An OTHBVS cell line from HepG2 was established. This cell line stably expresses the human hepatitis B virus (HBV) middle S protein that includes the preS2 region which is important for HBV particle entry into the hepatocyte. To establish this cell line, the middle S open reading frame (ORF), with a promoter located in the 5' region and enhancer located in the 3' region, was cloned downstream from the metallothionine (MT) promoter of the OT1529 vector. In this vector, expression of the middle S protein was constructed to be regulated by its own promoter and enhancer. Expression of the large S protein which contains the preS1 region in addition to the middle S protein was designed to be regulated by the MT promoter. When extracts of OTHBVS cells were examined with an S protein detection kit (RPHA, Korea Green Cross Co.), an S protein was detected. Total mRNA of OTHBVS cell examined by northern blot analysis with an S ORF probe revealed small/middle S transcripts (2.1 kb). When the MT promoter was induced by Zn, large S transcripts (2.4 kb) were detected. The GP36 and GP33 middle S proteins were presumably detected, but large S proteins were not detected by immunostain analysis using anti-preS2 antibody.
Objectives : Contradictions for Oncology acupuncture were searched and reviewed to establish fundamentals for the appropriate contraindication guideline. Methods : In order to search contraindications for oncology acupuncture, domestic journals, books and online database of Pubmed were searched using the terms, cancer, tumor, acupuncture, safety, contraindications and guideline were below. Results : We found 7 papers and 1 book by the above methods. We reviewed and suggested the contraindications. Contraindications for oncology acupuncture are neutropenia (absolute neutrophil count : ANC less than $500/mm^3$), thrombocytopenia (platelets less than $50,000/mm^3$), anticoagulant use, spinal instability, tumour nodule, lymphedema, prosthesis, intracranial deficits, confused patients, significant arrhythmia, patient refusal to treatment, severe neurotic patients and intracardiac defribillator. Contraindications for using semi-permanent needles are neutropenia (ANC less than $500/mm^3$), splenectomy, valvular heart disease, B, C hepatitis and keloids. Conclusions : Acupuncture for cancer patients pose significant risks but these guidelines are proposed in the hopes of providing certain boundaries in practicing oncology acupuncture. A more systematic and rigorous research is needed to establish a more reliable oncology acupuncture guidelines.
Kim, Youn-Hee;Hong, Young-Bin;Suh, Se-Won;Jung, Gu-Hung
BMB Reports
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v.33
no.2
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pp.126-132
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2000
The hepadnaviruses replicate their nucleic acid through a reverse transcription step. The MBP-fused HBV polymerase was expressed in E. coli and purified by using amylase affinity column chromatography. The purified protein represented DNA-dependent DNA polymerase activity. In this report, the MBP-HBV polymerase was shown to lack 3'$\rightarrow$5' exonuclease activity, like other retroviral RTs. The ratio of the insertion efficiency for the wrong versus right vase pairs indicates the misinsertion frequency (f). The nucleotide insertion fidelity (1/f), observed with the MBP-HBV polymerase and HIV-1 RT, was between 60 and 54,000, and between 50 and 73,000, respectively, showing that they are in close range. A relatively efficient nucleotide incorporation by the MBP-HBV polymerase was observed with a specificity of three groups: (1) A : T, T : A>C : G, G : C (matched pairs), (2) A : C, C : A>G: T, T : G (purine-pyrimidine and pyrimidine-purine mispairs), and (3) C : C, A : A, G : G, T : T>T : C, C : T>A : G, G : A (purine-purine or pyrimidine-pyrimidine mispairs), and their order is (1)>(2)>(3). The data from the nucleotide insertion fidelity by the MBP-HBV polymerase suggest that the HBV polymerase may be as error-prone as HIV-1 RT.
With the purpose of improving the therapeutic index of $[^3H]$ acyclovir (ACV) in the treatment of chronic hepatitis B infection, asialofetuin (AF) which after selective interaction with Ashwell's receptor specifically enters into hepatocytes, was chosen as a carrier system for hepatic targeting. This drug was first converted to its monophosphate (ACVMP), which was subsequently activated by water soluble carbodiimide to conjugate with ${\varepsilon}-NH_2$ groups of Iysine residues of AF. The molar ratio of ACVMP to AF in the conjugate was 3.9. In rats, elimination of ACVMP-AF conjugate after i.v. injection showed two phase elimination kinetics. Initial apparent elimination rate constant in rats was $0.191\;min^{-1}$ which was greater than that of ACV. The elimination rate constant from terminal phase was $0.021\;min^{-1}$. Area under the total radioactivities versus time curve was found to be several times larger in liver than in other organs (spleen, intestine, lung and kidney) after i.v. administration of the conjugate labelled in the drug moiety. The above results suggested that ACVMP-AF conjugate was rapidly taken up by hepatocytes and could be a useful hepatic targeting system.
