Cytosolic $Ca^{2+}$ is an important regulator of tumor cell proliferation and metastasis. Recently, the strategy of blocking receptors and channels specific to certain cancer cell types has emerged as a potentially viable future treatment. Oral squamous cell carcinoma is an aggressive form of cancer with a high metastasis rate but the receptor-mechanisms involved in $Ca^{2+}$ signaling in these tumors have not yet been elucidated. In our present study, we report that bradykinin induces $Ca^{2+}$ signaling and its modulation in the human oral squamous carcinoma cell line, HSC-3. Bradykinin was found to increase the cytosolic $Ca^{2+}$ levels in a concentration-dependent manner. This increase was inhibited by pretreatment with the phospholipase C-${\beta}$ inhibitor, U73122, and also by 2-aminoethoxydiphenyl borate, an inhibitor of the inositol 1,4,5-trisphosphate receptor. Pretreatment with extracellular ATP also inhibited the peak bradykinin-induced $Ca^{2+}$ rise. In contrast, the ATP-induced rise in cytosolic $Ca^{2+}$ was not affected by pretreatment with bradykinin. Pretreatment of the cells with either forskolin or phorbol 12-myristate 13-acetate (activators of adenylyl cyclase and protein kinase C, respectively) prior to bradykinin application accelerated the recovery of cytosolic $Ca^{2+}$ to baseline levels. These data suggest that bradykinin receptors are functional in $Ca^{2+}$ signaling in HSC-3 cells and may therefore represent a future target in treatment strategies for human oral squamous cell carcinoma.
BACKGROUND: To improve the Daechung reservoir water quality, a quantitative estimation of the delivery load from upper watershed need to be conducted prior to others. To do so, an intensive monitoring is necessary because of the complexity and uncertainty of the delivery load from uppper watershed. However, intensive monitoring need to invest much time, cost, and effort. So, many researcher have developed an equation to estimate the delivery loads. But, relatively little research has been conducted on the applicability of pre-developed equation using other sites. Therefore, the objective of this study was to evaluate application of the equation for BOD, T-N and T-P delivery load. METHODS AND RESULTS: To verify the applicability of the equation, the following equation was used; Delivery loads(kg/day)=generated pollutant loads${\times}(1-{\alpha}){\times}$(daily outflow/${\beta})^{\gamma}$. The equations could be calculated the daily delivery loads of streams without any data of water quality, only with the data of daily runoff of study sites. The equations were applied to Youngdogcheon, Chogangcheon, Bocheongcheon, Sookcheon to examine its applicability using monitoring data. The results showed that the estimated delivery loads were in a good agreement with the observed data and indicated reasonable applicability of the equations. CONCLUSION(s): Overall, the equations were satisfactory in estimation of delivery loads at upper watershed of the Daechung reservoir. Therefore, the equations could be contributed to better water quality management in the Daechung reservoir.
Neuropeptide such as calcitonin gene-related peptide and substance P may mediate neurogenic inflammation, but little is known about the regulation of neuropeptide release from rat spinal cord. Eugenol has been reported to reduce odontogenic pain and is known to have a structure similar to capsaicin, a potent stimulant of certain nociceptors. This study was done to examine the effect of capsaicin and eugenol on immunoreactive calcitonin gene-related peptide (iCGRP) release from rat spinal cord and whether eugenol regulates capsaicin-sensitive release of iCCRP or it evokes capsaicin-sensitive release of iCGRP. The dor-sal half of rat lumbar spinal cord was chopped into 200$\mu$m slices. They were superfused (500$\mu$l/min) in vitro with an oxygenated Kreb's buffer. The EC$_{50}$ of capsaicin on iCGRP release was measured. Eugenol (600$\mu$M and 1.2mM) and vehicle (0.02% 2-hydroxyl-$\beta$-cyclodextrin) were administered prior to stimulation of rat lumbar spinal cord with capsaicin. The amount of iCGRP release from rat lumbar spinal cord was measured by radioimmunoassay. The results were as follows : 1. iCGRP release from rat lumbar spinal cord was dependent on concentration of capsaicin. The EC$_{50}$ of capsaicin on iCGRP release was 3$\mu$M. 2. In the vehicle treated group, capsaicin (3$\mu$M) evoked a 14-fold increase over basal iCGRP level. 3. Administration of 600$\mu$M and 1.2mM eugenol evoked a 2.2-fold increase and a 2.3-fold increase over basal iCGRP level respectively. 4. Administration of 600$\mu$M and 1.2mM eugenol increased capsaicin evoked release of iCGRP by more than 50%. These results indicate that eugenol evoke CGRP release from central nervous system and potentiate the pain-inducing action of capsaicin on it.
