This study was designed to examine the effect of tetracycline application to the planed periodontal surgery of the experimentally induced periodontal disease in dogs. Modified Widman flap surgery was done and aqueous tetracycline (1%) was applied to the root surface for 5min, after which the wound was rinsed with saline, and flaps were coronally repositioned. Root surface ntoches were used as reference points. The animals were sacrificed 1 week, 2 weeks, 4 weeks, and 8 weeks after surgery, and block sections of tooth and surround tissue were processed for conventional light and electron microscopy. The results were as follows : 1. A more coronal position of junctional epithelium was observed in the area treated with tetracycline. 2. In the most of the tetracycline - treated teeth, the new collagen fibrils of connective tissue were oriented vertical/or oblique and parallel to the root surface. The vertical or oblique fibers were inserted into the denuded dentin matrix and contacted with exposed dentin collagen fibrils. 3. In the tetracycline - treated root, new cementum apposition, most of acellular extrinsic fiber cementum, was seen with bundles of oriented collagen fibrils incoporating into the cementum. 4. In the control and tetracyclin - treated teeth, bone resorption was observed at the alveolar crest in the 1 week groups.
Peripheral ameloblastic odontoma is a rare variant of odontogenic tumor occurring in the extraosseous region. The present report describes a spontaneous tumor in male Sprague-Dawley (SD) rats. The clinically confirmed nodule in the right mandibular region was first observed when the rat was 42 weeks and remained until the terminal sacrifice date when the animal was 48 weeks of age. At necropsy, a well demarcated nodule, approximately $2.5{\times}2.0{\times}2.0cm$, protruded from the ventral area of the right mandible. The nodule was not attached to mandibular bone and was not continuous with the normal teeth. Histopathologically, the tumor was characterized by the simultaneous occurrence of an ameloblastomatous component and composite odontoma-like elements within the same tumor. The epithelial portion formed islands or cords resembling the follicle or plexiform pattern typical of ameloblastoma and was surrounded by mesenchymal tissue. Formation of eosinophilic and basophilic hard tissue matrix (dentin and enamel) resembling odontoma was observed in the center of the tumor. Mitotic figures were rare, and areas of cystic degeneration were present. Immunohistochemically, the epithelial component was positive for cytokeratin AE1/AE3 (CK AE1/AE3), and the mesenchymal component and odontoblast-like cells were positive for vimentin, in the same manner as in normal teeth. On the basis of these findings, the tumor was diagnosed as a peripheral ameloblastic odontoma in an extraosseous mandibular region in a SD rat. In the present study, we report the uncommon spontaneous peripheral ameloblastic odontoma in the SD rat. We also discuss here the morphological characteristics, origin, histochemical, and immunohistochemical features for the diagnosis of this tumor.
De, Umasankar;Kundu, Soma;Patra, Nabanita;Ahn, Mee Young;Ahn, Ji Hae;Son, Ji Yeon;Yoon, Jung Hyun;Moon, Hyung Ryoung;Lee, Byung Mu;Kim, Hyung Sik
Biomolecules & Therapeutics
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v.23
no.5
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pp.434-441
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2015
Histone deacetylase (HDAC) inhibitors are considered novel agents for cancer chemotherapy. We previously investigated MHY219, a new HDAC inhibitor, and its potent anticancer activity in human prostate cancer cells. In the present study, we evaluated MHY219 molecular mechanisms involved in the regulation of prostate cancer cell migration. Similar to suberanilohydroxamic acid (SAHA), MHY219 inhibited HDAC1 enzyme activity in a dose-dependent manner. MHY219 cytotoxicity was higher in LNCaP ($IC_{50}=0.67{\mu}M$) than in DU145 cells ($IC_{50}=1.10{\mu}M$) and PC3 cells ($IC_{50}=5.60{\mu}M$) after 48 h of treatment. MHY219 significantly inhibited the HDAC1 protein levels in LNCaP and DU145 cells at high concentrations. However, inhibitory effects of MHY219 on HDAC proteins levels varied based on the cell type. MHY219 significantly inhibited LNCaP and DU145 cells migration by down-regulation of matrix metalloprotease-1 (MMP-1) and MMP-2 and induction of tissue inhibitor of metalloproteinases-1 (TIMP-1). These results suggest that MHY219 may potentially be used as an anticancer agent to block cancer cell migration through the repression of MMP-1 and MMP-2, which is related to the reduction of HDAC1.
Several features of the implant surface, such as roughness, topography, and composition play a relevant role in implant integration with bone. This study was conducted in order to determine the effects of various thin layer hydroxyapatite (HA) coatings on anodized Ti surfaces on the biological responses of a human osteoblast-like cell line (MG63). MG63 cells were cultured on A (100 nm HA coating on anodized surface), B (500-700 nm HA coating on anodized surface), C ($1{\mu}m$ HA coating on anodized surface), and control (non HA coating on anodized surface) Ti. The morphology of these cells was assessed by SEM. The cDNAs prepared from the total RNAs of the MG63 were hybridized into a human cDNA microarray (1,152 elements). The appearances of the surfaces observed by SEM were different on each of the four dental substrate types. MG63 cells cultured on A, C and control exhibited cell-matrix interactions. It was B surface showing cell-cell interaction. In the expression of several genes were up-, and down-regulated on the different surfaces. The attachment and expression of key osteogenic regulatory genes were enhanced by the surface morphology of the dental materials used.
