This study was carried out to understand the physiological properties and the effects of Bambusae Caulis in Liquamen manufactured by three different production process on blood glucose of the mice induced with streptozotocin. Original, filtered and refined Bambusae Caulis in Liquamen manufactured by three different production process were used. The physiochemical properties of original, filtered and refined Bambusae Caulis in Liquamen manufactured by three different production process were compared. Furthermore, the effects of original, filtered and refined Bambusae Caulis in Liquamen were observed in terms of blood glucose, BUN, ALT in the mice induced with streptozotocin. The results were as follows : The range of the pH manufactured by three different production processes was $2.28{\sim}3.17$ Concentration of methanol and phenolic compounds which are related to toxicity were lowest in filtered Bambusae Caulis in Liquamen(L-BCL [E] B) manufactured by using electric furnace at $215{\circ}C$ during 8.10/hour. The blood glucose contents was decreased in the experimental groups compared with the control. The amount of BUN and ALT did not show any differences between control and experimental group.
Streptochlorin is a small molecule isolated from marine Streptomyces sp. that is known to have antiangiogenic and anticancer properties. In this study, we examined the effects of this compound on reactive oxygen species (ROS) production and the association of these effects with apoptotic tumor cell death, using a human hepatocarcinoma Hep3B cell line. The results of this study demonstrated that streptochlorin mediates ROS production, and that this mediation is followed by a decrease in the mitochondrial membrane potential (MMP, ${\Delta}{\Psi}_m$), activation of caspase-3, and downregulation of antiapoptotic Bcl-2 protein. The quenching of ROS generation by N-acetyl-L-cysteine administration, a scavenger of ROS, reversed the streptochlorin-induced apoptosis effects via inhibition of ROS production, MMP collapse, and the subsequent activation of caspase-3. These observations clearly indicate that ROS are involved in the early molecular events in the streptochlorin-induced apoptotic pathway. Taken together, our data imply that streptochlorin-induced ROS is a key mediator of MMP collapse, which leads to the caspase-3 activation, culminating in apoptosis.
This study investigates the endoplasmic reticulum (ER) stress and subsequent apoptosis in duced during somatic cell nuclear transfer (SCNT) process of porcine SCNT embryos. Porcine SCNT and in vitro fertilization (IVF) embryos were sampled at 3 h and 20 h after SCNT or IVF and at the blastocyst stage for mRNA extraction. The x-box binding protein 1 (Xbp1) mRNA and the expressions of ER stress-associated genes were confirmed by RT-PCR or RT-qPCR. Apoptotic gene expression was analyzed by RT-PCR. Before commencing SCNT, somatic cells treated with tunicamycin (TM), an ER stress inducer, confirmed the splicing of Xbp1 mRNA and increased expressions of ER stress-associated genes. In all the embryonic stages, the SCNT embryos, when compared with the IVF embryos, showed slightly increased expression of spliced Xbp1 (Xbp1s) mRNA and significantly increased expression of ER stress-associated genes (p<0.05). In all stages, apoptotic gene expression was slightly higher in the SCNT embryos, but not significantly different from that of the IVF embryos except for the Bax/Bcl2L1 ratio in the 1-cell stage (p<0.05). The result of this study indicates that excessive ER stress can be induced by the SCNT process, which induce apoptosis of SCNT embryos.
Jang, Ji Yeon;Park, Bo-Ram;Lee, Seul Ah;Choi, Mi Suk;Kim, Chun Sung
International Journal of Oral Biology
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제47권1호
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pp.9-15
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2022
Humulus japonicus (HJ) is a widely used herbal medicine for pulmonary tuberculosis, hypertension, leprosy, and venomous wounds in Asia, particularly in China. Although HJ has certain physiological activities, such as longitudinal bone growth, antioxidation and alleviation of rheumatism, its anticancer activities, other than in colorectal and ovarian cancer, are yet to be studied. In this study, we investigated the anti-cancer activity and mechanism of methanol extracts of HJ (MeHJ) against human FaDu hypopharyngeal squamous carcinoma cells. MeHJ suppressed FaDu cell viability without affecting normal cells (L929), which was demonstrated using the MTT and Live & Dead assays. Furthermore, MeHJ effectively inhibited colony formation of FaDu cells, even at non-cytotoxic concentrations, and significantly induced apoptosis through the proteolytic cleavage of caspase-9, -3, -7, poly (ADP-ribose) polymerase and through the downregulation of BCL-2 and upregulation of BAX in FaDu cells, as determined by DAPI staining, flow cytometry, and western blot analyses. Collectively, these findings suggest that the inhibitory effects of MeHJ on the growth and colony formation of oral cancer cells may be mediated by caspase- and mitochondrial-dependent apoptotic pathways in human FaDu hypopharyngeal squamous carcinoma cells. Therefore, MeHJ has the potential to be used as a natural chemotherapeutic drug against human oral cancer.
