Nacre seashell is a natural osteoinductive biomaterial with strong effects on osteoprogenitors, osteoblasts, and osteoclasts during bone tissue formation and morphogenesis. Although nacre has shown, in one study, to induce bridging of new bone across large non-union bone defects in 8 individual human patients, there have been no succeeding human surgical studies to confirm this outstanding potency. But the molecular mechanisms associated with nacre osteoinduction and the influence on bone marrow-derived mesenchymal stem cells (BMSC's), skeletal stem cells or bone marrow stromal cells remain elusive. In this study we highlight the phenotypic and biochemical effects of Pinctada maxima nacre chips and the global nacre soluble protein matrix (SPM) on primary human bone marrow-derived stromal cells (hBMSCs) in vitro. In static co-culture with nacre chips, the hBMSCs secreted Alkaline phosphatase (ALP) at levels that exceeded bone morphogenetic protein (rhBMP-2) treatment. Concentrated preparation of SPM applied to Stro-1 selected hBMSC's led to rapid ALP secretions, at concentrations exceeding the untreated controls even in osteogenic conditions. Within 21 days the same population of Stro-1 selected hBMSCs proliferated and secreted collagens I-IV, indicating the premature onset of an osteoblast phenotype. The same SPM was found to promote unselected hBMSC differentiation with osteocalcin detected at 7 days, and proliferation increased at 7 days in a dose-dependent manner. In conclusion, nacre particles and nacre SPM induced the early stages of human bone cell differentiation, indicating that they may be promising soluble factors with osteoinductive capacity in primary human bone cell progenitors such as, hBMSC's.
Kim, Sang-Mi;Ha, Hye-Kyung;Hong, Soon-Bok;Kim, Chung-Sook
Korean Journal of Oriental Medicine
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v.10
no.1
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pp.127-135
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2004
Hematopoietic stem cells in bone marrow form all kinds of blood cells. In traditional medicine, functions of bone marrow cells are very similar to those of Essence(精) which is a fundamental factor of physical development and reproduction. Our experiment examined the effect of deer blood on aplastic anemia induced mouse using cyclophosphamide 150 mg/kg i.p injection before experiment and then another cyclophosphamide 120 mg/kg i.p injection on day 10. Then we administrated dried deer blood in distilled water for 5 days, 9 days and 10 days. We examined blood and marrow samples. In results, deer blood showed a trend of effectiveness on recovery of red blood cells and erythropoietin although they were not statistical significant. And deer blood did not show changes in CD34.
The bone marrow scans with colloidal $^{198}Au$ were performed on 33 cases with hematologically normal patients and patients with various blood dyscrasia. Bone marrow aspirations were done at iliac crest in all cases but one. A correlation between the scan findings and an erythroid cellularity was evaluated. The following results were obtained. 1) Out of 33 cases, 23 (about 70%) showed a correlation between $^{198}Au$ marrow uptakes on the scans and the erythroid cellularity. 2) The diseases in which no correlation existed between $^{198}Au$ uptake and erythroid cellularity were aplastic anemia, acute leukemia and chronic myelogenous leukemia.
Orthodontic tooth movement in response to orthodontic force results from actions of osteoclasts and osteeoblasts in the cell level. Convincing evidence has now been provided to support the view that osteoclasts are derived from mononuclear cells that originate in the bone marrow or other hematopoietic organs and they migrate to the bones via vascular routes. Nitric oxide(NO), which accounts for the biological properties of endothelium-derived relaxing factor(EDRF), is the endogenous stimulator of soluble guanylate cylase. The discovery of the formation of nitric oxide(NO) from L-arginine in mammalian tissues and its biological roles has, in the last 7 years, thrown new light onto many areas of research. Data from experiments in vitro showed that N-metyl-L-arginine(L-NMA) and L-nitro-L- arginine(L-NAME) are competitive inhibitors of nitric oxide synthase. This study suggest that the multinucleated cells in our culture have characteristics of osteoclasts and that the potential bone cell activity of nitric oxide in vitro may be mediated in part by stimulation of marrow mononuclear cells to form osteoclast-like cells. Bone marrow cells were obtaineed from tibia of 19-days old chick embryo. After sacrifice, tibia was quickly dissected and the bone were then split to expose the medullary bone. The cells were attached for 4 hours and the nonadherent cells were collected. Marrow cells weere cultured in 96-well plate in medium 199. To examine the number of TRAP-positive multinucleated cells(MNCs), $10^{-8}\;M\;Vit=D_3$ and various concentration of L-NMA and L-NAME weere added at the beginning of cultures and with each medium change. After 7 days of culture. tartrate-resistant acid phosphatase(TRAP) staining was performed for microscopic evaluation. Cells haying more than three nuclei per cell were counted as MNCs. The obsrved results were as follows;1. 1,25-dihydroxyvitamine $D_3$ stimulated the osteoclast-like multinucleated cells in cultures of chick embryo bone marrow. 2. Nitric oxide synthase inhibitors(NOSI ; N-NMA, N-NAME) stimulated the osteoclast-like cells in cultures of chick embry bone marrow. 3. 1,25-dihydroxyvitamine$D_3$ and nitric oxide synthase inhibitors did not appear to have additive effect on the generation of TRAP-positive MNCs. These results suggest that nitric oxide synthase inhibitors may stimulate the osteoclast-like multinucleated cell formation and fusion in cultures of chick bone marrow.