Jo, Seon-Ae;Gang, Seong-Min;Park, Su-A;Lee, Hae-Shin
Proceedings of the Korean Vacuum Society Conference
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2011.08a
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pp.202-202
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2011
The research of 3-dimensional (3-D) scaffold for tissue engineering has been widely investigated as the importance of the 3-D scaffold increased. 3-D scaffold is needed to support for cells to proliferate and maintain their biological functions. Furthermore, its architecture defines the shape of the new bone and cartilage growth. Polycaprolactone (PCL) has been one of the most promising materials for fabricating 3-D scaffold owing to its excellent mechanical property and biocompatibility. However, there are practical problems for using it, in vitro and in vivo; extracellular matrix components and nutrients cannot penetrate into the inner space of scaffold, due to its hydrophobic property, and thus cell seeding and attachment onto the inner surface remain as a challenge. Thus, the surface modification strategy of 3-D PCL scaffold is prerequisite for successful tissue engineering. Herein, we utilized a mussel-inspired approach for surface modification of 3-D PCL scaffold. Modification of 3-D PCL scaffolds was carried out by simple immersion of scaffolds into the dopamine solution and stimulated body fluid, and as a result, hydroxyapatite-immobilized 3-D PCL scaffolds were obtained. After surface modification, the wettability of 3-D PCL scaffold was considerably changed, and infiltration of the pre-osteoblastic cells into the 3-D scaffold followed by the attachment onto the surface was successfully achieved.
Kim, Min-Su;Hong, Ju-Young;Hong, Su;Lee, Byung-Cheon;Nam, Chang-Hoon;Woo, Hee-Jong;Kang, Dae-In;Soh, Kwang-Sup
Journal of Pharmacopuncture
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v.11
no.1
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pp.5-12
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2008
Objectives : Showing that Bong-Han corpuscles(BHC) are suppliers of the stem cells in adulthood, and the Bong-Han ducts(BHD) are transportation routes of stem cells. Methods : BHC and BHD were obtained from the internal organ-surfaces of rats. The sliced BHC and BHD were immunostained with various stem cell markers. Extracellular matrices were also analyzed by immunohistochemistry. Result : The presence of mesenchymal stem cells was confirmed by the expression of Integrin beta 1, Collagen type 1 and Fibronectin. But CD54 was not expressed. The hematopoietic stem cell marker, Thy 1 was strongly expressed. BHDs showed Collagen type 1, Fibronectin, and vWF expression. Conclusion : Both hematopoietic and mesenchymal stem cell markers were expressed strongly in BHC similarly as in bone marrow. An endothelial cell marker(vWF) demonstrated the possibility of the stem cell transportation routes of BHD.
PURPOSE. The purpose of this study was to assess the surface characteristics and the biocompatibility of zirconium (Zr) coating on Ti-6Al-4V alloy surface by radio frequency (RF) magnetron sputtering method. MATERIALS AND METHODS. The zirconium films were developed on Ti-6Al-4V discs using RF magnetron sputtering method. Surface profile, surface composition, surface roughness and surface energy were evaluated. Electrochemical test was performed to evaluate the corrosion behavior. Cell proliferation, alkaline phosphatase (ALP) activity and gene expression of mineralized matrix markers were measured. RESULTS. SEM and EDS analysis showed that zirconium deposition was performed successfully on Ti-6Al-4V alloy substrate. Ti-6Al-4V group and Zr-coating group showed no significant difference in surface roughness (P>.05). Surface energy was significantly higher in Zr-coating group than in Ti-6Al-4V group (P<.05). No difference in cell morphology was observed between Ti-6Al-4V group and Zr-coating group. Cell proliferation was higher in Zr-coating group than Ti-6Al-4V group at 1, 3 and 5 days (P<.05). Zr-coating group showed higher ALP activity level than Ti-6Al-4V group (P<.05). The mRNA expressions of bone sialoprotein (BSP) and osteocalcin (OCN) on Zr-coating group increased approximately 1.2-fold and 2.1-fold respectively, compared to that of Ti-6Al-4V group. CONCLUSION. These results suggest that zirconium coating on Ti-6Al-4V alloy could enhance the early osteoblast responses. This property could make non-toxic metal coatings on Ti-6Al-4V alloy suitable for orthopedic and dental implants.
