• 한국미생물·생명공학회지
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• 제14권2호
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• pp.161-168
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• 1986

E. coli-S. cerevisiae shuttle vector인 plasmid YRp7을 이용하여 B. amyloliquefaciens의 $\alpha$-amylase gene을 E. coli 내에 cloning하였다. 이때 제한 효소 Sau 3 AI에 의해 얻어진 $\alpha$-amylase gene의 크기는 약 1.95kb정도였으며 E. coli내에서 비교적 안정하게 유지되고 발현되었다. 재조합 plasmid p-EA24를 함유한 E. coli는 B. amyloliquefaciens의 약 65% 정도의 $\alpha$-amylase를 생성하였으며, 최적온도, pH, CaCl$_2$의 영향등 $\alpha$-amylase의 효소학적인 성질을 비교 조사해 본 결과 B. amyloliquefaciens의 $\alpha$-amylase와 동일하였다. 또한 E. coli에서 생성된 $\alpha$-amylase로 70% 정도가 periplasmic space에 존재하였으며 나머지는 세포 내부에 존재함을 알았다.

• 한국잠사곤충학회지
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• 제15권1호
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• pp.1-7
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• 1973

누에의 소화액 Amylase 활성에 미치는 영양 및 환경의 영향을 알기 위하여 사료조성중에 당의 함량이 많은 A사료(따라서 단백질의 함량은 적음), 당과 단백질과의 량비가 약 1 : 2로 적당하다고 생각되는 B사료, 단백질의 함량이 많은 C사료(따라서 당의 함량이 적음)의 3종의 준합성사료를 사용하여 유충을 사육하고, 4 면기를 16$^{\circ}C$, $25^{\circ}C$, 32$^{\circ}C$로 각각 보호한 5령 5일째 유충의 소화액 Amylase 활성을 조사하였던바 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 유충의 성육은 B사료보다 A사료나 C사료에 있어서 다같이 불량하였다. 2. 유충의 소화액 Amylase 활성은 4 면기 보호온도와 상관하지 않고 C사료＞ B사료＞ A사료의 순으로 강하였다. 3. 유충의 소화액 Amylase 활성은 A.B.C의 각 사료에 있어서 대개 같은 경향으로서 32$^{\circ}C$보다 16$^{\circ}C$에 있어서 강하였다. 4. 유충의 소화액 Amylase 활성에미치는 사료조성과 4 면기 보호온도와의 교호작용은 자에선 인정되지 않았으나 웅에 있어선 인정되었다.

• Journal of Chest Surgery
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• 제16권1호
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• pp.83-90
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• 1983

During the period of March 1981 to September 1982 a series of survey has been done on the value of amylase in blood and urine of 24 patients who went through the operation of heart surgery, for congenital and acquired heart diseases, with extracorporeal circulation at the Department of Thoracic _ Cardiovascular Surgery, School of Medicine, Hanyang University. In order to analyze the iteration and inter-relation of the value of amylase in blood and urine and the extra corporeal circulation time. The duration of extra-corporeal circulation time up to 60 minutes was classified as Group A while above 60 minutes was classified as Group B. The results are as follow; 1. 3 patients [23.07%] among 13 patients of Group A and 3 patients [27.27%] among 11 patients, showed increased amylase value after the surgery. 2. The average value in blood after operation was 120.3190.71 unit in Group A and 130.90113.15 unit in Group B. It was 11.59 units [9.63%] higher in Group A than in Group B. 3. 1 patient [7.7%] among 13 patients of Group A and 2 patients[18.18%] among 11 patients of Group B, the frequency of Group B was 10.48% higher. 4. The average Value of amylase in urine after the surgery was 111.9254.87 unit in Group A and 151.54111.17 unit in Group B. It was 39.62 unit [32.72%] higher in Group A than in Group B. 5. The longer the duration of extra corporeal circulation time showed the higher the amylase value in blood and urine after the operation. 6. Although the value of amylase in blood and urine was increased after operation, no patients Were found to have developed clinical pancreatitis.

