Paragonimus westermani is a common fluke in Uorea. The present study aimed to observe the cell mediated immune response in experimental paragonimiasis of mice. The mouse (BALB/c) was orally inoculated with 40 metacercariae of P. westermani from Cambaroides similis. During the infection (1, 2, 4, 6 weeks) of mouse, blastogenic response of splenic Iymphocytes to P. westermani adult antigen, metacercaria antigen, and PHA were observed. Sera from infected and noninfected mice added to normal mouse splenic Lymphocytes with or without PHA. The blastogenic response of splenic Lymphocytes to PHA was reduced after 1 week of infection. However after 6 weeks of infection, the response was restored to the control level. The blastogenic response of splenic Iymphocytes to P. westermani adult or metacercaria antigen increased significantly on 1 week after infection, and maintained up to 6 weeks after infection. The response of non-infected mice was suppressed by addition of the infected mouse serum. The present results suggested that cellular immunity was involved in P. westermani infected mice and that P. westermani anti.serum inhibited proliferation of T Iymphocytes.
This study was to observe the changes of blastogenic responses of splenic Iymphocytes to T-cell mitogens, N. fcwleri Iysate and concanaualin A, and serum antibody titer during the course of experimental PAM in mice. Naegleria fcwleri, strain 0359, was cultured in the CGVS medium axenically and inoculated intranasally with $7{\times}10^4$ trophozoites for the development of experimental PAM in mice. The amoebae were subjected to ultrasonication and centrifuged at 20,000g for 60 minutes, and filtered through $0.2{\mu\textrm{m}}$ filter membrane. The supernatant, N. fcwleri Iysate, was used as T-cell mitogen, and antigen for ELISA. The serum antibody was examined by ELISA using peroxidase conjugate. Two hundred ${\mi}l$ of $10^6$ splenocytes in RPMI 1640 containing 0% fetal calf serum were added to each well of a microtiter plate. To each well was added T-cell mitogens, $100{\mu}g/ml$ of N. fowleri Iysate or $4{\mu}g/ml$ of con. A, and the plates were incubated for 42 hours at $37^{\circ}C$ in 5% $CO_2$ incubator. Cultures were pulsed with of $methyl-(^3H)-thymidine$ 6 hour before harvesting. The mean blastogenic response of the splenocytes to N. fewleri Iysate was reduced, whereas that to con. A was also reduced up to on day 11 after infection. Both of these results were statistically significant compared with those of uninfected control group. The serum antibody titers were increased gradually up to day 15. The results indicated that there was an impairment of the blastogenic response of splenocytes to N. fowleri Iysate during the acute course of experimental PAM in mice.
This work was carried out to investigate the functional heterogeneity of peripheral blood lymphocytes(PBLs) in carp, Cyprinus carpio. PHA, Con A, LPS and BCG were injected intraperitoneally into carp to determine the blastogenic response and rosette formation activity. In each group of fish treated with stimulators, the cell numbers and DNA contents of lymphocytes were higher than those of untreated control group and reached the highest level between 1 week and 2 weeks after injection with mitogens. These results showed that BCG and Con A were strong stimulators of proliferation compared to PHA and LPS. However, PHA-treated fish twice showed the highest rosette formation response among the consecutive stimulations with the same mitogen. Alase, the results on consecutive mitogen stimulation revealed that carps reinjected by different mitogens led to an increased stimulation higher than the one reinjected after 1 week with same mitogen. It seems that different mitogens may stimulate different cell populations and implies functionally separated subpopulations of lymphocytes in carp.
In order to test the function of Iymphocytes in Naegleria fowleri-nniected mice, the in nitro blastogenic response of splenocyte cultures to non-specific mitogens was studied. Concanavalin A and lipopolysaccharide stimulation were used as tests of T cell and B cell function. For the first 14 days following N. fowleri infection, Iymphoblastic transformation induced by T-cell mitogen was markedly reduced in comparison to the uninfected control mice. The blastogenic response to B-cell mitogen remained depressed in the infected mice up to 14 days after infection. The fluorescent antibody titers of sera of N. fowleri infected mice were between 1 : 4 and 1 : 32. The results suggest that there is a suppression of cell mediated immunity during the acute course of experimental Naegleria meningoencephalitis in mice.
