Seok Yoon KWON;Shin Je KIM;Hyo Jeong HONG;Moon Hi HAN;Chang Ho CHUNG;Ho Sul LEE;Kyung Hee PAEK
Korean Journal of Plant Tissue Culture
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v.21
no.6
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pp.353-356
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1994
Chimeric kappa chain and gamma chain cDNA clones (pCKS2 and pCHS2) of a monoclonal antibody specific for pre-S2 surface antigen of human hepatitis-B virus were ligated into Xbal site of plant expression vector pBKS-1. Plasmid DNA containing each of the chimeric gene were then mobilized from E, coli to Agrobacterium tumefaciens strain LBA4404. The chimeric antibody genes were then introduced into tobacco by Ti plasmid-mediated transformation. The putative Transformants were selected on medium containing kamaycin sulfate. Shoots that formed on shoot induction medium were analyzed by Western blot analysis for the expression of kappa-chain or gamma-chain genes. The Western blot analyses clearly showed that the introduced genes were stably expressed in transgenic plants.
CJC-50100 is a recombinant hepatitis B virus surface antigen (HBsAg) expressed in yeast. The general pharmacological properties of CJC-50100 were evaluated in mice, rats, dogs and isolated guinea pig ileum. The doses were 0.33~33.3 $\mu$g/kg i.m. for mice and rats and 3.3~9.9 $\mu$g/kg i.v. for dogs. The concentrations of 0.002~0.02 $\mu$g/ml were used for the assay with guinea pig ileum. Intramuscular administration of CJC-50100 at the doses did not alter general behavior and the responses for central nervous system, smooth muscle, gastrointestinal system, cardiovascular and respiratory system, and water and electrolytes excretion. In summary, CJC-50100 had no pharmacological effect in these studies even up to the 100-fold of the expected clinical dose, 20 $\mu$g/man/60 kg.
In this work, the surface of gold nanoparticles (AuNPs) was modified with small molecules including mercaptoundecanoic acid (MUA) and L-lysine for the development of highly sensitive lateral flow (LF) sensors. Uniformly sized AuNps were synthesized by a modified Turkevich-Frens method, showing an average size of $16.7{\pm}2.1nm$. Functionalized AuNPs were then characterized by transmission electron microscopy, UV-vis spectroscopy, X-ray photoelectron spectroscopy, and Fourier transform infrared spectroscopy. The stable conjugation of AuNPs and antibodies was obtained at pH 7.07 and the antibody concentration of $10{\mu}g/mL$. The functionalized AuNP-based LF sensor exhibited lower detection limit of 10 ng/mL for hepatitis B surface antigens than that of using the bare AuNP-based LF sensor (100 ng/mL).
We performed a basic experiment for rapid. on-line, real-time measurement of HBsAg by using a BIACORE biosensor, a chip-based sensor utilizing surface plasmon resonance technology to quantify the recognition and interaction of biomolecules. We immobilized an a -HBsAg antibody on a CM5 chip surface which was activated by N-hydroxysuccinimide for amine coupling with HBsAg, and measured the mass increase from the coupling. This study showed the potential of this biosensor-based method as a rapid, multi-sample, on-line assay. Once properly validated, it can serve as a more powerful method for HBsAg quantification.
Dental professions are considered high risk for contracting hepatitis infection. In Korea, many patients are hepatitis B virus carriers. HBV are most efficiently transmitted by blood. Root canal treatment, as in cases of acute pulpitis always accompanied by contaminated blood. Therefore it is absolutely necessary to use irrigation solutions having strong antiviral effect for prophylaxis both dental personnel and patients. The purpose of this study was to investigate the antiviral effect of seven root canal irrigation solutions by radioimmunometric test. The solutions were 5% sodium phyochlorite, 5% cresol, 2% glutaraldehyde, 3% hydrogen peroxide, 0.05% chlorohexidine, 10% iodine, and 70% isoprophyl alcohol. Each irrigation solutions was mixed with serum preparated from HBsAg positive patients and sera were diluted to 1:1. 1:4. 1:20 and 1:100. Percentage of radioactivity was assayed with AUK(Sorbin biomedica, Italy) and COBRA(Packwood Instrument company, USA). Sodium hypochlorite and glutaraldehyde showed most strong antivral activity against HBsAg. Isoprophyl alcohol had moderate antiviral effect and the effect and the effect was increased especially in 1:4 solution. Hydrogen peroxide exihibited very weak aintivral activity. Cresol, chlorohexidine, and iodine exhibited little antiviral activity.
Five assays for anti-HBs were compared to improve potency test of Human lgG preparations. The three commercial EIA kits were optimized including dose response curve ranges and compared by conducting a co-laboratory study. After selecting the most reproducible EIA kit, methods comparison was performed with 22 samples in 5 different days. As a result, EIA (7.7 ${\pm}$ 5.3%) and MEIA (AxSYM: 3.7 ${\pm}$ 1.9%, IMx: 1.6 ${\pm}$ 0.8%) showed precision and accuracy (100.1 ${\pm}$ 12.6%). Therefore, the validated EIA assay was established and it is believed to be comparable to current MEIA.
