시호 모상근 (BFHR2 클론) 배양에서 생장과 saikosaponin 생산에 미치는 기본배지, 배지의 다량무기염농도 변화 및 IAA와 IBA의 효과를 조사하였다. 조사한 배양액 중 RCM 배지에 다량무기염농도를 2배로 증가시킨 배지에서 생장이 가장 양호하였다. 또한 2RCM배지에서는 saikosaponin인 a, c와 d의 생성을 확인하였으며, 반면에 MS배지에서는 saikosaponin의 생성이 극히 저조하였다. IBA는 0.5mg/L에서 약 60%의 생장촉진효과를 보였으나, IAA와 IBA두 가지 모두 0.01~5mg/L 까지의 농도에서 뿌리형태의 외적인 변화 없이 saikosaponin 생성을 강하게 억제하는 작용을 나타내었다.
미선나무의 기내번식을 위하여 MS배지에 세 가지 싸이토키닌 (zeatin, kinetin 및 BA)을 세 가지 농도로 처리하여 액아 배양을 실시하였다. 줄기유도는 BA가 가장 효과적이었고, 생장은 zeatin이 좋았다. Kinetin은 2.0 및 5.0 mg/L 처리에서 줄기발생 효과가 있었으나 그 효과는 zeatin, BA에 비해 저조했다. 500 lux정도의 약광 하에서 배양은 싸이토키닌 처리에 관계없이 줄기의 생장을 촉진하였다. 발근은 IBA가 첨가된 1/2 GD배지에서 주효했다. 발근된 개체는 인공배양토에서 100% 활착되었고, 정상 생장이 가능했다. 이상의 결과에서 미선나무의 기내 번식이 가능함을 보여 주었다.
지황 (R. glutinosa)의 조직절편으로부터 고효율의 식물체 재분화 시스템을 확립하기 위하여 기내에서 발아된 유묘의 잎을 절취하여 auxins과 cytokinins을 농도별로 단독 또는 혼합하여 MS배지에 치상한 후 신초의 형성율을 조사하였다. 잎 절편으로부터 부정아의 형성율은 1 mg/{\ell}\;BA와\;2mg/{\ell}$ IAA가 첨가된 MS배지에서 93.4%로 가장 높았다. 한편, 엽령에 따른 부정아의 형성율을 조사한 결과 기내에서 발아 후 6주가 지난 유식물체의 정단부위로부터 3번째의 잎을 사용함으로써 신초의 형성율을 98.4%까지 높일 수 있었다. 형성된 신초는 $0.1mg/{\ell}$ IBA가 첨가된 1/2MS배지로 옮겼을 때 4주 후 최대 발근율을 보여주었다.
The effect of sodium sulphate on shoot induction and multiple shoot formation from nodal explants of Vitex negundo L. was tested on Murashige and Skoog's (MS) medium fortified with different auxins, cytokinins and sucrose. Highest percentage $(97.78\%)$ of explants for shoot induction and multiple shoot (20.68/explant) production were observed in the combination treatment of $N^6-Benzyl$ adenine (BA) $(17.80\;{\mu}M/L)$, ${\alpha}-Naphthalene$ acetic acid (NAA) $(2.15\;{\mu}M/L)$ and $5\%$ sucrose supplemented with 100 mg/L sodium sulphate. In vitro raised shoots were rooted on the half-strength MS medium fortified with different concentrations of NAA, Indole-3-acetic acid (IAA), and Indole-3-butyric acid (IBA) alone and in combinations. Among the treatments, $4.90\;{\mu}M/L$ of IBA was found most effective $(95.56\%)$ in inducing roots. The rooted plantlets were shifted to glasshouse for acclimatization and later transferred to the field with cent percent survival. Furthermore, in vitro flowering was observed in the shoots cultured on MS medium supplemented with BA $(8.90\;{mu}M/L)$ and NAA $(1.61\;{\mu}M/L)$.
미나리아재비의 약을 배양하여 미숙화분 유래의 식물체를 획득하는데 있어서 생장조절제의 종류와 농도 및 배양 적기를 구명하기 위해 화분의 발육단계별로 캘러스, 배발생및 식물체 재분화에 미치는 영향을 조사하였다. 캘러스 및 배발생에는 2,4-D 및 kinetin 처리보다 NAA 및 BA처리에서 효과적이었으며 특히 0.5 mg/L NAA와 1.0 mg/L BA 처리구에서 가장 왕성하였다. 화분의 발육과정중 1핵성과 초기2핵성의 pollen mitosis 전후기인 개화 3일전의 약의 발육상태가 캘러스, 배발생 및 식물체 재분화에 적합하였다. 화분유래의 배발생은 영양세포의 계속적인 분열에 의해 이루어졌다.
The establishment of an efficient protocol for plant regeneration and micropropagation from leaf explant cultures of Chicory, Cichorium intybus L. var. sativus. is reported. Callus formation rate appeared 100% from explant in all growth regulators, but calli formed in the prensence of naphthaleneacetic acid (NAA) were appeared very compact and non-embryogenic state. The regenerated shoots were obtained from leaf explant cultures on solid MS medium containing different concentrations of cytokinins and auxin. The highest number of shoots (5.7) per explant and shoot growth (2.8cm) was obtained on MS medium containing 0.1 mg BAP L$^{-1}$ and 0.1 mg NAA L$^{-1}$ . Indole acetic acid was the most suitable auxin for root formation among three auxins tested. 2,4-D had no effect on shoot and root formation.