Observations were made on the differences in cell-mediated immune responses in the mice infected with strongly pathogenic Naegleria fewleyi ITMAP 359, weakly pathogenic Naegzeria jadini 0400, or non.pathogenic Naegleria gruberi EGB, respectively. Variations in cell-mediated responses and changes in antibody titers according to the duration after infection wore noted. Infections were done by dropping $5{\;}{\mu}l$ saline suspension containing $10{\times}10^4$ trophozoites cultured Bxenically in the CGVS medium into the right nasal cavity of ICR mice aging about 6~7 weeks, under the anesthesia by intraperitoneal injection of'secobarbital. Following infection, delayed type hypersensitivity(DTH) iesponses in the footpad and blastogenic responses of the mouse spleen cells using [$^3H$]-thymidine were observed on the day 1, 4, 7, 10 and 14 after infection. For the preparation of amoeba Iysates, each of cultured trophosoites were homogenized with an ultrasonicator, and centrifugated at 20,000 g. The supernatants of amoeba Iysates were used as the mitogen'and antigen for ELISA. Confanavalin A(Con. A) and lipopolysaccharide(LPS) were also used as mitogens in the blastogenic response. 1. The mice infected with N, fowleri showed the mortality rate of 75.7%. The rate was 6.2% for the N. jadini infected group, while no dead mouse was observed for N. gruberi infections. 2. In regard to DTH responses in the H. fewleri infected mice, the level increased in com- parison to the control group but declined after 7 days. An increase was also noted for the JV. jadini group after 1 day, but gradual decreases were observed through the infection period. In addition, no difference was noted between the N. gruberi infected and control groups. 3. Concerning the blastogenic response of the splenocytes, it increased after 10 days in the experimental group of N, fcwleri infection, but the differences ware not statistically significant compared with control group. It was evident that N. jadini group was not different from control group either, while there was a tendency of decrease in SV. gruberi infected group. In regard to the blastogenic response of the splenocytes by LPS, it was found that the N. fowlgri, N. jadini and N. gruberi infected groups had no differences from the control group. 4. The serum antibody titer of N. fcwleri and N. jadini infected mice increased from the day 7 and 14 after infection respectively, while the N. gruberi infected mice showed no increase. In summary of the results, it was observed that there were differences in the cell-mediated immune responses and serum antibody titers in the mice infected with strongly pathogenic JV. fowleri, weakly pathogenic N. jadini, or non.pathogenic N. gruberi, respectively.
This study was planned to estimate the activity of bovine circulating blood lymphocytes using phytohemagglutinin-M(PHA) known as T cell mitogen. Bovine circulating blood mononuclear cells(MNCs) was separated, and cultured with or without macrophage($PHA^+/M{\phi}^+$ or $PHA^+/M{\phi}^-$) in conditioned medium which stimulated with various concentration of PHA(0, 5, 10, 15 and $20{\mu}g/ml$ in medium), and then investigated the blastogenic response and rosette formation of lymphocytes. Blastogenic rate(BR) was especially increased in PHA concentration(10 and $15{\mu}g/ml$) of $PHA^+/M{\phi}^+$ group and their BR were $41.5{\pm}6.8%$ and $44.4{\pm}8.9%$, respectively and BR in PHA concentration(15 and $20{\mu}g/ml$) of $PHA^+/M{\phi}^-$ group was $32.8{\pm}6.2%$ and $31.4{\pm}4.6%$, respectively. BR of lymphocytes was more increased in $PHA^+/M{\phi}^+$ than $PHA^+/M{\phi}^-$ group when these cells were stimulated by PHA. Rosette forming rate(RFR) of lymphocytes to SRBC highly increased when SRBC was treated with AET and/or dextran, respectively. On the orther hand, RFR significantly increased more in $PHA^+/M{\phi}^+$ and $PHA^+/M{\phi}^-$ group than in control group, but when compared with two groups, statistical significancy was recognized only in PHA concentration($15{\mu}g/ml$, p<0.026) of $PHA^+/M{\phi}^+$ group.
Park, Hyeon-Ae;Kweon, Mee-Hyang;Han, Hyung-Mee;Sung, Ha-Chin;Yang, Han-Chul
Korean Journal of Food Science and Technology
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v.30
no.4
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pp.976-982
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1998
The effects of the glycoprotein (PAG) isolated from Pteridium aquilinum on the immune function was examined in mice. PAG was intraperitoneally administered into BALB/C mice for 14 days and the antibody forming ability to hen egg lysozyme (HEL) and the blastogenic responses of splenocytes were measured. PAG treatment significantly increased antibody formation to HEL in a dose-dependent manner. Blatogenesis of splenocytes in response to lipopolysaccharide (LPS, B-cell specific mitogen) or phytohemagglutinin (PHA, T-cell specific mitogen) was also increased after treatment with PAG, indicating that the PAG increases both humoral and cellular immunities. To examine whether the immune function of PAG was via a direct effect on the lymphocytes, splenocytes were isolated from BALB/C mice, exposed to various concentrations of PAG in vitro and the blastogenic responses were measured. In vitro exposure to PAG significantly increased blastogenesis of splenocytes to LPS up to $500{\;}{\mu}g/kg$, whereas the blastogenic response to PHA was not altered by PAG treatment. To identify the fraction responsible for the increase in the immune function, the effect of periodate digest, pronase digest or purified polysaccharide on the antibody production to HEL was examined. Crude protein fraction of PAG significantly increased the antibody formation to HEL. On the other hand, both crude and purified polysaccharide fractions did not have any effects on the antibody production ability. These data indicated that 1) PAG increased both humoral and cellular immune functions, 2) the increase in humoral immunity was probably via a direct action of PAG on lymphocytes and 3) the protein portion of PAG was responsible for the increase in humoral immunity.
