• Applied Microscopy
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• 제23권2호
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• pp.53-77
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• 1993

In this study, an attempt was made to investigate the probable organelles participating in the secretion of biligrafin. The animals (ICR male mice, 25-30gm) were divided into normal control and 6 biligrafin injected groups to which 30% biligrafin (0.006ml/gm b.w.) were injected at 10, 20, 40, 80, 160 and 320 min prior to the sampling. The mice of each group were perfused through the heart with ice-cold 2.5% glutaraldehyde buffered with 0.1M Na-cacodylate (pH. 7.4) under the Na-pentobarbital (Nembtal 0.0015mg/gm b.w.) anesthesia and liver tissues were taken from each group. Some specimens were immersed 1 hr in the same solution used in the perfusion. After an overnight rinse in 0.1M Na-cacodylate buffer containing 10% DMSO and 7.6% sucrose, $75{\mu}m$ fronzen sections were made for cytochemical study. The sections were incubated in thiamin pyrophosphatase (TPPase) and inosine diphosphatase (ID Pase) media for 70 min at $37^{\circ}C$ respectively and acid phosphatase (AcPase) medium for 40 min at $37^{\circ}C$. They were postfixed in 1 % $OsO_4$ for 1 hr. The other specimens were immersed for 8 hrs in the fixative consisting of 2.5% glutaraldehyde and 3.0% paraformaldehyde buffered with Na-cacodylate (pH. 7.4). All of the osmificated specimens were processed for electron microscopy. In both normal and biligrafin injected groups, endoplasmic reticulum (ER), vacuoles, Golgi apparatus and lysosomes were seen in the vicinity of bile canaliculus. In the biligrafin injected groups, however, the Golgi apparatus appeared to be decreased and ER and vacuoles were dilated and increased. The rough endoplasmic reticulum (RER) having a few attached ribosomes appeared to be the round saccule, especially at 20 min after biligrafin injection. Smooth endoplasmic reticulum (SER) seemed to be formed by the detachment of ribosomes at the cisternal end of RER. The cistern of SER showed saccules which probably budded off to form the vacuole. The vacuoles were devoid of visible centents. This finding seemed to be in agreement with the biochemical property of the bile constituents. The fusion between the vacuoles and bile canaliculus were frequently seen in the groups injected with biligrafin. The lysosome did not show any changes in the biligrafin injected groups. Accumulation of some material and lipid droplets were seen at the 40 and 80 min after biligrafin injection, especially at the latter. At 160 and 320 min after biligrafin injections, however, they were decreased successively while the RER stack, free ribosomes and polysomes were increased. Although the reactive products of TPPase and IDPase were observed in the ER saccules and vesicles of the normal control and biligrafin injected groups, the fusion between the bile canaliculus and saccules or vesicles could easily be seen in the latter. The AcPase activity, however, was observed in the cistern at the maturing face of Golgi apparatus and lysosomes in both normal and biligrafin groups. The results suggest that the biligrafin is excreted via the vesicles, vacuoles or sacoules probably derived from the SER without the participation of Golgi apparatus and lysosomes, and the excess amount of material is stored as inclusions during the repairing of the organelles being overactive.

• Applied Microscopy
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• 제27권3호
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• pp.295-308
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• 1997

본 연구에서는 dehydrocholic acid와 biligrafin 투여 20분 후, 기아 8일 후 및 담관결찰 48시간 후의 흰쥐 간을 동결할단하여 담세관 주위 폐쇠띠의 미세구조를 관찰하였다. 정상대조군에서 폐쇠띠는 여러부위에서 $1\sim4$개의 줄로 이루어진 망상구조를 보였다. dehydrocholic acid 투여군에서는 폐쇠띠의 폭이 넓어져서 망상구조의 줄은 $6\sim9$개로 증가된 부위가 많이 나타났다. 그러나 biligrafin 투여군에서는 줄이 감축되어 있었으며 망상구조는 흩으러져 있었다. 기아군에서는 많은 부위에서 폐쇠띠가 $2\sim3$개의 줄로 이루어져 있었으며 이들 줄은 느슨하게 연결되어 있었다. 결찰군에서도 많은 부위에서 폐쇠띠의 망상구조는 흩으러져 있었으며 줄들이 감축되어 있거나 아직 감축되지 않은 상태로 있는 부위도 관찰되었다. 그러나 모든군에서 줄들은 틈을 보이면서 단절되어 나타나거나 선상으로 배열된 입자로 이루어져 있었는데 특히 biligrafin군과 결찰군에서 이러한 소견이 현저하였다. 줄의 끝이 유리되어 있는 것들은 기아군에서 많이 관찰되었는데 dehydrocholic acid군에서는 줄의 끝이 교통반에 접해 있거나 그 주위를 둘러싸고 있는 것들을 많이 볼 수 있었다. 줄들이 불연속적으로 나타나거나 끝이 유리된 것은 정상군에서도 드물지 않게 관찰되었다. 결찰군을 제외한 모든 군에서 담세관 주위 폐쇠띠가 그망안에 입자의 집괴를 함유하고 있었다. 이상의 증거로 미루어 담세관 주위의 폐쇠띠는 담세판의 상태에 따라 쉽게 변하는 것 같이 보이며 같은 담세관에서 일지라도 부위에 따라 구조적 변화에 차이가 있는데 이러한 소견은 정상상태하에서도 비슷하게 나타나고 있어 폐쇠띠가 완전한 장벽으로서의 역할을 하고 있지 않는 경우도 있는 것 같이 보인다. 또한 폐쇠띠는 기계적 자극이나 다른 어떠한 인자에 의해서 쉽게 영향을 받는 것 같이 보이며 폐쇠띠의 변화에 연관하여 줄과 입자의 집괴 사이에도 어떠한 관계가 있을 것으로 추정된다.