Kim, Song-Ja;Park, Jae-Han;Lee, Sun-Ryung;Bang, Ok-Sun;Kang, Shin-Sung
Animal cells and systems
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제4권3호
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pp.279-285
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2000
Vitamin E-succinate (VES) treatment of U937 human monoblasts induced cells to undergo apoptosis. After 96 h of VES treatment at 10 $\mu$/ml, more than 80% of cells appeared apoptotic. Evidence for apoptosis by VES was based on propidium iodide staining for detection of chromatin condensational fragmentation and electrophoretic DNA ladder formation. Western blot analyses showed a transient increase in Fas and p21 protein levels up to 48 h alter the VES treatment. Protein expression and activity of CDK1 and lamin B degradation were remarkably induced by VES, following the cleavage of caspase-3 after 48 h. The VES-induced apoptosis was found to involve activation of PKC as shown by increases in membrane translocation of PKC$\beat$II and PKC activity. Pretreatment of GF109203X (PKC inhibitor) prior to VES treatment almost completely inhibited the induction of apoptosis as assessed by blockage of VES-induced caspase-3 activity and DNA fragmentation. However, GF109203X h8d no effect on the VES-induced nitric oxide synthesis, which was required for monocvtic differentiation in our previous report (J Cell Sci 111, 435, 1998). Taken together, our data suggest that induction of apoptosis by VES in U937 cells occurs through activation of PKC-$\beat$II resulting in the activation of caspase-3 cascade and is independent of nitric oxide.
The native form of serpin (serine protease inhibitor) is kinetically trapped in metastable state. Metastability in these proteins is critical to their biological function. Serpins inhibit target proteases by forming a stable covalent complex in which the cleaved reactive site loop of the serpin is inserted into $\beta$-sheet A of the serpin with concomitant translocation of the protease to the opposite of the initial binding site. Despite recent determination of the crystal structures of a Michaelis protease-serpin complex as well as a stable covalent complex, details on the kinetic mechanism remain unsolved. In this study we constructed several $\alpha$$_1$-antitrypsin variants and examined their kinetic mechanism of loop translocation and formation of protease-serpin complex by stopped-flow experiments of fluorescence resonance energy transfer as well as quenched-flow experiment. We report here the relationship of serpin's conformational switch mechanism with Inhibitory activity. There is little direct correlation between loop insertion rate and inhibitory activity. Rather, disrupting a salt bridge between R196 and E354 accelerates loop translocation even though it impairs the inhibitory activity. Moreover, the serpin's reactive site loop is translocated, at least partially, prior to loop cleavage.
한국식품영양과학회 2001년도 International Symposium on Food,Nutrition and Health for 21st Century
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pp.38-47
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2001
L-theanine is a unique amino acid, found almost solely in tea plants. It is the main component responsible for the exotic taste of green tea. In our studies of L-theanine, we have found a variety of biological activities including relaxation and the alleviation of PMS. In general, animals generate very weak electric pulses on the surface of the brain, called brain waves. Brain waves are classified into four types, namely $\alpha$, $\beta$, $\delta$ and $\theta$-waves, based on their frequency. Brain waves correlate with individual mental conditions. For example, generation of $\alpha$-waves is considered an index of relaxation. In human volunteers, $\alpha$-waves were generated on the occipital and parietal regions of the brain surface within 40 minutes after the oral administration of 50 or 200 mg Suntheanine$^{TM}$ without causing drowsiness. Premenstrual Syndrome (PMS) is a symptom unique to women which appears in the luteal phase from the ovulation period through the first day of menstruation. It possesses characteristics of having a peak just prior to menstruation and disappearing 1 - 2 days following the start of menstruation. Symptoms of PMS are generally categorized as mental, physical and social symptoms. When comparing the reported Symptoms of PMS by the methods of MDQ score, the Suntheanine$^{TM}$ group was found to have a lower incidence of PMS symptoms, including physical, mental and social symptoms. Overall, a significant alleviation of PMS symptoms by the administration of 200 mg Suntheanine$^{TM}$ was observed. With the successful industrial production of L-theanine, we are now able to supply Suntheanine$^{TM}$, offering a tremendous opportunity for designing functional foods targeting relaxation and the alleviation of PMS.
Background: Despite the large number of studies on ginseng, pharmacological activities of ginseng seed oil (GSO) have not been established. GSO is rich in unsaturated fatty acids, mostly oleic and linoleic acids. Unsaturated fatty acids are known to exert a therapeutic effect in nonalcoholic fatty liver disease (NAFLD). In this study, we investigated the protective effect and underlying mechanisms of GSO against NAFLD using in vitro and in vivo models. Methods: In vitro lipid accumulation was induced by free fatty acid mixture in HepG2 cells and by 3 wk of high fat diet (HFD)-feeding in Sprague-Dawley rats prior to hepatocyte isolation. The effects of GSO against diet-induced hepatic steatosis were further examined in C57BL/6J mice fed a HFD for 12 wk. Results: Oil Red O staining and intracellular triglyceride levels showed marked accumulation of lipid droplets in both HepG2 cells and rat hepatocytes, and these were attenuated by GSO treatment. In HFD-fed mice, GSO improved HFD-induced dyslipidemia and hepatic insulin resistance. Increased hepatic lipid contents were observed in HFD-fed mice and it was lowered in GSO (500 mg/kg)-treated mice by 26.4% which was evident in histological analysis. Pathway analysis of hepatic global gene expression indicated that GSO increased the expression of genes associated with ${\beta}$-oxidation (Ppara, Ppargc1a, Sirt1, and Cpt1a) and decreased the expression of lipogenic genes (Srebf1 and Mlxipl), and these were confirmed with reverse transcription and quantitative polymerase-chain reaction. Conclusion: These findings suggest that GSO has a beneficial effect on NAFLD through the suppression of lipogenesis and stimulation of fatty acid degradation pathway.
