The carbon utilizations of Bacillus species and Pythium species were investigated by using a Biolog$^{(R)}$ microplate assay to determine if there are differences in the carbon utilizations of selected strains of these species. It may be possible to afford a competitive advantage to bacterial biological control agents by providing them with a substrate that they can readily use as a carbon source, for example, in a seed coating formulation. Microplates, identified as SFP, SFN and YT were used to identify spore-forming bacteria, nonspore-forming bacteria, and yeast, respectively. Bacterial and mycelial suspensions were adjusted to turbidities of 0.10 to 0.11 at 600 nm. One hundred microliters of each of the bacterial and mycelial suspension were inoculated into each well of each of the three types of microplates. L-arabinose, D-galactose, D-melezitose and D-melibiose of the 147 carbohydrates tested were found to be utilized only by bacteria, and not by Pythium species, by Biolog$^{(R)}$ microplate assay, and this was confirmed by traditional shake flask culture. Thus, it indicated that the Biolog$^{(R)}$ microplate assay could be readily used to search for specific carbon sources that could be utilized to increase the abilities of bacterial biological control agents to adapt to contrived environments.
Lee Geon-Hyoung;Bae Myoung-Sook;Park Suhk-Hwan;Song Hong-Gyu;Ahn Tae-Seok
Korean Journal of Microbiology
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v.40
no.3
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pp.248-253
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2004
To scrutinize the physiological diversity by BIOLOG microplate, the carbon source utilization patterns of 168 strains of oligotrophic bacteria and 132 strains of psychrotrophic bacteria isolated from Lake Baikal during 2000 and 2002 were investigated. Eighty-six percent (56 strains) of oxidase test positive group (GN-NENT group) and 89 % (92 strains) of oxidase test negative group (GN-ENT group) among oligotrophic bacteria, and 82% (85 strains) of oxidase test negative group among psychrotrophic bacteria were able to utilize $\alpha$-D-glucose as a sole-carbon-source, and 93% (26 strains) of oxidase test positive group among psychrotrophic bacteria were able to utilize bromosuccinic acid as a sole-carbon-source. However, most strains except few oligotrophic bacteria with oxidase test negative group were not able to utilize $\alpha$-D-lactose as a sole-carbon-source. Most dominant genus among 300 strains was Pseudomonas (49 strains). Other dominant genera belonged to Salmonella, Serratia, Buttiauxella, Pantoea, Yersinia, Brevundimonas, Hydrogenophaga, Photorhabdus, Sphingomonas, and Xenorhabdus. Our results by BIOLOG identification system were able to provide basic data to determine community-level carbon source utilization patterns and to accomplish the efficient and reliable identification for microbial community structure in Lake Baikal.
To investigate soil bacterial diversity according to vegelalioo types, utilizing ability of sole carbon sources and restriction enzyme patterns of 16s rDNA were analyzed. From the both results; five kinds of soil microbial communities were grouped as forest soil (Quercus mongolica and Pinus densi&ra vegetation), grass-agricultured soil and microbial communities of naked soil. But, both soil microbial communities of directily exlracted from ths soil and indirectly extracted from heterotrophic bacteria that cultured soil in LB medium showed very different similarity.
This study was carried out utilzing ability of sole carbon sources in soil microbial communities used by Biolog GN microplate. Cluster analysis showed that soil microbial cornmuties were categorized into three groups as forest, non-forest soil and naked soil of microbial group. Soil microbial commutites in a forest soil of Qirercus mongoIica was divided into another group microbial communites in Qirercus dendata vegetation soil and Pinus dnzsqlora vegetation soil by Multidimensional scaling(MDS). Generally, sole carbon utilzing abilties were higher in order of polymer, amino acids and carboxylic acids, but it was lower in amides substrates carbon group. From the result: it was supposed that metabolic diversity of microbial communities was corresponded to vegetation succession.
Reactions of Pseudomonas syringae pv. actinidiae to 95 carbon sources in a 96-well microplate (BiOLOG GN MicroPlateTM) were investigated. The bacterium used 9 carbon sources such as D-mannitol, sucrose, etc., but did not use 62 carbon sources such as $\alpha$-cyclodextrin, dextrin, etc. Based on the reactions, a user data base for identification of P. syringae pv. actinidiae was constructed in Biolog program (BiOLOG MicroLogTM 2 system). P. syringae pv. actinidiae isolates collected from kiwifruits could be identified automatically with high similarity using the user data base, which could diagnose rapidly and easily whether the tree was infected with bacterial canker or not.