Jang, Ji Yun;Jung, Seo Yun;Park, Bo-Ram;Lee, Seul Ah;Kim, Chun Sung
International Journal of Oral Biology
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제47권3호
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pp.41-48
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2022
Ulva compressa Linnaeus (UCL) is a green algae seaweed that performs photosynthesis and is used as a food material in some Asian regions including Korea. It is known to be the dominant species in copper ion-contaminated seas, and many studies on copper ion resistant mechanisms have been reported. UCL is known to have an excellent antioxidant effect, but limited information is available regarding its other physiological activities. In this study, we investigated the anticancer activity of 30% prethanol extracts of Ulva compressa Linnaeus (30% PeUCL) and the underlying mechanisms of its activity on human FaDu hypopharyngeal squamous carcinoma cells. The 30% PeUCL extracts suppressed FaDu cell viability without affecting normal cells (L929), as determined by MTT and viability assays. Furthermore, the 30% PeUCL extracts induced apoptosis, as determined by DAPI staining. The 30% PeUCL extracts inhibited colony formation effectively as well as wound-healing of FaDu cells, even at noncytotoxic concentrations. In addition, 30% PeUCL extracts induced apoptosis significantly through proteolytic cleavage of caspase-3, -7, and -9, and poly (ADP-ribose) polymerase, and by downregulation of Bcl-2 and upregulation of Bax in FaDu cells, as determined by Western blot analysis. Collectively, these results suggest that the inhibitory effect of 30% PeUCL extracts on the growth of oral cancer cells, colony formation and wound-healing may be mediated by caspase- and mitochondrial-dependent apoptotic pathways in human FaDu hypopharyngeal squamous carcinoma cells. Therefore, 30% PeUCL extracts can be administered as a natural chemotherapeutic drug for the treatment of human oral cancers.
Purpose: To investigate the radiosensitivity of the normal human oral keratinocytes (NHOK), and the effect of irradiation on cell cycle and protein expression. Materials and Methods: To evaluate the radiosensitivity of NHOK, the number of colonies and cells were counted after irradiation and the SF2 (survival fraction at 2Gy) value, and the cell survival curve fitted on a linear-quadratic model were obtained. LDH analysis was carried out to evaluate the necrosis of NHOK at 1, 2, 3, and 4 days after 2, 10, and 20 Gy irradiation. Cell cycle arrest and the induction of apoptosis were analyzed using flow cytometry at 1, 2, 3, and 4 days after 2, 10, and 200y irradiation. Finally, proteins related cell cycle arrest and apoptosis were analysed by Western blot. Results: The number of survived cell was significantly decreased in a dose-dependent manner. The cell survival curve showed SF2, α, and β values to be 0.568, 0.209, and 0.020 respectively. At 200y irradiated cells showed higher optical density than the control group. After irradiation, apoptosis was not observed but G2 arrest was observed in the NHOK cells. 1 day after 10 Gy irradiation, the expression of p53 remained unchanged, the p2l/sup WAF1/Cipl/ increased and the mdm2 decreased. The expression of bax, bcl-2, cyclin B1, and cyclin D remained unchanged. Conclusion: These results indicate that NHOK responds to irradiation by G2 arrest, which is possibly mediated by the expression of p21/sup WAFl/Cipl/, and that cell necrosis occurs by high dose irradiation.
본 연구에서는 홍차버섯이라고 알려진 콤부차(Kombucha, K)에 플라보노이드 성분 및 각종 기능성 물질이 풍부한 감귤액을 첨가하여 감귤의 생리활성 물질들이 콤부차로 이행되는 효과를 기대하여 감귤 콤부차(citrus Kombucha, CK)를 배양한 후 항산화 능력 및 인체 방광암세포(T-24와 5637)를 이용한 항암 효과를 확인하고 더 나아가 암의 증식을 억제시킬 수 있는 천연소재 탐색을 목적으로 연구를 진행하였다. 항산화 및 총페놀 함량 결과는 K보다 CK의 항산화 능력과 페놀 함량이 높게 확인되었으며 방광암세포 T-24와 5637에 K 혹은 CK를 24시간 처리한 후 MTT assay를 통해 세포독성을 확인한 결과 농도 의존적으로 생존율이 감소하였다. 특히 T-24 세포에서는 CK를 처리하였을 때 현저한 세포의 형태적 변화를 확인하였다. Western immunoblot을 통해 apoptosis 관련 단백질들의 발현을 확인하였는데 T-24에 CK 처리하였을 때 Bcl-2의 발현은 크게 감소하였으며, pro-caspase-9, pro-caspase-8, pro-caspase-3는 농도가 높아질수록 감소하였으며, cleaved caspase-9, cleaved caspase-8, cleaved caspase-3는 농도가 높아질수록 증가하는 경향을 보였다. 또한, cleaved PARP가 증가함을 확인할 수 있었다. 이상의 결과에서 일반 콤부차보다 감귤액을 첨가한 감귤 콤부차가 인체 방광암세포 T-24에 caspase에 의한 apoptosis가 유도됐음을 확인할 수 있었다.