Ginger is an important monocotyledonous plant belonging to the family Zingiberaceae. The objective of this study was to investigate the regeneration potential of ginger using leaf base explants. Auxins such as 2, 4-D and NAA in combination with BA were used for initiation of callus. Different combinations of both ammonium ($NH^{4+}$) and nitrate ($NO^{3-}$) were also studied for efficient callus production. High frequency of white friable calli was observed on modified Murashige and Skoog (MS) medium supplemented with 2.0 mg/L 2, 4-D, 0.5 mg/L NAA and 0.5 mg/L BA. The highest shoot induction (92.33%), shootlets number ($7.33{\pm}0.33$) and length ($88.33{\pm}4.40$) mm were achieved on MS media containing 0.5 mg/L BA. Regenerated shoots were transferred to in vitro rooting media containing 1.0 mg/L IBA. Afterwards, plantlets with well-developed root and shoot system were subjected to a twostep hardening process. 71% of plantlets survived after secondary hardening without any abnormal morphology.
Smitha Devi, Padmavathi Amma Somasekharan Nair;Hemanthakumar, Achuthan Sudarsanan;Preetha, Thankappan Suvarna
Journal of Plant Biotechnology
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제49권3호
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pp.230-239
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2022
Holostemma annulare (Family Asclepiadaceae) is an invaluable vulnerable medicinal plant; the root tubers are used in Ayurveda medicine and by folk healers to treat various ailments. In this study, Schenk and Hildebrandt medium fortified with the cytokinins 6-benzyl adenine, kinetin, and auxins, including indole 3-butyric acid, indole 3-acetic acid, α-naphthaleneacetic acid, and 2,4-dichlorophenoxyacetic acid, were checked for their efficiency on root tuber induction from different explants. Adventitious root tubers were more successfully induced from in vitro leaf segments and shoots when cultured in Schenk and Hildebrandt medium supplemented with 0.5 mg/l of α-naphthaleneacetic acid. In addition, preliminary phytochemical analysis of in vitro root tubers and identification of different secondary metabolites were conducted. Thin layer chromatography and high performance thin layer chromatography analysis of the crude methanolic extracts of the in vitro root tuber identified the presence of lupeol, a bioactive triterpene. Adventitious root tuber induction offers a novel method for the in vitro production of bioactive metabolites that can be scaled up by bioreactors, thus ensuring the conservation and sustainable utilization of H. annulare. The study warrants further scale-up production and pharmacological investigation that can be extended for pharmaceutical needs.
경작지 근권토양에서 식물생장촉진물질인 auxin라 항진균물질을 동시에 생산하는 농업용 미생물제제로 사용할 PGPR 균주를 선발하고 동정하였다. 경북 경산 일대의 다수확 밭토양의 근권토양에서 균주를 선발하고 그 중 auxin 생산성이 높은 2균주 K36, N21를 분리하였다. 이들 균주를 동정한 결과 K36은 Pantoea agglomerans이고 N21은 Pseudomonans fulva로 동정되었다. 선발된 균주의 식물생장촉진능을 in vivo 녹두발아촉진검사법으로 확인하였으며, 식물병원진균에 대한 길항력을 확인하였다. 배양조건에 따른 auxin 생산성을 조사한 결과 K36 균주는 $pH\;7.5,\;35^{\circ}C$, 37시간에서 최대로 나타났고, N21균주는 $pH\;7.5,\;35^{\circ}C$, 20시간에서 최대값을 나타내었다.
Jatropha curcas L. (Physic nut) is a commercially important non-edible oil seed crop known for its use as an alternate source of biodiesel. In order to investigate the morphogenic potential of immature embryo, explants from four developmental stages were cultured on medium supplemented with combinations of auxins and cytokinins. It was found that the size of embryo is critical for the establishment of callus. Immature embryos (1.1-1.5 cm) obtained from the fruits 6 weeks after pollination showed a good response of morphogenic callus induction (85.7%) and subsequent plant regeneration (70%) with the maximum number of plantlets (4.7/explant) on Murashige and Skoog's (MS) medium supplemented with IBA (0.5 $mg\;l^{-1}$) and BA (1.0 $mg\;l^{-1}$). The above medium when supplemented with growth adjuvants such as 100 $mg\;l^{-1}$ casein hydrolysate + 200 $mg\;l^{-1}$ L-glutamine + 8.0 $mg\;l^{-1}$$CuSO_4$ resulted in an even higher frequency of callus induction (100%). Plant regeneration (90%) with the maximum number of plantlets (10/explant) was achieved on MS medium supplemented with 500 $mg\;l^{-1}$ polyvinyl pyrrolidone + 30 $mg\;l^{-1}$ citric acid + 1 $mg\;l^{-1}$ BA + 0.5 $mg\;l^{-1}$ Kn + 0.25 $mg\;l^{-1}$ IBA. It was observed that plantlet regeneration could occur either through organogenesis of morphogenic callus or via multiplication of pre-existing meristem in immature embryos. The age of immature embryos and addition of a combination of growth adjuvants to the culture medium appear to be critical for obtaining high regeneration rates. Well-developed shoots rooted on half-halfstrength MS medium supplemented with 0.5 $mg\;l^{-1}$ IBA and 342 $mg\;l^{-1}$ trehalose. The rooted plants after acclimatization were successfully transferred to the field in different agro-climatic zones in India. This protocol has been successfully evaluated on five elite lines of J. curcas.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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