Till date the phenomenon of maternal transfer of photic information was reported to regulate the fetal/neonatal growth, however its influence on neonatal immune system is still an enigma. In the present study, we observed an increase in maternal plasma melatonin level under short day length (SOL) condition with a consequent decrease in TLC and LC in their respective neonates. However, a significant decrease in maternal plasma melatonin level was noted under constant darkness (DD) with an increase in TLC and LC of their neonates. The blastogenic response (BGR) to Con A of splenocytes exhibited a significant increase in neonates of SDL females and a significant decrease in the neonates of DD females. Hence, it appears that the increase in maternal plasma melatonin under SOL condition transmitted information to decrease the immune status. Continuous exposure of females to darkness (DD) negatively regulated the maternal pineal gland activity thereby decreasing their plasma melatonin level. This information was transmitted for elevation of immune status in neonates, so that they exhibit better growth and sexual maturation. Therefore, we may suggest that the maternal photic information transmitted either prenatally through placenta or postnatally via the milk regulate the hormonal profile of Melatonin to regulate the immune status of neonates in order to influence their growth and sexual maturation.
Multiple beneficial properties of Opuntia ficus indica (OPF) are well established. In the present study, we have investigated the immunological role of OPF extract (OPFE) on murine splenocytes. OPFE dose- and time-dependently enhanced the proliferation of splenocytes without cytotoxicity. Our results also showed that the number of $CD4^+$ helper T cells and CD45R/$B220^+$ pan B cells increased markedly, but not $CD8^+$ cytotoxic T cells or $CD11b^+$ granulocytes/macrophages. In addition, OPFE significantly decreased the production levels of T helper (Th) 1 type cytokines, interferon (IFN)-$\gamma$, and tumor necrosis factor (TNF)-$\alpha$, although had no significantly differences in those of interleukin (IL)-4, a Th2 type cytokine in concanavalin A (Con A)-stimulated blastogenic cells. Furthermore, OPFE alone strongly increased IL-4 production and decreased TNF-$\alpha$ production even in the absence of Con A. On the basis of these results, this study suggests that OPFE enhances immunity by regulating the pro- and anti-inflammatory response, indicating that this extract exerts a marked immunomodulatory effect, confirming its usefulness as therapy for immune-related diseases.
Naegleria fowleri is the cause of primary amoebic meningoencephalitis in man, IL-2 levels after stimulation of T lymphocytes by PHA or N.fowleri lysates. the amounts of T lymphocyte subsets and the blastogenic responses of T lymphocytes in mice after Infected with pathogenic N. fowleri were studied comparing between two study groups, one $1{\;}{\times}{\;}10^4$ trophozoites inoculated mice and the other $1{\;}{\times}{\;}10^5$ trophozoites inoculated mice. All experimental samples were obtained on the day 7, 14 and 24 after inoculation. The mice inoculated with $1{\;}{\times}{\;}10^4$ trophozoites showed a 14.3% mortality rate, and 72.2% in the mice inoculated with $1{\;}{\times}{\;}10^5$ trophozoites. The IL-2 levels on day 14 of two experimental groups were significantly decreased as compared with the control group. Thy 1.2+T cells in the total spleen Iymphocytes of $1{\;}{\times}{\;}10^5$ trophozoites inoculated group on day 7 were significantly increased compared with the control group. There was no significant difference between $1{\;}{\times}{\;}10^4$ trophozoites inoculated group and the control group. $L3T4^{+}{\;}T$ cells and $Ly2^{+}$ T cells in the total spleen Iymphocytes of $1{\;}{\times}{\;}10^5$ trophozoites inoculated group on day 7 were sigrlificantly increased compared with the control group. The DNA S fraction of T cells in the spleen of $1{\;}{\times}{\;}10^5$ trophozoites inoculated group was significantly increased on day 7. The amount of S fractions of DNA were sequentially decreased on day 14 and 24 but they were also signiacantly increased compared with the control group. The results obtained in the experiments indicats that cell mediated immunity after N.fowleri infection acts on very important host's protection immunity around the 7th day after infection. IL-2 level was much suppressed on day 14 which resulted from the exhaustion of host immune response. It was observed that the level of IL-2 production ability and the amounts of T lymphocytes subsets and the blastogenic responses of T lymphocytes were not well correlated during the observation period.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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