Journal of the Korean Association of Oral and Maxillofacial Surgeons
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v.35
no.1
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pp.7-12
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2009
Purpose: Gelatin-hydroxyapatite nanocomposite is similar to inorganic nanostructure of bone. To make a scaffold with osteoinductivity, bone marrow derived stem cells from rabbit femur were impinged into the nanocomposite. This vitro study was to test osteogenic differentiation of the stem cells in the nanocomposite, which was made by authors. Material & Methods: Gel-HA nanocomposite with 10g of HA, 3 g of Gel has been made by co-precipitation process. Bone marrow was obtained from femur of New Zealand White rabbits and osteogenic differentiation was induced by culturing of the BMSCs in an osteogenic medium. The BMSCs were seeded into the Gel-HA nanocomposite scaffold using a stirring seeding method. The scaffolds with the cells were examined by scanning electron microscopy (SEM), colorimetry assay, biochemical assay with alkaline phosphatase (ALP) diagnostic kit, osteocalcin ELISA kit. Results: Gel-HA nanocomposite scaffolds were fabricated with relatively homogenous microscale pores ($20-40{\mu}m$). The BMSCs were obtained from bone marrow of rabbit femurs and confirmed with flow cytometry, Alizarin red staining. Attachment and proliferation of BMSCs in Gel-HA nanocomposite scaffold could be identified by SEM, ALP activity and osteocalcin content of BMSCs. Conclusion: The Gel-HA nanocomposite scaffold with micropores could be fabricated and could support BMSCs seeding, osteogenic differentiation.
The purpose of this study was performed to investigate the mineralization and differentiation of osteobalsts for bone regeneration in vitro and the effect of rate of the composition in periodontal cells on mineralization. For this study, healthy gingival tissues were surgically obtained from the patients during 1st premolar extraction for the purposes of orthodontic treament. Gingival tissue was washed several time with Phosphate buffered saline contained high concentration of antibiotics and antifungal agent, and cultured in Dulbecco's Modified Eagle's Medium(DMEM, Gibco, U.S.A.). Every cell were cultured in state at $37^{\circ}C$, 100% of humidity, 5% of $CO_2$ incubator. Bone marrow stromal cells were isolated from 5-clay-old rat femur with using medium irrigation mathod by syringe. Cell suspension medium were centrifuged at 1500 rpm for 5 min and then cultured in the petri dish. Two kinds of cell were freezed and stocked in the liquid nitrogen tank until experiment. Cell were incubated into the 24 multi-well plate with $5{\times}10^4$cell/well of medium at $37^{\circ}C$, 100% of humidity 5% $CO_2$ incubator for 24 hours. After discarded of the supernatent of medium, O.5ml of medium were reapplied and incubated. And counted the number of cell using the hemocytometer and inverted light microscope. We have measured the number of mineralized nodule with using Alizarin red S. staining in microscope. Furthermore every cell were observed the morphological change between every rate of co-culture of the two kinds of cell. The results were as follows; The rate of proliferation of co-culture cell revealed high rate tendency compared the bone marrow stromal cell only and low growth rate to compared with gingival fibroblast only. The tendency of formation of the mineralized nodule were observed dose-depend pattern of bone marrow stromal cell. It is concluded that the gingival fibroblast may inhibit the formation of mineralized nodule in the culture of the bone marrow stromal cell.
