season and the occurrence of postharvest diseases. Accordingly, new cultivars overcoming these disadvantages have been developed. Compared to existing cultivars, studies on diseases in new cultivars are very limited. Thus, goal of this study was investigation of fungal infection occurrences in new cultivars. Kiwifruit was harvested in 2014 and 2015 year, respectively. In both years, cvs. Goldone and Redvita showed more resistance against fungal infection but cv. Gamrok was more sensitive compared with cv. Hayward. Major fungi were identified as Botryosphaeria dothidea, Phomopsis sp., Alternaria alternata and Nigrospora sp. Firmness and soluble solids content were also influenced by the occurrences. This study's findings are important for providing practical information on new cultivars in the kiwifruit industry.
During the period from 2013 to 2014, disease occurrences by various pathogens in apple cultivars have been investigated in northern Gyeongbuk province of Korea. Anthracnose, white rot, Alternaria leaf spot, Marssonina blotch, and bacterial shoot blight as major diseases have been observed. Pathogens isolated from the symptomatic plants were identified as Colletotrichum gloeosporioides for anthracnose, Botryosphaeria dothidea for white rot, Alternaria alternata for Alternaria leaf spot, Marssonina mali for Marssonina blotch, and Pseudomonas syringae pv. syringae for bacterial shoot blight. Of all diseases, the bacterial shoot blight has been severely increased in chronically infested fields in Gyeongbuk province.
Pseudomonas aeruginosa strain B5 with antagonistic activity against Phytophthora capsici and Magnaporthe grisea, was isolated from pepper-growing soil. From the culture of P. aeruginosa strain B5 grown on King's medium B, antibiotic substances were purified using XAD-2 column chromatography. XAD-2 eluates inhibited not only the mycelial growth of P. capsid and M. grisea, but also the development of Phytophthora blight on pepper plants. The crude antibiotic substances were further purified by using silica gel column chromatography, Sephadex LH-20 column chromatography, thin layer chromatography on silica gel plates, and high performance liquid chromatography. Silica gel column chromatogrphy gave good separation of the four antibiotic substances. The pure antibiotics P1, P2, and P3 finally purified by preparative HPLC inhibited the mycelial growth of P. capsici, at concentrations from 7 to 10 $\mu g/ml$. Only P1 and P2 had antifungal activity against M. grisea at 8 $\mu g/ml$. P1 and P3 were highly inhibitory to the mycelial growth of Botryosphaeria dothidea and Botrytis cinerea at relatively low concentrations. However, the three antibiotics had no antifungal activity against Rhizoctonia solani. The chemical structures of these antibiotics are being identified.
Control of white rot which is one of the most serious apple diseases in Korea has mainly relied on periodical spray of protective fungicides. As the main inoculum source of the disease is pycnidiospores produced in the warts formed on affected stems of apple tree, it can be conceivable that inhibition of spore production might be an effective means for controlling the disease. Inhibitory efficacy of eight selected fungicides against sporulation of the fungus was assessed by counting the number of spores produced at detached warts treated with the fungicides of recommended dilution. They showed diverse effect on sporulation. Carbendazim and azoxystrobin suppressed sporulation almost completely, the former irreversively. Thiram and folpet promoted sporulation as producing much more number of spores than untreated control. Others showed almost no effect on sporulation. Effects of suppression and promotion in the sporulation shown by the fungicides on the control of white rot were examined by incidences of disease and infection at the plots adopted the spray programs of which the fungicide at late May was substituted by carbendazim, azoxystrobin, folpet and thiram, respectively. Disease incidence and infection frequency at the plots sprayed former two chemicals which suppressed sporulation were much lower than those of the plots adopted latter two chemicals and untreated plot at which the fungicide spray was skipped at that time. These facts were reconfirmed in the experiments conducted with carbendazim and thiram, in which 100 fruits were bagged just prior to each spray from late May to late July for elucidating the effect of the two fungicides on the action of subsequent ones. Disease incidence and infection frequency on the fruit bagged just prior to each spray were gradually increased as the seasons going on. The increase rate at the carbendazim plot was much lower than that of thiram. Especially, the fruit infected till late July at the carbendazim plot were almost completely cured by the three fungicides, iminoctadine-triacetate, tebuconazole and samzinwang, a combined formular of iminoctadine-triacetate and difenoconazole, sprayed at late July and hence. In thiram plot, infected fruit were also cured by the 3 fungicides but not remarkable. From these results, it can be concluded that control efficiency of white rot can be greatly enhanced by selecting the fungicide capable of suppress the sporulation of white rot fungus at the season when the mass dispersal of spores is not initiated.
On the basis of the fact that the pycnidiospore of Botryosphaeria dothidea, the causal fungus of apple white rot is a typical water borne spore, a method for quantitative analysis of pycnidiospore dispersal from the warts produced on the diseased apple tree stem was developed. The warts on which cracks developed either on or around them were cut off at the base, and shaked in the water for 4hours at 2$0^{\circ}C$, in which condition the maximum number of spores were released. The volume of shaking solution was calculated as 1 ml per one wart. At the end of shaking, Trio, a household detergent was added to the shaking solution to the concentration of 0.1%, and shaked for additional 10 minutes at 35$^{\circ}C$ to take off the spores attached on the glass ware. One milliliter of the spore suspension thus prepared were passed through transparent membrane filter (pore size : 3.0 ${\mu}{\textrm}{m}$), and the spores attached on the filter were counted under a microscope ($\times$200) after staining them with lactophenol supplemented with aniline blue. The results thus obtained were statistically consistent when at least 30 warts were used simultaneously in single shaking. This method can be applicable in the elucidation of ecology of sporulation and spore dispersal, and also in the screening of the sporulation inhibitor which can be used in the control of the disease by reducing the inoculum density.
This survey was carried out to investigate the effect of flooding by heavy rain on growth characteristics and disease incidence of 'Fuji'/M.26 mature apple tree in 1998 at Kyongbuk province. The surveyed regions were Andong, Uisung, and Gunwi area. The six orchards were selected from one area, totally 18 orchards were surveyed. The flooded depth of surveyed orchards was from 70 to 350 cm, and the flooded duration was from 6 to 72 h. Defoliation ratio, number of abnormal budding, and flowering per tree were increased along with the increment of flooded depth and duration. Rooting ratio was decreased rapidly with the increment of flooded duration, and dead root ratio was 16.2% in flooded orchards. Marssonia blotch (Diplocarpon mali), white rot (Botryosphaeria dothidea) of fruit, and phytophthora fruit rot (Phytophthora cactorum) incidence were increased in flooded orchards. The analysis results of pearson correlation coefficient among surveyed items showed that higher relationship of abnormal growth characteristics and increment of disease incidence of 'Fuji'/M.26 apple trees with flooded duration than with flooded depth. With these results, the flooded depth was found to be the main factor for the abnormal growth characteristics and disease incidences of 'Fuji'/M.26 apple trees.
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