• Food Science and Biotechnology
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• 제16권6호
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• pp.902-909
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• 2007

Granular maize starch was treated with Thermus scotoductus 4-${\alpha}$-glucanotransferase (${\alpha}$-GTase), and its physicochemical properties were determined. The gelatinization and pasting temperatures of ${\alpha}$-GTase-modified starch were decreased by higher enzyme concentrations. ${\alpha}$-GTase treatment lowered the peak, setback, and [mal viscosity of the starch. At a higher level of enzyme treatment, the melting peak of the amylose-lipid complex was undetectable on the DSC thermogram. Also, ${\alpha}$-GTase-modified starch showed a slower retrogradation rate. The enzyme treatment changed the dynamic rheological properties of the starch, leading to decreases in its elastic (G') and viscous (G") moduli. ${\alpha}$-GTase-modified starch showed more liquid-like characteristics, whereas normal maize starch was more elastic and solid-like. Gel permeation chromatography of modified starch showed that amylose was degraded, and a low molecular-weight fraction with $M_w$ of $1.1{\times}10^5$ was produced. Branch chain-length (BCL) distribution of modified starch showed increases in BCL (DP>20), which could result from the glucans degraded from amylose molecules transferred to the branch chains of amylopectin by inter-/intra-molecular transglycosylation of ${\alpha}$-GTase. These new physicochemical functionalities of the modified starch produced by ${\alpha}$-GTase treatment are applicable to starch-based products in various industries.

• Clinical and Experimental Pediatrics
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• 제52권11호
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• pp.1260-1266
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• 2009

목 적 : 특발성 신증후군은 소아의 가장 흔한 일차성 사구체 질환 중의 하나이다. 신증후군은 초기 경구 스테로이드 치료에 대한 반응에 따라서 임상적으로 스테로이드 반응성 신증후군과 스테로이드 저항성 신증후군으로 분류될 수 있다. 그러나 현재까지 신증후군에서 스테로이드의 정확한 작용 기전은 알려져 있지 않다. 신증후군 환자를 대상으로 여러 가지 유전자 다형성을 분석함으로써 스테로이드 치료에 대한 반응의 차이를 설명하려는 여러 시도들이 있어왔다. 방 법 : 본 연구에서는 190명의 신증후군 환자를 대상으로 NR3C1 유전자 다형성(ER22/23EK, N363S, BclI)을 확인하여 유전형과 임상-병리 양상의 연관성에 대해서 분석하였다. 결 과 : 신증후군 환자의 평균 연령은 4.95세였고 남아가 134명이었다. 11명의 환자는 신증후군의 가족력이 있었다. 그러나 이 환자들을 대상으로 NPHS2, WT1, ACTN4, TRPC6 유전자 분석을 시행한 결과 이상 소견은 발견되지 않았다. 80명의 환자(42.1%)는 초기 스테로이드 저항성이었고 그 중 31명의 환자는 말기 신질환으로 진행하였다. 신장 조직 검사는 113명의 환자를 대상으로 시행되었고 그 중 36명의 환자(31.9%)는 미세변화 신증후군이었고 77명의 환자(68.1%)는 초점성 분절성 사구체 경화증이었다. BclI 유전형을 비교하였을 때 G allele 빈도는 환자군과 대조군에서 차이가 없었다. ER22/23EK과 N363S 유전형은 각각 ER/ER과 NN으로 환자군과 대조군에서 동일한 양상을 보였다. BclI 유전형은 신증후군의 발병 나이, 초기 스테로이드 반응 여부, 신장의 병리학적 소견, 말기 신질환으로의 진행여부와 연관성을 보이지 않았다. 결 론 : 한국 신증후군 환아를 대상으로 한 이 연구 결과는 NR3C1 유전자의 ER22/23EK, N363S 및 BclI 유전자 다형성이 신증후군의 발병, 초기 스테로이드 치료에 대한 반응, 신장의 조직학적 소견 및 신 기능의 저하에 영향을 미치지 않음을 보여준다.