• Applied Biological Chemistry
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• 제39권4호
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• pp.293-296
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• 1996

니켈독성의 생물검정에 있어서 지표식물로 무를 이용하였고 수경재배 조건하에서 니켈용액의 농도에 따른 무종자의 발아율, 세포신장, ${\alpha}-amylase$ 활성도, 엽록소, 단백질함량을 조사한 결과 니켈처리농도를 증가시키면 종자의 발아초기에는 농도의존적으로 ${\alpha}-amylase$의 활성도가 크게 저해를 받기 시작하였으며, 발아후 생장단계에서는 엽록소 b와 a의 함량이 크게 저해를 받았다.

• 한국식품영양과학회지
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• 제30권5호
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• pp.765-769
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• 2001

향미찰벼 전분의 이화학적 특성을 알기 위하여 scanning electron microscope(SEM), 요드정색반응, differential scanning calorimetry(DSC), 그리고 산가수분해도, glucoamylase와 $\alpha$-amylase 가수분해도를 측정하였다. 향미찰벼의 전분입자는 다각형구조이며 직경 4~6$\mu\textrm{m}$였다. 호화특성으로서 호화개시온도는 59.8~62.5$^{\circ}C$였으며 향미찰벼 중 KR92021-B-B-42-3-B와 KR92021-B-B-165-1-B의 호화엔탈피값은 대체로 높았다. 향미찰벼 전분의 아밀로펙틴의 무정형 분획을 품종간 비교하기 위하여 15% H$_2$SO$_4$에 의한 산가수분해도를 측정한 결과 KR92021-B-B-5-2-B와 KR92021-B-B-42-3-B는 산가수분해도가 낮아 아밀로펙틴의 cluster 구조가 다른 품종에 비해 질서있게 나열되어 있음을 알 수 있었다. 향미찰벼 중 KR92021-B-B-5-2-B는 glucoamylase와 $\alpha$-amylase에 의한 전분가수분해도가 높은 특성을 보였다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제14권3호
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• pp.209-212
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• 1986

YEp 13 plasmid에 B. amyloliquefaciens의 $\alpha$-amylase gene을 cloning시켜서 얻은 hybrid plasmid를 E. coli C 600으로 형질전환시켜서 amylase 활성을 나타내는 균주를 선별하였다. 선별된 E. coli C 600균주를 plasmid추출하여 전기영동해 본 결과 plasmid가 매우 불안정하였으며, 그중 가장 단순한 plasmid band를 지니고 있으며 amylase활성이 강한 E. coli균주를 선별하였다. 선별된 균주의 균체내에 있는 2개의 plasmid DNA를 분리하여 각각의 plasmid를 pTG 17-1, pTG 17-2로 명명하였으며 S. cerevisiae MC 16에서 형질전환이 가능한 pTG 17-2 DNA를 제한효소 EcoRI과 Pst I으로 restriction한 결과 EcoRI으로 처리한 경우는 7.3, 4.8, 2.4 kb인 3개의 분획으로 나타났으며 Pst I으로 처리한 경우는 linear로 14.5kb임을 알았으며 이로써 pTG 17-2 plasmid의 size가 약 14kb임을 알았다. 또한 E.coli균체내에서의 ampicillin sensitive로써 이 plasmid의 ampicillin resistance site가 결실되었음을 알았고 효모의 형진전환체로 부터의 $\alpha$-amylase는 균체외로 분비되지 않았고 효모균체내의 $\alpha$-amylase는 Somogyi-Nelson방법과 Agar diffusion 방법으로 확인하였다.

• 한국토양비료학회지
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• 제31권1호
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• pp.56-60
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• 1998

크롬에 의한 무와 배추 유식물의 생리학적 반응을 조사하기 위하여 수경재배 조건하에서 크롬용액의 농도에 따른 무와 배추종자의 발아율 세포신장, ${\alpha}$-amylase활성도, 엽록소, 단백질함량의 차이를 비교하였다. 크롬처리농도가 증가함에 따라 농도의존적으로 무와 배추종자의 발아율, 세포신장, ${\alpha}$-amylase 활성도가 감소하였는데 배추에서 보다 무에서 그 저해정도가 심하게 나타났다. 무와 배추에서 크롬처리시 약간의 chlorophyll 함량 감소가 있었으며 chlorophyll a가 b보다 더 저해를 받았다. 크롬농도 증가에 따른 ${\alpha}$-amylase 활성도, chlorophyll a와 b, 단백질함량과의 관계를 다중회귀분석한 결과 단백질> ${\alpha}$-amylase>chlorophyll a>chlorophyll b의 순서로 저해를 받았다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제18권3호
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• pp.309-316
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• 1990