This study aims to furnish basic data about prevention and infection control of Hepatitis B Virus(HBV) for those who, working in dental offices, are particularly exposed to a high risk of HBV infection. A survey was conducted to 310 students including freshmen, sophomores and juniors enrolled in the dental hygiene department in order to examine their knowledge about infection routes of HBV, clinical history of their family members and their own health. The outcomes of the survey showed following facts; 1. Students were found to lack knowledge about the present conditions of their HBsAg and HBsAb of HBV(PF0.05), conduct of preventive vaccination(PE0.05), completion of 3 required vaccinations(PF0.05) and formation of antibody(PF0.05). 2. Students named "blood"(88.6%) and "infected needles"(82.5%) as most likely infection routes of HBV(PE0.05 and PE0.01). These replies came mostly from sophomores(65.6% and 92.1%), followed by juniors(89.2%, 82.5%) and freshmen(81.1%, 73.0%). Least knowledge about infection routes of HBV was sensed with the reply "infection through breast-feeding of positive mother(27.9%)"(PE0.05). Generally, sophomores seemed to have much knowledge about infection routes, followed by juniors and freshmen in order. 3. As to clinical history of family members, 10 students(3.5%) replied that any of their family members is suffering from HBV now, 8(2.6%) revealed that some of their family members once suffered from it and 10(3.2%) reported cases of death of their family members from liver diseases. 4. Ninety-four point seven percent of respondents believed their health to be better than normal.
Lee, E. K.;Ahn, S. J.;Yoo, C. H.;Ryu, K.;Jeon, J. Y.;Lee, H. I.;Choi, S. C.;Lee, Y. S.
KSBB Journal
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v.17
no.1
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pp.20-25
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2002
We performed a basic experiment for rapid, on-line, real-time measurement of HBsAg by using a surface plasmon resonance biosensor to quantify the recognition and interaction of biomolecules. We immobilized the anti-HBsAg polyclonal antibody to the dextran layer on a CM5 chip surface which was pre-activated by N-hydroxysuccinimide for amine coupling. The binding of the HBsAg to the immobilized antibody was measured by the mass increase detected by the change in the SPR signal. The binding characteristics between HBsAg and its antibody followed typical monolayer adsorption isotherm. When the entire immobilized antibody was interacted, there was no additional, non-specific binding observed, which suggested the biointeraction was very specific as expected and independent of the ligand density. No significant steric hindrance was observed at 17.6 nm/$mm^2$ immobilization density. The relationship between the HBsAg concentration in the sample solution and the antigen bound to the chip surface was linear up to ca. $40\mu\textrm{g}$/mL, which is much wider than that of the ELISA method. It appeared the antigen-antibody binding was increased as the immobilized ligand density increased, but verification is warranted. This study showed the potential of this biosensor-based method as a rapid, simple, multi-sample, on-line assay. Once properly validated, it can serve as a more powerful method for HBsAg quantification replacing the current ELISA method.
Kim, Dae-Sung;Kim, Dong-Hyun;Bae, Jong-Myun;Shin, Myung-Hee;Ahn, Yoon-Ok;Lee, Moo-Song
Journal of Preventive Medicine and Public Health
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v.32
no.4
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pp.452-458
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1999
Objectives: The authors conducted the study to evaluate bias when potentially diseased subjects were included in cohort members while analyzing risk factors of chronic liver diseases. Methods: Total of 14,529 subjects were followed up for the incidence of liver diseases from January 1993 to June 1997. We have used databases of insurance company with medical records, cancer registry, and death certificate data to identify 102 incident cases. The cohort members were classified into potentially diseased group(n=2,217) when they were HBsAg positive, serum GPT levels higher than 40 units, or had or has liver diseases in baseline surveys. Cox's model were used for potentially diseased group, other members, and total subjects, respectively. Results: The risk factors profiles were similar for total and potentially diseased subjects: HBsAg positivity, history of acute liver disease, and recent quittance of smoking or drinking increased the risk. while intake of pork and coffee decreased it. For the potentially diseased, obesity showed marginally significant protective effect. Analysis of subjects excluding the potentially diseased showed distinct profiles: obesity increased the risk, while quitting smoking or drinking had no association. For these intake of raw liver or processed fish or soybean paste stew increased risk; HBsAg positivity, higher levels of liver enzymes and history of acute liver diseases increased the risk. Conclusions: The results suggested the potential bias in risk ratio estimates when potentially diseased subjects were included in cohort study on chronic liver diseases, especially for lifestyles possibly modified after disease onset. The analytic strategy excluding potentially diseased subjects was considered appropriate for identifying risk factors for chronic liver diseases.
Nelumbo nucifera (lotus) is known to be a useful medicinal plant and leaf extract contains several flavonoids and alkaloids. To analyze the effect of Nelumbo nucifera leaves extract (NNL) on the HBsAg production, we treated NNL on HepG2.2.15 cells which contain the hepatitis B viral genome and secrete surface antigen into media. NNL suppressed the production of hepatitis B surface antigen as a dose-dependent manner. To analyze the effect of NNL on HBV DNA replication, PCR analysis was performed. NNL was not affected the HBV DNA replication and HBsAg mRNA expression. To understand the effect of NNL on the production of HBsAg, we carried out the analysis of lipid-metabolizing gene expression using one-step RT-PCR. NNL reduced the gene expression of FASN and SREBP2 and increased the expression of LDLR. Triglyceride content of HepG2.2.15 cells was not decreased by treatment of NNL. This result suggests a possibility that NNL may have an effect for the inhibition of hepatitis B surface antigen by modulation of lipid and cholesterol metabolism.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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