• 대한한의학회지
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• 제25권2호
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• pp.67-76
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• 2004

Objectives : This study was designed to investigate the protective mechanisms of Palmul-tang on hypoxia-induced cytotoxicity in H9c2 cardiomyoblast cells. Methods : In this study, we used H9c2 cells. Cells were subjected to hypoxia in the absence and presence of $1000\mu\textrm{g}/ml$ Palmul-tang for 24 hrs. Cells were treated with various concentrations of Palmul-tang for 24 hrs. Cell viability was measured by MTT assay. Hypoxia markedly decreased the viability of H9c2 cells, which was characterized with apparent apoptotic features such as chromatin condensation as well as fragmentation of genomic DNA and nuclei. Results : Palmul-tang significantly reduced hypoxia-induced cell death and apoptotic characteristics. Also, Palmul-tang prevented mitochondrial dysfunction including the disruption of mitochondrial membrane permeability transition (MPT) and an increase in expression of apoptogenic Bcl-2 proteins in hypoxia-H9c2 cells. Conclusions; This study suggests that the protective effects of Palmul-tang against hypoxic damages may be mediated by the modulation of Bcl-2, Bax expression.

• Food Science and Biotechnology
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• 제18권2호
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• pp.552-555
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• 2009

This study investigated the proapoptotic effect of ethanol extracts obtained from dandelion (Taraxacum officinale) flower on human ovarian cancer SK-OV-3 cells. Cells were treated with dandelion flowers ethanol extract (DFE) ranging from 1.5625 to $100{\mu}g/mL$ for 24 hr. Significant antiproliferative effects of DFE were first observed from at $6.25{\mu}g/mL$ (p<0.05), and this inhibition showed in a dose-dependent manner. When cells were treated with more than $6.25{\mu}g/mL$ DFE, cell-cycle analysis showed that DFE caused an increase in the percentage of sub-G0/G1 cells and arrested at the S and G2/M phase in a dose-dependent manner. Moreover, apoptosis induction by DFE involved p53 activation and bax upregulation as well as downregulation of bcl-2. Our findings indicate that DFE resulted in apoptotic cell death, suggesting that DFE possesses potential anticancer properties.

• Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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• 제17권2호
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• pp.703-712
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• 2016

Monoclonal antibodies with specific antigens have been widely used as targeted therapy for cancer. Hep88 mAb is a monoclonal antibody which shows specific binding with anti-cancer effects against the HepG2 cell line. However, its mechanisms of action are still not completely understood. We examined cell cycling and apoptosis by flow cytometry and mRNA expression of factors involved in apoptosis and paraptosis in Hep88 mAb-treated HepG2 cells by real-time PCR. The cell-cycle analysis demonstrated that growth-inhibitory activity was associated with G2/M cell cycle arrest. Hep88 mAb induced a significant increase in apoptotic cell populations in a dose- and time-dependent manner. The mRNA expression results also suggested that the process triggered by Hep88 mAb involved up-regulation of tumor suppressor p53, pro-apoptotic Bax, Cathepsin B, Caspase-3 and Caspase-9, with a decrease of anti-apoptotic Bcl-2 - thus confirming paraptosis and apoptosis programmed cell death. These findings represent new insights into the molecular mechanisms underlying the anti-cancer properties of Hep88 mAb in liver cancer cells.

• 생명과학회지
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• 제17권6호통권86호
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• pp.766-771
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• 2007

B형 간염 바이러스(HBV)와 C형 간염 바이러스(HCV)에 함께 감염되면 단독 감염의 경우보다 더 심각한 간질환이 유발되고 간암으로의 발전 가능성도 높아진다. 본 연구에서는 HBV의 X단백질(HBx)과 HCV의 코어 단백질이 인간 간암세포주인 HepG2세포에서 p53의 양을 협조적으로 증가시킨다는 것을 보여 주었다. 이로 인하여 세포예정사를 촉진하는 Bax 단백질의 발현이 더 증가하는 반면에 세포예정사를 억제하는 Bcl2의 발현은 더 억제됨이 관찰되었다. 그러나 이러한 효과들은 p53-음성인 Hep3B 세포에서는 관찰되지 않았다. 나아가 HBx와 코어 단백질은 HepG2의 cisplatin-매개성 세포예정사를 협조적으로 증가시키는 반면에 Hep3B에서는 이러한 효과가 나타나지 않았다. 이러한 연구 결과들은 HBV와 HCV가 동시에 감염되었을 경우에 나타나는 임상적인 소견을 이해하고 세포예정사에 미치는 HBx와 코어 단백질의 영향에 대한 기존의 상충적인 연구결과들을 해석하는데 도움을 줄 수 있다.