생약복합물인 SH21B는 황금(Scutellaria baicalensis Georgi), 행인(Prunus armeniaca Maxim), 마황(Ephedra sinica Stapf), 석창포(Acorus gramineus Soland), 포황(Typha orientalis Presl), 원지(Polygala tenuifolia Willd), 하엽(Nelumbo nucifera Gaertner)의 혼합(비율 3:3:3:3:3:2:2)으로 이루어졌다. SH21B는 예로부터 한의학에서 비만의 치료에 사용되어 왔으나 자세한 분자적 메커니즘과 효능에 대한 연구는 이루어지지 않았다. 본 연구진은 선행연구를 통해 SH21B가 지방세포의 분화에서 adipogenesis (지방세포형성)와 관련된 유전자를 조절하여 중성지방의 축적을 억제함을 밝혔다. 본 연구에서는, microarray 기술을 이용하여 adipogenesis의 in vitro 모델인, 3T3-L1 세포에서 SH21B에 의한 지방세포형성 억제의 분자적 기작을 보다 상세하게 연구하고자 하였다. 전지방세포, 분화된 세포 그리고 SH21B에 의해 분화가 억제된 세포의 각각의 유전자 발현을 분석하기 위해 각 시료들에서 total RNA를 분리하여 cDNA를 합성한 후 microarray에 적용시켰다. 그 결과, 각각의 시료들의 비교에서 2배 이상의 유의한 발현 변화를 가지는 2,568개의 유전자를 확보하였다. 이 유전자들에 대해 Hierarchical clustering과 K-means clustering 분석을 진행하였고 서로 다른 양상을 가지는 9개의 군집(cluster)들을 분류하였다. 그 중, SH21B의 첨가에 의해 뚜렷하게 감소(cluster 4, cluster 6 및 cluster 9)하거나 반대로 뚜렷하게 증가(cluster 7와 cluster 8)하는 양상을 보이는 군집들을 따로 선별하여 그 군집들에 포함되어 있는 유전자들을 분석하였다. 선택 된 5개의 군집에는 지방세포형성과 세포증식에 관련된 유전자가 다수 포함되어 있었다. Cluster 4, cluster 6 그리고 cluster 9에는 peroxisome proliferator activated receptor gamma $\gamma$ ($PPAR{\gamma}$), CCAAT/enhancer binding protein $\alpha$ (C/$EBP{\alpha}$), sterol regulatory element binding transcription factor 1 (SREBF1), adiponectin (ADIPOQ), fatty acid synthase (FASN), lipoprotein lipase (LPL) 등의 지방세포형성 유도 및 관련 인자와 B-cell leukemia/lymphoma6 (BCL6), retinoblastoma 1 (RB1), cyclin-dependent kinase inhibitor 2C (CDKN2c), ras homolog gene family, member B (RHOB) 등의 많은 세포증식 억제 유전자가 포함되었다. 이와는 반대로, cluster 7과 cluster 8에는 $\beta$-catenin, cyclin D1 (CCND1), WNT1 inducible signaling pathway protein 2 (WISP2) 등과 같은 지방 세포형성 억제 조절자와 MARCKS-like1 (MARCKSL1), colony stimulating factor 1 (CSF1), discoidin domain receptor family, member 2 (DDR2), leukemia inhibitory factor receptor (LIFR) 등의 세포증식을 유도하는 조절자가 다수 포함되었다. 결론적으로, 이러한 결과들은 SH21B가 지방세포형성과 관련된 조절자 및 세포증식과 관련 된 조절자들의 유전자 발현을 조절하여 지방세포형성을 억제함을 제시한다.