Lee Gi Jun;Cho Jung Hyo;Cho Chong Kwan;Son Chang Gue
The Journal of Korean Medicine
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v.26
no.4
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pp.168-173
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2005
Hepatitis B virus (HBV) is one of the most common intracellular parasites, of which 350 million people worldwide are chronic carriers. It also related to a high incidence of hepatocellular carcinoma. In general, it has been well known that HBV is a noncytolytic virus, so not the virus itself but any unfavorable response by host immune cells and inflammatory cytokines mainly result in chronic liver injury. From this viewpoint, we hopefully assume that Oriental therapies based on immunologic strategies may be able to provide a therapeutic alternative for caring for these illnesses. We also need to be thoroughly familiar with information about HBV epidemiology and the pathologic process of chronic HBV carriers. In this study, to clarify the important considerations of HBV infection and the high risk of HBV induced life-threatening diseases, we introduced our pilot practices given to the patients and the possibility of Oriental therapies as a novel strategy for chronic HBV carriers.
만성 B형 간염의 경과중 흔히 볼 수 있는 간기능의 이상은 대부분 심한 황달의 동반없이 혈청 AST와 ALT의 증가만 보이면서 악화되는 것이다. 저자는 심한 황달을 동반한 16명의 만성 B형 간염 악화 환자(연구군)와 심한 황달없이 AST와 ALT치만 증가된 13명의 환자(비교군)를 비교관찰하였다. PMC 제재를 복용했던 환자는 연구군에서 11명(68.8%), 대조군에서 1명(7.7.%)으로 나타났으며 PMC를 포함하여 각종 약제 및 알콜 섭취가 저명했던 환자가 연구군에서 15명(93.8%), 대조군에서는 2명(15.4%)이었다. 혈청 HBeAg 양성율은 급성 악화전에는 연구군에서 14명 중 7명(50.0%), 비교군에서는 13명 모두 (100%)에서 양성이었으며, 급성 악화 경과후에는 연구군에서는 변함없었고 비교군에서는 13명중 3명(23.1%)에만 양성이었다. 연구군 중 anti-HBe 양성화는 한 사람도 생기지 않았고 6명이 사망하였으며 대조군에서는 8명의 환자에서 anti-HBe 양성화가 생겼고 아무도 간기능 부전으로 사망하지 않았다. 만성 B형 간질환에서 심한 황달을 동반한 급성 악화와 관련있는 요인은 진행된 만성 활동성 간염, 간경변 등 근본적으로 진행된 간기능 저하와 동반된 부적절한 약제나 알콜 복용이 확실히 관계있을 것으로 사료되며 간기능 부전도 그리 드물지 않다. 반면에 간경변으로 진행되기 전 상대적으로 진행이 덜 된 비교군의 만성 B형 간염 환자에서는 황달의 저명한 증가없이 간기능이 갑자기 악화될 때는 자연적인 혈청 anti-HBe 양성전환의 동반이 흔한 것으로 나타났다.
만성 B형 간염의 경과중 흔히 볼 수 있는 간기능의 이상은 대부분 심한 황달의 동반없이 혈청 AST와 ALT의 증가만 보이면서 악화되는 것이다. 저자는 심한 황달을 동반한 16명의 만성 B형 간염 악화 환자(연구군)와 심한 황달없이 AST와 ALT치만 증가된 13명의 환자(비교군)를 비교관찰하였다. PMC 제재를 복용했던 환자는 연구군에서 11명(68.8%), 대조군에서 1명(7.7%)으로 나타났으며 PMC를 포함하여 각종 약제 및 알콜 섭취가 저명했던 환자가 연구군에서 15명(93.8%), 대조군에서는 2명(15.4%)이었다. 혈청 HBeAg 양성율은 급성 악화전에는 연구군에서 14명 중 7명(50.0%), 비교군에서는 13명 모두(100%)에서 양성이었으며, 급성 악화 경과후에는 연구군에서는 변함없었고 비교군에서는 13명 중 3명(23.1%)에서만 양성이었다. 연구군 중 anti-HBe 양성화는 한 사람도 생기지 않았고 6명이 사망하였으며 대조군에서는 8명의 환자에서 anti-HBe 양성화가 생겼고 아무도 간기능 부전으로 사망하지 않았다. 만성 B형 간질환에서 심한 황달을 동반한 급성 악화와 관련있는 요인은 진행된 만성 활동성 간염, 간경변 등 근본적으로 진행된 간기능 저하와 동반된 부적절한 약제나 알콜 복용이 확실히 관계있을 것으로 사료되면 간기능 부전도 그리 드물지 않다. 반면에 간경변으로 진행되기 전 상대적으로 진행이 덜 된 비교군의 만성 B형 간염 환자에서는 황달의 저명한 증가없이 간기능이 갑자기 악화될 때는 자연적인 혈청 anti-HBe 양성 전환의 동반이 흔한 것으로 나타났다.