Purpose : The purpose of this study is to identify the effect of zoledronate(Zometa(R)), which is most common nitrogen containing bisphosphonate, on survival, proliferation, and differentiation of osteoblast. Material & Methods: Twenty four cell culture plates containing essential medium were seeded with UMR-106 cell lines, at density of 5 x $10^4 cells per plates. Each plates were incubated with 5% $CO^2 incubator at $37^{\circ}C$. Starting from 2 days after incubation, cell culture medias were replaced, and added with osteogenesis induction media and 0, 0.01, 0.1, 0.5, 1, $3\muM$ of zoledronate(Zometa(R)), every 2 days, for 12 days. Control group was plates not added with zoledronate($0\muM$), and experiment group were plates added with different concentration of zoledronates(0, 0.01, 0.1, 0.5, 1, $3\muM$). Mature osteoblasts were identified with Alizarine Red staining, and protein samples were collected. Optical density was determined at wavelength of 405nm with ELISA reader. For viability analysis, cells were harvested and incubated with propidium iodide, and analysed with flow cytometry. Western blot technique was used to analyse Runx2 protein of osteoblast. Results : Secretion of bone matrix decreased as zoledronate concentration increased, and zoledronate did not effect survival rate of UMR-106 cells when measured with flow cytometer. Expression of Runx2 protein was inhibited as zoledronate concentration increased. Conclusion : From the results, we were able to identify that increase of zoledronate concentration inhibited differentiation of UMR-106 cell to osteoblast, without effecting quantity or survival rate.
Kim, Moo-Jin;Lee, Seung-Deok;Kim, Kyung-Ho;Byun, Hyuk;Kim, Kap-Sung
Journal of Acupuncture Research
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v.23
no.2
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pp.103-111
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2006
Objectives : Deer antler Water Extract(DAE), prepared from the pilose antler of Cervus korean TEMMINCK var. mantchuricus Swinhoe (Nokyong), a traditional immuno-suppressive and immuno-activating Korean herbal-acupuncture, is thought to play an important role in human bone remodeling. Methods : To determine whether DAE can induce the differentiation of resting zone chondrocytes(RC) or not, confluent cell cultures were pretreated for 24, 36, 48, 72, and 120hrs with DAE. At the end of pretreatment, the media were replaced with new media containing $10^{-10}{\sim}10^{-8}M\;1,25-(OH)_2D_3$ and the cells incubated for an additional 24hrs. Results : This second treatment was chosen because prior studies had shown that only the more mature growth zone chondrocytes(GC) respond to this vitamin $D_3$ metabolite. The effect of DAE pretreatment on cell maturation was confirmed by measuring alkaline phosphatase (ALPase)-specific activity. Changes in matrix protein synthesis were examined by measuring collagen synthesis, as well as $^{35}SO_4$ incorporation into proteoglycans. When RC cells were pretreated for 120h with DAE, treatment with $1,25-(OH)_2D_3$ caused a dose-dependent increase in ALPase-specific activity and collagen synthesis, however, the proteoglycan production was not affected. RC cells pretreated with $1,25-(OH)_2D_3$ responded like RC cells that had not received any pretreatment. Conclusion : These results indicate that DAE directly regulates the maturation of RC chondrocytes into GC chondrocytes. Therefore it was indicated that DAE may play a significant role in regulating chondrocyte maturation during endochondral ossification.
Matrix metalloproteinases (MMPs)는 치주조직내에 존재하는 세포외기질의 유지와 분해에 중요한 역할을 담당하고 있으며 이중 MMP-13은 치주질환의 진행과 깊은 관계가 있다고 알려져 있다. 이번 연구는 치주질환의 진행에 있어서 MMP-13의 활성에 대한 mitogen activated protein(MAP) Kinase의 역할을 구명하기 위해 시행되었다. 백서 치주인대세포에서의 MMP-13 mRNA의 발현은 RT-PCR에 의하여, 그리고 MAP Kinase의 발현은 Western blot에 의하여 측정하였다. $Interleukin-1{\beta}$(IL $-1{\beta}$), Tumor necrosis $factora(TNF-{\alpha})$와 parathyroid hormon(PTH)는 MMP- 13 mRNA 발현을 각각 320%, 180%, 380% 증가시켰으나 bone morphogenetic protein-7(BMP-7)은 MMP-13 mRNA의 발현을 증가시키지 않았다. p38 MAP Kinase 억제제인 SB203580은 IL $-1{\beta}$ 유도 MMP-13의 발현을 약 40% 정도 억제시켰으나, PTH-유도 MMP-13 mRNA의 발현은 억제하지 못했다. IL $-1{\beta}$는 MMP- 13 mRNA의 반감기를 약 2시간 정도로 증가시켰으나, p38 MAP Kinase 억제제로 전처치한 경우에는 반감기가 60분으로 줄어들었다. $IL-1{\beta}$는 p38 MAP kinase와 JNK의 인산화 활성을 증가시켰으나 PTH, $TNF-{\alpha}$와 BMP-7은 p38, JNK, ERK의 활성을 증가시키지 못했다. 이상의 연구결과는 p38 MAP Kinase가 백서 치주인대세포에서의 MMP-13 mRNA 발현을 조절하는데 중요한 역할을 담당함을 시사하였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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