A splanchic artery occlusion for 90 min followed by reperfusion of the mesenteric circulation resulted in a severe form of circulatory shock, characterized by endothelial dysfunction, severe hypotension, marked intestinal tissue injury, and a high mortality rate. The effect of defibrotide, a complex of single-stranded polydeoxyribonucleotides having antithrombotic effect, was investigated in a model of splanchnic artery occlusion (SAO) shock in urethane anesthetized rats. Occlusion of the superior mesenteric artery for 90 min produced a severe shock state, resulting in a fatal outcome within 120 min of reperfusion in many rats. Defibrotide (10 mg/kg body weight) 10 min prior to reperfusion significantly improved mean arterial blood pressure in comparison to vehicle treated rats (p<0.05). Defibrotide treatment also significantly attenuated in the increase of plasma amino nitrogen concentration, intestinal myeloperoxidase activity, intestinal lipid peroxidation, infiltration of neutrophils in intestine and thrombin induced adherence of neutrophils to superior mesentric artery segments. Superoxide anion and hydrogen peroxide production in $1{\mu}M$ formylmethionylleucylphenylalanine (fMLP)-activated PMNs was inhibited by defibrotide in a dose-dependent fashion. Defibrotide effectively scavenged hydrogen peroxide, but not hydroxyl radical. Treatment of SAO rats with defibrotide inhibited tumor necrosis factor-${\alpha}$, and interleukin-1${\beta}$ productions in blood in comparison with untreated rats. These results suggest that defibrotide partly provides beneficial effects by preserving endothelial function, attenuating neutrophil accumulation, and antioxidant in the ischemic reperfused splanchnic circulation
인도부페 프로세스는 유한개의 행과 무한개의 열로 이루어진 이진행렬의 분포와 관련된 확률과정이다. 무한특성모형을 유한개의 행과 무한개의 열로 이루어진 이진행렬을 이용해서 표현할 때, 이진행렬에 대한 사전분포로써 인도부페 프로세스가 이용될 수 있다. 본 논문에서는 인도부페 프로세스를 유한특성모형과 연관지어서 유도하는 방법을 소개하고, 베타프로세스와의 관련성을 간략히 설명한다. 실제 모형의 추론에 인도부페 프로세스가 이용되는 예제를 살펴보기 위해서 가우시안 선형모형에 인도부페 프로세스를 적용한 모형화 방법을 언급하고, 깁스표집 알고리즘, 막대 자르기 알고리즘, 변분방법을 이용한 추론방법을 설명한다. 그리고 이 세 가지 알고리즘을 이용하여 이미지 자료를 분석하는데 적용해본다. 나아가 쌍자료 분석, 네트워크 분석, 독립성분 분석에서 인도부페 프로세스가 어떻게 이용될 수 있는지도 알아본다.
The effect of pH on degradation of paper by some fungi, which able to degrade cellulose, was investigated. Trichoderma koningii, Aspergillus nigerand Penicillium nigulosum were cultured at $28^{\circ}C$ for 16 days in the selective medium (PH3, PH4, PH5, PH6, PH7, PH8, PH9, PH10, PHC) containing paper as substrate. Each paper was pretreated with each pH buffer (pH 3∼pH 10, D.W.)prior to addition to the selective medium. Enzyme activities in the each culture medium were measured spectroph to metrically using C.M.C., Avicel, PNPG as the substrates for endoglucanase, exoglucanase and $\beta$-glucosidase, respectively. In all experimental fungi, the enzyme activities of PH3 and PH9 medium were usually much higher than those of other experimental groups. However in the PH6medium, enzyme activity was lower than other groups. To analyze the concentration and pattern of protein in the each culture medium, the medium was concentrated by lyophilization. The protein concentration of PH3 and PH9 medium were relatively high (T.koningii; 6.31mg, 6,19mg, A.niger; 1.62mg, 1.96mg, P.nigulosum;2.50mg, 2.73mg, respectively), but that of PH6 was relatively low. The protein pattern of each medium was analyzed by using SDS-PAGE and VDS Image Master Analysis Program. The concentrations of bands in the each lane were usually high at lane2 (PH3) and lane8 (PH9) and low at lane5 (PH6). Therefore, the incresed cellulolytic activity of fungus against acidified paper could be result of structural change and deterioration of paper caused by being acidified.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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