Baculovirus Hyphantrin. cunea nuclear polyhedrosis virus (HcNPV) insecticide containing the insecticidal protein (ICP) gene from Bacillus thuringiensis subsp. kurstaki HD1 was constructed using a lacZ-HcNPV system. The ICP ($\delta$-endotoxin) gene was placed under the control of the polyhedrin gene promoter of the HcNPV. A polyhedrin-negative virus was derived and named ICP-HcNPV insecticide. Then, the insertion of the ICP gene in the ICP-HcNPV genome was confirmed by Southern hybridization analysis. Polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE) analysis of the Spodoptera frugiperda cell extracts infected with the ICP-HcNPV showed that the ICP was expressed in the insect cells as 130 kDa at 5 days post-infection. The ICP produced in the cells was present in aggregates. When extracts from the cells infected with the ICP-HcNPV were fed to 20 Bombyx mori larvae, the following mortality rate was seen; 8 larvae at 1 h, 10 larvae at 3 h, and 20 larvae at 12 h. These data indicate that the B. thuringiensis ICP gene was expressed by the baculovirus insecticide in insect cells and there was a high insecticidal activity. The biological activities of the recombinant virus ICP-HcNPV were assessed in conventional bioassay tests by feeding virus particles and ICP to the insect larvae. The initial baculovirus insecticide ICP-HcNPV was developed in our laboratory and the significance of the genetically engineered virus insecticides is discussed.
The World Commission on Dams (WCD) in November 2000 published "Dams and Development" as its only and final report. The report proposed "internationally acceptable criteria and standards" Despite the (act that the WCD itself did not regard the report as a blue print, many NGO's strongly support the report and the guidelines, and demand that they be adopted in their current form by funding organizations. The WCD recommendations and guidelines were found to have several "generic" problems, and the proposed guidelines appear unable to be applied as they stand. The authors assume that only several of these guidelines are operational and many of these are either too experimental or theoretical to be put into use. Furthermore, some seemingly "ready for operation" guidelines still need to be enhanced to be really operational in the real world. About 2,000 large dams were constructed in Japan after the Second World War. Various principles and mechanisms were then developed to better address the issues related to involuntary resettlement. The knowledge accumulated through large dam construction projects in Japan may be applied to other countries. The aim of this paper is to identify the lessons, out of the experiences gained in Japan through large dam construction projects in the past, which could be applicable for future large dam construction projects in other nations. The socio-economic settings as well as legal frameworks in Japan may differ other nation. Nevertheless, the following aspects of the experiences gained in Japan are found to be both applicable and useful for future large dam construction projects abroad: (a) Integrity of community in the negotiation process, (b) Provision of alternative occupations, (c) Funding mechanism in the post-project period, (d) Measures needed during planning process, and (e) Making resettlers "shareholders". These lessons may prove useful to enhance the WCD guidelines.
토양전염 병원성 사상균인 Fusarium oxyporum, Rhizoctonica solani에 대하여 길항력을 갖는 균주 Bacillus subtilis를 근권 토양에서 분리하여 동정한 후 이들 균주의 사상균에 대한 길항력, 발아율 및 작물의 생육에 미치는 영향력을 검토하였다. 또한 이 균주의 chromosome에 Bacillus thuringiensis(BT) 독소유전자를 삽입하여 균주의 형질변환을 유도하였다. BT 독소 유전자는 southern blotting에 의하여 확인되었으나 이의 최종 생성물인 독소 단백질은 SDS-PAGE에 확인되지 않았다. 이들 형질변환된 균주의 생리 및 생화학적 특성을 조사한 결과 모균주와 차이는 없었으며, BT 독소유전자가 삽입된 균주는 선충의 유충에 대한 생물학적 검정에서는 효과가 인정되지 않았으나 누에에 있어서는 1X 균체 희석액에서 10내지 20% 정도의 치사율이 관찰되었다. 모균주와 BT 독소유전자에 의하여 형질변환된 균주 모두 발아율 및 작물의 생육을 향상시켰다.