Machaerium cuspidatum은 Fabaceae과 legume속에 속하는 캐노피 덩굴식물(canopy liana)로, 열대 우림 지역에 분포하는 식물이다. 본 연구에서는 Machaerium cuspidatum 메탄올 추출물(MEMC)의 항산화능을 확인하고, 항암 활성 및 그 기전을 인체 폐암세포 A549, 인체간암세포 HepG2를 사용하여 분석하였다. 먼저 DPPH를 이용하여 MEMC의 radical 소거능을 분석한 결과, 소거능 50%의 MEMC 농도($IC_{50}$)는 $1.66{\mu}g/ml$l이었으며, MEMC가 추출물인 것을 감안할 때 효과적인 항산화능을 보유하고 있음을 알 수 있었다. 또한 MEMC는 A549, HepG2 및 HT29에 대해 농도의존적으로 세포 사멸 효과를 보였으며, 세포 형태 변화를 유도하였다. A549와 HepG2를 사용하여 세포주기를 분석한 결과, MEMC 처리 농도가 증가할수록 apoptotic 세포를 의미하는 subG1기의 세포가 증가하였다. 따라서 MEMC에 의한 A549 및 HepG2의 apoptosis 유도를 Annexin V/7AAD 염색으로 확인한 결과, A549 및 HepG2에서 MEMC 농도의존적으로 Annexin V 양성 세포의 비율이 증가하였으며, DAPI 염색결과 MEMC 농도의존적으로 A549와 HepG2의 apoptotic body가 증가하였다. 특히 MEMC에 의한 apoptosis는 p53과 Bax의 발현증가 및 Bcl-2의 발현감소와 연관되어 있으며, caspase-3, -8, -9의 활성화와 poly ADP ribose polymerase (PARP)의 단편화를 일으키는 것을 확인하였다. 이러한 결과들로부터 MEMC는 외인성 및 내인성 경로를 통한 apoptosis 유도에 의해 A549와 HepG2의 증식을 억제시키는 것으로 사료된다.
탄화수소가스를 고온$(1000^{\circ}C)$에서 열분해 하여 고상화하는 기상 열분해법을 사용하여 저결정질 탄소재를 제조하고 같은 방법으로 붕소를 첨가한 저결정질 탄소재$C_{l-x}B_x(x=0.05,\;0.10,\;0.20)$를 제조하여, 리튬 이온 이차전지의 부극으로서의 전기화학적 특성을 조사하였다. 시료 대 PVDF를 95:5의 무게비로 첨가한 경우, 붕소를 첨가하지 않은 저 결정질 탄소재(x=0.00)는 초기 방전용량 374mAh/g을 나타내었으며, 제 2싸이클부터는 싸이클 성능이 비교적 우수하여 제 10싸이클에서 258mAh/g의 방전용량을 나타내었다. 시료 대 PVDF를 95:5의 무게비로 첨가한 경우, $C_{1-x}B_x(x=0.00,\;0.05,\;0.10\;0.20)$ 시료들 중에서 x=0.05 조성의 시료는 가장 큰 초기 방전용량 860mAh/g을 나타내었으며, 10번째 싸이클에서 181mAh/g의 방전용량을 나타내었다. 제 2싸이클부터 싸이클 성능은 모두가 비슷하게 나타났다 초기방전 용량(PVDF $10wt.\%$ 사용시, 853mAh/g), 싸이클 성능, 방전용량(PVDF $10wt.\%$사용시 10번째 싸이클에서 400mAh/g)면에서 $C_{0.90}B_{0.10}$ 시료가 리튬이온 이차전지의 부극으로서의 가장 우수한 전기화학적 특성을 나타내었다. 합성한 탄소에 NMP를 용매로 한 액상 혼합 바인더(PVDF)를 90:10의 무게비로 첨가한 경우가 95:5의 무게비로 첨가한 경우보다 대체로 모든 조성에서 충$\cdot$방전용량이 크게 나타났다. 붕소가 첨가되어 덜 disordered된 구조가 됨으로써 1.25V보다 낮은 전압 부분에서 평탄구역이 증가하는 것으로 판단된다. 붕소가 첨가된 경우 충$\cdot$방전용량이 제 2싸이클에서부터 급격히 감소하였는데, 이는 첨가된 붕소가 제 1싸이클에서 삽입되는 Li과 일부는 강하게 결합하여 추출이 안되고 일부만이 다시 가역적으로 추출$\cdot$삽입되기 때문으로 생각된다. 붕소 첨가에 의한 충$\cdot$방전용량의 증가는, 붕소가 electron acceptor로 작용하여 삽입된 Li와 붕소-탄소 host 사이의 결합 강도를 증가시킴으로써 붕소치환 된 탄소에서 Li의 전위를 상승시키기 때문에 일어난다고 사려된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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