• 한국수정란이식학회지
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• 제33권3호
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• pp.119-127
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• 2018

The purpose of this study is to examined the electrofusion and activation conditions for the production of porcine somatic cell nuclear transfer (SCNT) embryos. In this study, immature oocytes were cultured in TCM-199 with and without hormones for 22 hours. Skin fibroblasts cells of porcine were transferred into the perivitelline space of enucleated in vitro matured oocytes. Cell fusion was performed with two different pulses that each one pulse (DC) of 1.1 kV/cm or 1.5 kV/cm for $30{\mu}sec$. After fusion subsequent activation were divided into three groups; non-treatment (control) and treatment with 2 mM 6-DMAP or $7.5{\mu}g/ml$ cytochalasin B for 4 hours. Transferred embryos were cultured in PZM-3 (Porcine Zygote Medium-3) in $5%\;CO_2$ and 95% air at $39^{\circ}C$ for 7 day. Apoptosis-related genes (Caspase-3, BCL-2, mTOR, and MMP-2) were analyzed by immunofluorescence staining. There was no significant difference between two different electrofusion stimuli in the cleavage rate; $64.9{\pm}4.8%$ in 1.1 kV/cm and $62.7{\pm}4.0%$ in 1.5 kV/cm. However, blastocyst formation rate (%) was significantly different among three different activation groups (no treatment, 2 mM 6-DMAP or $7.5{\mu}g/ml$ cytochalasin B) combined with electrofusion of 1.1 kV/cm. The blastocyst formation rate was $12.6{\pm}2.5$, $20.0{\pm}5.0$, and $34.9{\pm}4.3%$ in control, 2 mM 6-DMAP, and $7.5{\mu}g/ml$ cytochalasin B, respectively. Immunofluorescence data showed that expression levels of caspase-3 in SCNT embryos undeveloped to blastocyst stage were higher than those in the blastocyst stage embryos. Expression levels of Bcl-2 in blastocyst stage embryos were higher than those in the arrested SCNT embryos. These results showed that the combination of an electric pulse (1.1 kV/cm for $30{\mu}sec$) and $7.5{\mu}g/ml$ cytochalasin B treatment was effective for production of the porcine SCNT embryos.

• 대한한방내과학회지
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• 제27권2호
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• pp.429-443
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• 2006

Objectives : The Purpose of this study was to identify anti-tumor effects of Curcuma longa L. on some kinds of cancer cells through molecular biologic methods. Materials & Methods : We used 4 kinds of cancer cell lines such as glioma cells(A172), cervical cancer cells(HeLa), Prostate cancer cells(PC3), lung cancer cells(A549). We injected the boiled extract of Curcuma longa L. $5{\mu}g,\;10{\mu}g$ to culture media(ml) for 24 hours. We measured the cytotoxic effect on 4 kinds of cancer cells through trypan blue exclusion test and the suppressive effect on viability of 4 kinds of cancer cells via MTT assay. We measured the change of mitochondria membrane potential via flow cytometry. The quantitative RT-PCR was used to examine the effect on the revelation of Bcl-2 and Bax which genes are related to apoptosis. We examined the effect on the revelation of Bcl-2 protein and Bax protein by western blot analysis. Results: 1. Extract of Curcuma longa L. showed significant cytotoxic effect on A172, HeLa, PC3 compared to the control group with density dependent manner. 2. Extract of Curcuma longs L. showed significant suppressive effect on viability of A172, HeLa, PC3 compared to the control group with density dependent manner. 3. Curcuma longs L. induced apoptosis by decreasing the membrane potential of mitochondria in A172, HeLa, PC3. 4. In the test about the revelation of genes related to apoptosis, the revelation of Bcl-2 decreased and the revelation of Bax increased in A172. HeLa, PC3 treated with Curcuma longa L. with density dependent manner. 5. In the test about the revelation of protein related to apoptosis, the protein levels of Bcl-2 decreased and the protein levels of Bax increased in A172, HeLa, PC3 treated with Curcuma longa L. Conclusions: This experiment shewed that Curcuma longs L. has anti-tumor effect on glioma, cervical, Prostate cancer cells except on lung cancer. We hope that anti-tumor effects of Curcuma longa L. will be more Practically identified.