4231년 농림부산림국에서 송충구제책으로 경기도 임업시험장에서 인공배양한 No.7호균외 수종을 사용할 계획인바 비에 대한 임업시험장 시험보고에 의하면 핵균은 송충에 대하여 맹독성이지마는 잠아에 대하여서는 기독성이 경미하다는 보고 이였으므로 양잠가에 대한 의문을 풀기 위하여 송충 및 잠아에 대한 전염성의 강약을 비교 시험하여 그 독성정도를 구명코저 함. 1. 경기도 임업시험장 연구보고 제1호에 기재된 No.7 호균의 시험성적과 본시험성적과를 대조하면 그 이병률은 일정한 경향을 표시치 않으며 다소 상치된 결과이었다. 즉 별표에 의하면 송충은 72~100% 잠아에 있어서는 4289년도에 0~2% 4290년도이 0~20%였으나 본시험결과 (표 1,2,3)는 송충은 표준구에 6.6% 처리구에 13.3~20%이고 잠아는 5~50%의 이병률이였다. 따라서 송충에는 그 감염도가 높으며 잠아는 그 감염도자 낮다고하는 근거를 인정키 난하다. 2. 본시험에 공시된 접종균 No.7호균은 경기도 임업시험장에서 호칭하는 황황강균(Insarica farinosa)이 었으나 핵균 배양시에 이균이 침입된 관계인지는 모르나 본시험에서 폐사를 검정한 결과 백강균(Botrytis Bassiana)이였다. 따라서 No.7호균에 대한 순도가 의심되며 시험결과의 정확을 기할수가없었다. 3. 경기도 임업시험장연구보고 제1호에 접수된 양년간시검성적에 의하면 경화병균 28종중 가장 이병률이 낮다고하는 No.7호균이 본시험결과에서 잠아에 5~50%의 이병률을 나타내는것으로 보아 소위 경기도 임업시험장에서 순수분리한 균은 어느것이라도 송충에 접종하여 산지에 산포하면 그 균이 중간기생 (인교목, 직교목)을 통하여 야생화되어서 더욱 잠아에 대한 전염력을 강렬하게됨으로 양잠상 위험할것이다. 일본의 소산씨 문헌(경기도 임업시험장도서관)에 의하면 야생혼충에서 전염되는 경화병균의 독성은 잠아에 대하여 강력하다는 점과 $\ulcorner$잠업지조선$\lrcorner$제11호에 전라남도 원잠종제조소 강본태대랑씨의 시험성적(참고문헌)이 이를 여실히 입증하는 바이다. (중략)
Kamidi, Rahul;HaeYong, Kweon;Hun-bok, Kim;Ji Hae, Lee
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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제45권2호
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pp.99-107
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2022
Silkworm pupal extracts (SPE) were prepared in different solvents (water, 30%, 50%, 70%, and 100% ethanol) and their anti-inflammatory effects were evaluated in the RAW264.7 cell line. The SPE composition was initially evaluated by determining the protein content and performing Fourier transform infrared (FTIR) analysis. The protein content of the different SPE ranged from 6.75-130.93 mg/g of extract. FTIR analysis exhibited distinguishable absorption peaks among the extracts and indicated the presence of lipids, proteins, carbohydrates, and nucleic acid moieties. The levels of released nitric oxide (NO) and interleukin-6 (IL-6) expression in lipopolysaccharide (LPS)-induced RAW264.7 cells were only attenuated by 100% ethanolic SPE to 19.44% and 16.77%, respectively. The other solvent extracts were ineffective. Hence, further studies were conducted with 100% ethanolic SPE from three distinct stages of male and female silkworm pupae belonging to four silkworm varieties (Baegokjam; B, GoldenSilk; G, Juhwangjam; J, and YeonNokjam; Y). The best reduction in NO release and interleukin-1β (IL-1β) expression levels was achieved by the SPE of early female pupae belonging to the Baegokjam variety (32.72%) and those of early female pupae belonging to the Baegokjam and GoldenSilk (59.93%) varieties, respectively. The best reduction in IL-6 expression by 49.70% was achieved by SPE from female pupae of the mid-pupal stage belonging to the Baegokjam variety.
Merlita A. Dacayanan;Crestilyn N. Damasco;Jarson P. Libunao;Mario B. Sampaga;Edna A. Galano
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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제46권1호
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pp.1-8
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2023
Mulberry (Morus spp.) production is a vital activity in sericulture along with rearing of silkworms (Bombyx mori L.) for silk production. The Sericulture Research and Development Institute (SRDI) conducted a study that evaluated 11 mulberry varieties, including nine newly-evolved mulberry hybrids and two check varieties. These mulberry varieties were fed to silkworm hybrid, DMMMSU 115 x 100. The rearing performance of DMMMSU 115 x 100 was determined based on the silkworm economic traits such as weight of 10 matured larvae, cocoon weight, shell weight, shell percentage, cocoon yield, reelability percentage, filament length and filament size. Six silkworm rearing trials were conducted with 50 silkworm larvae per treatment in three replicates. The data were analyzed in a one-way Analysis of Variance. Significant differences were tested further using Tukey's Honest Significant Difference. Mulberry varieties that garnered an evaluation index value of higher than 50 were identified and selected. Results of the study revealed significant variations among the mulberry varieties based on the parameters gathered except on the reelability of cocoons, filament length and size. Matured silkworm larvae fed with Alf 55 were significantly heavier and higher cocoon yield compared to those fed with Alfonso and S54. Alf 32, Alf 55, Alf 58, Bat 37 and Bat 73 were identified as potential varieties and highly recommended as feed for the silkworm hybrid, DMMMSU 115 x DMMMSU 100.