Lee, Jung Sook;Chun, Chang Ouk;Kim, Sam Bong;Park, Bong Keun;Lee, Hun Joo;Ahn, Jong Seog;Mheen, Tae Ick
Journal of Microbiology
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v.35
no.1
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pp.10-14
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1997
The database of metabolic fingerprints generated using the GIolog system of lactic acid bacteria isolated from kimchi, described by Lee et al. (8), was used for the identification of 75 Leuconostoc isolates. The test strains were isoalted using a selective isolation medium specific for the genus Leuconostoc and examined for their ability to oxidize carbon sources using the Biolog system. The results show that the 75 test strains were identified to the known Leuconostoce clusters. It is suggested that the Biolog system can be applied for rapid identification of lactic acid bacteria isolated from kimchi.
LEE, JUNG-SOOK;CHANG OUK CHUN;MIN-CHUL JUNG;WOO-SIK KIM;HONG-JOONG KIM;MARTIN HECTOR;SAM-BONG KIM;CHAN-SUN PARK
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.7
no.1
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pp.68-74
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1997
One hundred and eighty two lactic acid bacteria, isolated mainly from kimchi, including reference strains were examined for their ability to utilize 95 carbon sources. The test strains were assigned to 5 major, 1 minor and 12 single-membered clusters based on the $S_{SM}$, UPGMA algorithm (at similarity of $80{\%}$). These aggregate clusters were equivalent to the genus Leuconostoc (aggregate cluster M and N), the genus Lactobacillus (aggregate cluster Q and R), and the genera Lactobacillus and Leuconostoc (aggregate cluster O and P) according to the database of the Biolog system. This study demonstrates that rapid identification and classification of isolates originating from kimchi can be achieved on the basis of such carbon source utilization tests.
A causal agent of bacterial soft rot occurring in soybean sprout cultivation in Korea was isolated and identified, and its incidence in several sprout-soybean cultivars was examined. Infected soybean seeds became light brown and whitish, and could not germinate until 3 days after seeding, accompanying rotting of soybean seeds and sprouts. The causal organism isolated from the rotten seeds and sprouts was identified as Erwinia carotovora subsp. carotovora on the basis of its pathogenicity, morphological and physiological characteristics and the results of the Biolog GN microplate test program. The bacterial soft rot by E. c. subsp. carotovora was firstly described in soybean sprout in Korea, and we name it“the bacterial soft rot of soybean sprout”. The disease occurred more frequently in Nam-hae and Fu-reun sprout-soybean cultivars than in Eun-ha, So-baek, and Ik-san cultivars.
Singh, Rashmi R.;Tipre, Devayani R.;Dave, Shailesh R.
Advances in environmental research
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v.3
no.4
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pp.283-292
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2014
Iron precipitating organisms play a significant role in the formation of ferric hydroxide precipitate, which acts as strong adsorbent for toxic metal. In this respect four different iron precipitating cultures were isolated from Hutti gold mine surface winze water sample on citrate agar medium. The best isolate was screened out for metal removal study on the basis of fast visual iron precipitation. The selected isolate was identified as Enterobacter sp. based on routine biochemical tests and Biolog GN microplate results and as Enterobacter cloacae subsp. dissolvens by 16S rRNA gene sequence analysis (GenBank accession number EU429448). Influence of medium composition, medium initial pH, the influence of inoculum size, effect of various media and ferric ammonium citrate concentration were studied on metal removal in shake flask experiments. Under the optimized conditions studied, E. cloacae showed $94{\pm}2$, $95{\pm}2$ and $70{\pm}2%$ of cadmium, copper and mercury removal from a simulated waste in shake flask studies. In lab scale column reactor more than 85% of copper and mercury removal was achieved.
Forth microbial isolates out of 167 isolates from the soil of controlled cultivation areas inhibited mycelial growth of Rhizoctonia solani AG2-1 causing the strawberry bud rot in vitro. Among the isolates, Kr013 and Kr020 showed suppressive effect to R. solani AG2-1 on seedlings of chinese cabbage treated by root immersion, charcoal carrier granule and drenching on 1.0% infested soil in pot. Furthemore, the corresponding effect was also revealed when the charcoal carrier granule of the isolates were treated on the seedling of strawberry that were planted on the planting hole in pot. To examine the effects of biological control in green house, it had been tested the infection rates by using two different treatments. First, the strawberry runner were planted on the nursery soil mixed with 20% charcoal carrier granule of Kr013 and Kr020 isolate respectively, and grown for 20 days before transplanting. Then the young plants form the mother plant were separated and transplanted on the 1.0% infested soil. Another method was that the charcoal carrier of Kr013 and Kr020 isolates applied to planting hole of 1.0% infested soil just before transplanting. Then the young plants were grown for 20 days on the sterilized nursery soil before transplanting. From the results, the effects of biological control was significantly higher on former treatment (e.g. the infection rates were 7.3 and 5.7%, respectively) than on the latter treatment (e.g. the corresponding value were 16.7 and 15.7%, respectively). The antagonistic isolates of Kr013 and Kr020 were respectively identified as Pseudomonas cepacia with the similarity of 55.0% and 60.0% by using the Biolog GN Microplate system.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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