• 예술인문사회 융합 멀티미디어 논문지
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• 제7권1호
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• pp.395-405
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• 2017

와송 유래 에틸아세테이트(EtOAc) 분획물의 인체 폐암세포 A549에 대한 항암활성을 확인하기 위하여 본 연구를 수행하였다. 폐암 세포에 대한 세포 생존율을 측정하기 위하여 MTS assay를 수행한 결과, 농도 의존적으로 폐암세포 성장 억제효과를 보였다. 세포사멸 유도능을 확인하기 위하여 DAPI 핵염색을 통한 직접 육안관찰을 수행한 결과, EtOAc 분획물을 처리한 군에서 핵내 염색질 응축등의 세포사멸 지표가 관찰되었고, Annexin V-FITC를 이용하여 세포막에 노출된 phosphatidylinositol (PS)를 검출한 결과, 농도 의존적으로 초기 세포사멸 및 후기 세포사멸이 증가하였다. 세포사멸의 또다른 지표인 세포주기 억제능을 확인하기 위하여 G2/M기 관련 유전자인 CDK1, 4, cyclin B1, D1의 mRNA 발현정도를 RT-PCR을 이용하여 확인한 결과, 농도의존적으로 mRNA의 발현량이 현저히 감소하였으며, 세포사멸의 직접적 신호전달 표적 단백질인 p53, Bax, Bcl-2 및 pro-caspase-3등의 발현정도를 확인한 결과, p53과 Bax 단백질의 발현은 농도의존적으로 증가하였고, Bcl-2와 pro-caspase-3 단백질의 발현은 시간 및 농도의존적으로 감소하였다.

• 생명과학회지
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• 제21권12호
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• pp.1678-1688
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• 2011

다양한 식용식물에 함유되어 있는 것으로 알려진 phenolic acids의 일종인 p-coumaric acid의 항암활성을 규명하고자, 인체 급성백혈병 T 세포주인 Jurkat T 세포에 대한 p-coumaric acid의 에폽토시스 유도기전을 조사하였다. Jurkat T 세포를 p-coumaric acid (50-$150{\mu}M$)로 처리한 결과, 세포독성, 에폽토시스-관련 DNA fragmentation, 및 pro-apoptotic multidomain Bcl-2 family member인 Bak의 활성화, ${\Delta}{\psi}m$ loss, caspase-9, -3, -7, 및 -8의 활성화, 그리고 PARP 분해 등의 여러 에폽토시스-관련 생화학적 현상들이 농도의존적으로 나타났다. 그러나 이러한 에폽토시스-관련 생화학적 현상들은 Jurkat T 세포에 anti-apoptotic Bcl-2 단백질을 과발현할 경우에는 나타나지 않았다. 또한 p-coumaric acid처리에 의해 유도되는 Jurkat T 세포의 에폽토시스에는 necrosis가 수반되지 않는 것으로 확인되었다. Jurkat T 세포를 pan-caspase inhibitor인 z-VAD-fmk를 전처리할 경우, p-coumaric acid 처리에 의해 유도되는 apoptotic sub-$G_1$ peak는 차단되어 나타나지 않았으나 ${\Delta}{\psi}m$ loss는 여전히 나타났는데, 이는 p-coumaric acid처리에 의한 에폽토시스의 유도에 caspase cascade 활성화가 필수적이며 ${\Delta}{\psi}m$ loss의 downstream 현상임을 나타낸다. 한편, FADD 및 caspase-8을 함께 발현하는 Jurkat T 세포주 A3, FADD-결손 Jurkat T 세포주 I2.1, 그리고 caspase-8-결손 Jurkat T 세포주 I9.2의 p-coumaric acid의 세포독성에 대한 감수성은 서로 유사하게 나타났는데, 이는 p-coumaric acid처리에 의한 에폽토시스의 유도가 Fas와 FasL간의 상호작용에 의해 개시되지 않음을 시사한다. p-Coumaric acid의 세포독성은 Jurkat T 세포에 비해 인체 정상 말초혈액 T 세포에서 훨씬 낮게 나타났다. 이러한 결과들은 p-coumaric acid 처리에 의해 유도되는 Jurkat T 세포의 에폽토시스가 Bak 활성화, ${\Delta}{\psi}m$ loss, caspase-9, -3, -7, 및 -8로 이루어진 caspase cascade의 활성화, 그리고 PARP 분해에 의해 유도되며, 또한 anti-apoptotic 단백질인 Bcl-2의 과발현에 의해서 음성적으로 조절됨을 나타낸다.