Bacillus circulans F-2의 생산하는 NaCl 의존성 amylase(NaCl-dependent amylase) 유전자를 함유하는 1795bp의 DNA 염기배열을 결정하였다. 본 유전자의 ORF는 총염기수 1005bp(335 아미노산)로 구성되며, 분자량 38,006의 amylase의 분자량 약 35,000과 일치하였다. 본 유전자의 상류영역(upstream region)에는 고초균(Bacillus subtiis)의 전형적인 전사발현영역(transcriptional region)과 상보적인 DNA역역이 존재하였다. 성숙단백질의 N-말단측 아미노산 배열은 Ala-Ser-Lys-Val-Gly이며, 분비에 필요한 20개의 signal 아미노산 배열을 갖는 전형적인 분비 단백질임이 확인 되었다. 한편 다른 amylase들과 비교결과, smylase 활성발현과 밀접히 관련되 있는 4개 부위의 상보성영역(homologous region)을 가지고 있었다.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제24권2호
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• pp.254-263
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• 2014

Enteromorpha polysaccharides (EP) extracted from green algae have displayed a wide variety of biological activities. However, their high molecular weight leads to a high viscosity and low solubility, and therefore, greatly restrains their application. To solve this problem, bacteria from the surface of Enteromorpha were screened, and an Alteromonas macleodii strain B7 was found to be able to decrease the molecular weight of EP in culture media. Proteins harvested from the supernatant of the A. macleodii B7 culture were subjected to native gel electrophoresis, and a band corresponding to the Enteromorpha polysaccharide lyase (EPL) was detected by activity staining. The enzyme identity was subsequently confirmed by MALDI-TOF/TOF mass spectrometry as the putative ${\alpha}$-amylase reported in A. macleodii ATCC 27126. The amylase gene (amySTU) from A. macleodii B7 was cloned into Escherichia coli, resulting in high-level expression of the recombinant enzyme with EP-degrading activity. AmySTU was found to be cold-adapted; however, its optimal enzyme activity was detected at $40^{\circ}C$. The ${\alpha}$-amylase was highly stable over a broad pH range (5.5-10) with the optimal pH at 7.5-8.0. The highest enzyme activity was detected when NaCl concentration was 2%, which dropped by 50% when the NaCl concentration was increased to 16%, showing an excellent nature of halotolerance. Furthermore, the amylase activity was not significantly affected by tested surfactants or the presence of some organic solvents. Therefore, the A. macleodii strain B7 and its ${\alpha}$-amylase can be useful in lowering EP molecular weight and in starch processing.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제30권4호
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• pp.352-358
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• 2002

토양으로부터 maltopentaose생산성 amylase를 분비하는 세균 KSM B-404를 분리하여 그의 형태적, 생리적인 특성을 고려한 결과 Bacillus megaterium으로 동정되었다. 효소는 ($NH_4$)$_2$$SO_4$ 침전 분획, DEAE-Toyopearl 및 Superdex 75 HR 10/30 크로마토그래피로 129배 정제되었으며 21.4%의 활성이 회수되었다. 정제된 효소를 SDS-PACE로 분석한 결과 분자량은 약 68 kDa이었고, 최적 반응 온도는 $50^{\circ}C$이며 $Ca^{2+}$ 이온의 존재 시 열 안정성이 증가하였다. 한편 최적 반응 pH는 6.0~7.0부근이며 알칼리 조건에서도 안정하였다. 또한 효소의 활성은 $Cu^{2+}$ , $Hg^{2+}$ 그리고 특히 Fe/eup 3+/이온 등의 금속이온에 의해 강하게 저해 받았고 acetic anhydride, EDTA , hydroxylamine-HCI, $\rho$ - chloromercuribenzoate 등의 저해제에 의해서 활성이 저해되었으나 concanavalin A에 의한 저해 효과는 나타나지 않았다. 전분의 가수분해 산물을 HPLC로 분석한 결과 maltopentaose가 주산물로 나타났으며 반응 24시간 후 총 가수분해 산물의 약 52%를 차지하였다.