상수리 잎을 먹고 자라는 야생견사곤충의 일종인 작잠의 저장단백질인 아릴포린 유전자의 cDNA를 클로닝하고 발육경과에 따른 유전자발현의 양상을 조사 검토하였다. 작잠의 아릴포린 유전자의 cDNA는 2,112 bp의 ORF(open reading frame)를 포함하여 2,234 bp임을 밝혔다. 작잠 아릴포린 유전자의 cDNA염기서열로부터 아미노산 서열을 검토한 결과 방향족 아미노산인 페닐알라닌(phenylalanine)과 티로신(tyrosine)의 성분이 높은 아미노산 서열구조를 보였으며 ORF로부터 계산한 단백질의 분자량은 83,439 Da 이었다.작잠 아릴포린 저장단백질의 아미노산서열을 다른 곤충의 서열과 그 상동성을 비교 분석한 결과 세크로피아잠(H. cecropia)과는 78%, 담배나방의 알파단량체(M. sexta-$\alpha$ subunit)와는 71%, 담배나방의 베타단량체(M. sexta $\beta$-subunit)와는 62% 그리고 가잠(B. mori)과는 64%의 아미노산서열 상동성을 각각 보였다. 또, Northern blot analysis에서 유충 5령기의 중장, 중부 실샘, 후부 실샘에서는 아릴포린 유전자가 발현되지 않고 오로지 지방체 조직에서만 아릴포린 유전자가 발현되었음을 확인하였다. 아릴포린 유전자는 특히 종령인 5령 유충의 초기에 발현강도가 높았으며 중, 후기로 갈수록 그 강도가 감소하였다. 하지만 번데기시기에는 흔적 정도의 해당 mRNA가 검출되었으며, 이와 같이 검출된 mRNA는 불활성화된 것으로 추정된다. 이상의 결과에서 작잠 아릴포린 유전자의 cDNA가 클로닝되었으며, 이 유전자는 유충기특이적 발현 및 지방체 조직특이적 발현양상을 보인 점이 본 연구에서 확인되었다.
본 연구는 견사중의 Cystine 성분을 가잠전과정을 통하여 기존재를 확인하고 견사구조중에서 cross linkage를 조성하고 있음을 확인하는데 있으며 다음과 같은 결론을 얻었다. 1. Cystine 결정체를 Folin 씨 방법으로 견사로부터 분리하였다. 2. 견사 및 그와 관련있는 과정에서 Sullivan 씨 방법으로 다음과 같이 분석하였다. 시료 Cystine 함유량 % A. 상엽단백질 0.175 B.잠란 0.33 C. 잠체 (탈지, 숙잠, 견사선제외) 0.41 D. 견사선 (숙잠) 1.23 E. 잠 0.0 F. 잠통 (탈지) 0.30 G. 잠아 (탈지) 0.60 H. 생계 0.22 I. Fibroin 0.175 J. Sericin 0.30 3. 잠체내의 Cystine 존재는 상엽에서 0.175%, 견사선에서 0.12%의 Methionine을 확인함으로 생화학적의의와 더불어 재확인하였다. 4. 견사선내의 Sulfhydryl 화합물은 Sericin과 Methionine으로 전환하는 동시에 전자는 액상견으로 분비되어 견사를 구성하고 후자는 영양목적으로 견사선세포 육성에 사용되는 것으로 믿어진다. 5. Cystine 성분량은 상품종, 잠품종, 자웅성, 육종과정과 사육환경에 따라 변화한다. 6. 잡종강세로 육성된 교잡종은 원잠종보다 효과적인 성장을 위하여 더욱 많은 영양성 아미노산을 필요로 한다. 7. 여기한 관찰을 통하여 견사중 아미노산조성은 어느정도 변화하는 것이며 Cystine은 섬유의 무정형부분 특히 Sericin에 함유되고 있다. 8. 순수한 Cystine 또는 양모 Cystine을 첨식한 결과 하등의 이익점을 초래하지 못하였음으로 상엽중에 함유되어있는 Cystine과 Methionine 함유량은 잠아의 영양생리에 충분한 것으로 보인다. 9. 견사중의 disulfide cross linkage는 Harris 씨 방법과 여러가지 염류와 산에 의한 수축현상으로 확인하였고 양모와 대조하여 시험하였다. 10. 본 연구중 견사의 사상구조와 액상견의 입망상구조를 현미경으로 포착하였다. 액상견의 입망상은 입상 peptide의 OH ion과 물의 H ion의 인력관계로 형성되고 있다는 것을 기 film의 배열상태로 고찰하게 되었고 상엽단백질의 입망상은 견사의 사상형성에 적당한 사료임을 보이고 있다. 11. 본 논문을 통한 Cystine 존재는 비록 그 량이 적지마는 견사중의 Cystine 전무에 대한 종래관념을 전환시킬 것이다.