BACKGROUND/OBJECTIVES: The aim of this research was to study the different long term effects of consumption of dietary oil sources with varying omega-6/omega-3 (${\omega}-6/{\omega}-3$) polyunsaturated fatty acids (PUFAs) ratios on bone marrow fatty acid level, ex vivo prostaglandin $E_2$ ($PGE_2$) release, and mineral content of bone in rabbits. MATERIALS/METHODS: For this purpose, weaning and female New Zealand white rabbits were purchased and randomly divided into five groups and offered ad libitum diets containing 70 g/kg of added oil for 100 days. The dietary lipid treatments were formulated to provide the following ratios of ${\omega}-6/{\omega}-3$ fatty acids: 8.68 soy bean oil (SBO control), 21.75 sesame oil (SO), 0.39 fish oil (FO), 0.63 algae oil (DHA), and 0.68 algae oils (DHA/ARA). DHA and ARA are two types of marine microalgae of the genus Crypthecodinium cohnii. RESULTS: The dietary treatments had significant effects on the bone marrow fatty acids of rabbits. Rabbits fed the FO diet, containing the highest ${\omega}-3$ PUFA concentration, and those fed the SBO diet showed the highest ${\omega}-6$ PUFA. On the other hand, a positive correlation was observed between Ex vivo $PGE_2$ level and the ${\omega}-6/{\omega}-3$ dietary ratio. Significant effects of dietary treatment on femur Ca, P, Mg, and Zn contents were observed in both genders. CONCLUSIONS: Findings of the current study clearly demonstrated that dietary PUFA, particularly ${\omega}-6/{\omega}-3$ and ARA/EPA ratios are important factors in determining bone marrow fatty acid profile, and this in turn determines the capacity of bone for synthesis of $PGE_2$, thereby reducing bone resorption and improving bone mass during growth.
Purpose : Marrow edema and fatty degeneration of the hip joint bones could be initial and late signs in hip joint and its bone diseases respectively, which might be differentiated from age-related marrow conversion pattern. So authors have investigated normal marrow conversion pattern of the femur and acetabulum around the hip joints. Materials and methods : Three coronal MR images of 288 hip joint bones in 144 subjects, aged 2 days to 76 years divided to 8 groups every 10 years, were retrospectively analysed for the location and appearance of the converted yellow marrow. The converted yellow marrow were divided to head, neck, and trochanter in the proximal femur and below and above 50% in acetabulum of the hip. Results : The most common type of marrow conversion is the converted yellow marrow in the entire proximal femur and below 50% of acetabulum of the hip. We observed the start of marrow conversion in just before and after 2 years old and stopped at just before and after 20 years old. Conclusion : The understanding of age-related marrow conversion pattern of the hip joint bones would provide some information for differentiation from pathologic condition of them such as edema, fatty degeneration, metastasis, or leukemia.
The most serious problem resulting from estrogen deficiency induce osteo porosis. Recently, they make efforts to inquire a relation between hematopoietic organ and bone loss due to estrogen deficiency. Estrogen have an effect on growth and formation of skeletal system, and inhibit bone resorption under the influence of osteoblast and osteoclast, and basically inhibit the increase of hematopoietic progenitor and immune factor connected with bone resorption and prevent the osteoid formation. The purpose of this article was to observe the change of spleen and effect on hematopoietic function following estrogen administration. In this study, female rats of 150g weight was ovariectomized, after 70 days, experimental group was injected estrogen at interval of a week and sacrificed on 1, 2, 3, 4, 6 weeks. Control group was sacrificed after ovariectomy on 11, 12, 13, 14, 16 weeks without estrogen injection, and normal rats were sacrificed for harvest of spleen and femur. Paraffin sections and H&E stain was performed, and observed under light microscope. The obtained results were as follows. 1. From 11 to 12 weeks at bone marrow of control group, hematopoietic cells were decreased in comparison with normal group, and lipid infiltration was seen, and irregular bone remodelling was seen after 13 weeks. From 14 to 16 weeks, there were more decreased hematopoietic cells and lipid degeneration, and lipid degeneration of hematopoietic cells appeared. 2. All the bone marrow of experimental group, the structure of hematopoietic cells with decreased lipid infiltration was recovered from 2 weeks of estrogen adminstration and maintained to 6 weeks. 3. At spleen of control group, borders of white and red pulp was not well demarcated, and size of white pulp was decreased. 4. At spleen of experimental group, borders between white and red pulp have been well demarcated from 3 weeks of estrogen adminstration relatively, and white pulp was increased with distinct border. From above findings, we could regarded that estrogen deficiency due to ovariectomy influenced on hematopoietic cells of bone marrow and spleen, and histologic recovery of hematopoietic cells were observed after 3 weeks of estrogen adminstration even if it was not reach to normal group.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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