Background: Hepatocellular carcinoma (HCC), the main malignant tumor of the liver, is very common and highly lethal. The aim of this study was to determine its clinicopathologic characteristics and risk factors in Turkey. Materials and methods: In this study, patients who were diagnosed as suffering from HCC in the period between August 2004 and December 2011 were evaluated retrospectively. Results: A total of 98 patients were included, with a median age 61 (range: 16 to 82). Seventy nine (80.6%) were male 59 (60.2%) were infected with hepatitis B virus (HBV) and 15 (15.3%) with HCV, another 15 (15.3%) being alcohol abusers. Seventy two (73.5%) were at advanced stage and 54 (55.1%) had elevated serum alpha-fetoprotein (AFP). Surgery, chemoembolization, systemic chemotherapy and application of the tyrosine kinase inhibitor sorafenib were the major treatment options. Conclusions: According to our findings HCC is mostly diagnosed in advanced stage and age, being five times more common in males than females. Main risk factors of HCC are HBV infection, HCV infection and alcohol abuse. Elevation in AFP may facilitate early diagnosis of HCC in high risk groups.
In order to find antiviral effect against Human immunodeficiency virus(HIV), Herpes simplex virus type I(HSV-1) and II(HSV-2) from herb medicines, publicated 29 paters on anti-viral effect of herbal medicines and a convenient virus-induced cytopathic effect (CEP) inhibition assay was introduced. The major virus on experiment are HIV, Hepatitis B virus and HSV-1,2. Those of other studies showed inhibition of infected virus DNA replication and screening test of herbal medicines. More than 15 extractions were prepared by pure water boiling from herbal medicines, and their toxicity of infected cell and anti-viral activities were evaluated. Among them, the major part of herbal medicines showed cell stability compared with the contrast. Cytotoxic concentration (CC) of the $H_2O$ extracts of Padoo against HIV was <4.0, Hyungbangpaedoksan against HIV was 9.3, Whangyonhaedoktang against HIV-1 and HSV-2 was 15.3. These are high level cytotoxic concentration compared with the contrast. But antiviral effect was unable to figure out for selective $index(SI)=CC_{50}/EC_{50}$. The other herbal medicines were unable to showed potent anti-HIV and anti-HSV activity. The antiviral activation using herbs in this thesis have unlimited objects, to select research object will help to show the direction of antiviral drug development that have less side effect and more excellent efficiency.
Kim, Sun-Young;Park, Sung-Goo;Jung, Hye-Yun;Chi, Seung-Wook;Yu, Dae-Yeul;Lee, Sang-Chul;Bae, Kwang-Hee
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.21
no.5
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pp.525-528
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2011
The Raf-1 kinase inhibitory protein (RKIP) can regulate multiple key signaling pathways. Specifically, RKIP binds to Raf-1 kinase and inhibits the Ras-Raf-1-MEK1/2- ERK1/2 pathway. Additionally, Raf-1 has been shown to translocate to mitochondria and thereby protect cells from stress-mediated apoptosis. Recently, HBx was found to stimulate the mitochondrial translocation of Raf-1, contributing to the anti-apoptotic effect. We found that RKIP was downregulated during HBx-mediated hepatocarcinogenesis. In this study, we show that RKIP bound to Raf-1 and consequently inhibited the translocation of Raf-1 into mitochondria. This promoted the apoptosis of cells treated with apoptotic stimulus. Thus, the downregulation of RKIP increased the level of free Raf-1 and thereby elevated the mitochondrial translocation of Raf-1 during HBx-mediated hepatocarcinogenesis. The elevated Raf-1 mitochondrial translocation induced the increased anti-apoptotic effect and subsequently promoted HBx-mediated hepatocarcinogenesis.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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