누에의 소화액 proteinase 및 중장조직 Sucrase의 활성에 미치는 영양 및 환경의 영향을 알기 위하여, 사료조성중에 당의 함량이 많은 A사료(따라서 단백질의 함량은 적음), 당과백질과의 량비가 약 1 : 2로 적당하다고 생각되는 B사료, 단백질의 함량이 많은 C사료(따라서 당의 함량이 적음)의 3종의 준합성사료를 사용하여 유충을 사육하고, 4면기를 16$^{\circ}C$, $25^{\circ}C$, 32$^{\circ}C$로 각각 보호한 5령 5일째 유충의 소화액 proteinase 및 중장조직 Sucrase의 활성을 조사하였던바 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 유충의 혈당량은 4 면기보호온도와 상관하지 않고 A사료> B사료> C사료의 순으로 많었으나 소화액 proteinase 및 중장조직 Sucrase의 활성은 C사료> B사료 >A사료의 순으로 강하였다. 2. 유충의 소화액 proteinase 활성은 A,B,C의 각 사료에 있어서 대개 같은 경향으로, 32$^{\circ}C$ 보다 16$^{\circ}C$에 있어서 강하였으나 혈당량의 변화와는 상반되는 경향이 없다. 3. 유충의 소화액 Sucrase 활성은 A,B,C의 각 사료에 있어서 같은 경향으로, 32$^{\circ}C$> $25^{\circ}C$ >16$^{\circ}C$의 순으로 강하였으며 또한 혈당량의 변화와 같은 경향이었다. 4. 유충의 소화액 proteinase 활성은 사료조성과 4 면기보호온도와의 교호작용이 웅에서만 인정되었으나 중장조직 Sucrase 활성은 교호작용이 자웅 다같이 인정되었다.
1. 활성 virus T-CPV에 대한 유발현상은 잠103 및 잠104어느 것이나 male$\times$ female 및 male$\times$female 처리가 높았으며, 접중농도에 있어서 male$\times$female 및 male$\times$female 처리의 H-CPV단독 유발현상은 $10^{7}$ /m1이하에서 높은 경향이었다. 2. Formalin첨식에 의한 유발현상은 잠103 및 잠104 어느 것이나 male$\times$female 및 male$\times$female가 높은 경향이 있다. 3. 냉장처리에 의한 유발현상에서도 formalin첨식의 경우와 같은 경향이 있다. 물론, 병장처리에 의하여 중장형다각체병이 유발되는 것은 전대에 접종된 occult virus가 활성화한다는 것이라 생각할 수 있으나 그 유발되는 정도는 역시 occult virus와 관계되는 유전적, 생리적 및 환경적 여러가지 요인들을 생각할 수 있다. 따라서 실제적인 저온에 의한 유발관계에서 사육환경을 지배하는 사육의 온습도, 생리적요인을 지배하는 엽질 등을 감안해야 할 것이다. 본 시험결과에서 보면 occult virus가 차대에 경란전달되어 사육중 유발요인에 따라서 활성화하는 것은 분명하다. 그러나 지금까지 occult virus를 찾아낼 수 있는 방법은 전자현미경 및 혈청학적인 기술에 의존해도 불가능하다. 따라서 잠종을 생산하는 과정에서 occult virus의 유무를 확인할 수 있는 방법은 active virus가 검출되는 나방(모아)을 대상으로 하는 경우로 제한하여 시험을 해야 할 것이다. 여기서 또한 밝혀져야 하는 것은 occult virus 경란전달과 sublethal infection에 의한 경란전달의 차이점인 것이다. 그리고 현재 우리가 보유하고 있는 품종별로 occult virus의 잠재된 상태를 유발요인별로 검토하므로서 저항성 품종육성에도 좋은 자료가 될 것으로 생각한다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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