• 미생물학회지
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• 제27권3호
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• pp.216-220
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• 1989

Aamylase 활성이 높은 Aspergillus oryzae와 알콜발효능이 있는 Saecharomyccs cerevisiae의 원형질체융합을 위한 기초연구로서, amylase 활성이 있는 A. oryzae의 종내원형질체를 융합시켜 이들융합체의 특성을 조사하였다. 영양요구성 돌연변이 균주의 mycellia로부터 원형질체를 생성하기 위해서는 lytic enzyme으로 Novozyme 234가 효과적이였고 완충용액의 pH는 5.5에서 6.0사이가 최적이었다. F usogen으로 30% PEG4,000를 사용하였을 때 효과적으로 원형질체의 융합이 이루어졌으며 이들 융합체의 대부부은 heterokaryons이었다. 원형질체의 형태와 PEG처리후 융합되는 과정을 광학현미경으로 관찰하였다. 원형질체의 재생율은 재생배지와 균주에 따라 1.46~14%이었고, A. oryzae 종내융합율은 0.12-0.16이었다. 융합체의 DNA함량을 조사한 결과 모균주보다 약 1.5배정도 증가됨을 보였고 융합체들의 amylase 활성은 융합체에 따라 다소 차이를 냐타내었다. 가장 높은 amylase 활성을 나타낸 융합체들의 amylase 활성은 융합체에 따라 다소 차이를 나타내었다. 가장 높은 amylase 활성을 나타낸 융합체 F2-2에 있어서는 야생균주 ATCC 22788의 그것보다 amylase 활성이 약 1.5배 가량 높았다.

• 한국균학회지
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• 제42권4호
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• pp.282-288
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• 2014

본 연구에서는 순창지역에서 만들어지는 장류에서 곰팡이를 분리하고 동정하여 보다 안전하고 기능성이 높은 발효제품을 위한 균주를 확보하고자 하였다. 순창지역에서 생산되는 장류 제품으로부터 곰팡이를 분리하여 ${\beta}$-tubulin 유전자 분석 통해 10개의 균주가 Aspergillus oryzae/flavus complex임을 알 수 있었다. 보다 정확한 동정을 위하여 아플라톡신 클러스터 유전자 중에 하나인 omtA의 염기서열을 증폭하여 A. oryzae와 A. flavus 표준 균주의 omtA 서열과 함께 계통 분류한 결과, A. oryzae의 표준 균주와의 유연관계가 높음을 알 수 있었다. 또한 norB-cypA 사이의 염기서열을 증폭한 결과 500 bp이 증폭 산물이 확인되었는데 이는 표준 균주인 A. oryzae의 norB-cypA 사이의 염기서열 증폭 산물과 동일한 크기임을 확인할 수 있었다. A. oryzae로 확인된 10균주를 활용하여 코지를 제조하고 ${\alpha}$-amylase 활성과 protease 활성을 측정하였다. Protease 활성은 6, 13, 17, 27, 37, 그리고 38 균주로 제조된 코지는 대조구(시판되고 있는 종균으로 제작한 코지)보다 2배 정도 높은 protease 활성을 보였으며, ${\alpha}$-amylase 활성은 257~320 U/mL로 측정되었다. 식품안전성을 위한 아플라톡신 분비 확인 결과, 63번 균주로 제조된 코지를 제외한 모든 코지에서 아플라톡신을 만들지 않는 것으로 확인되어, 순창에서 분리된 A. oryzae는 추후 메주 접종균으로 개발할 수 있음을 보여주었다.

• 미생물학회지
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• 제31권1호
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• pp.54-62
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• 1993

Intracellular adenosine deaminase (ADA) from Aspergillus oryzae was purified using ammonium sulfate fractionation, a DEAE-Sephadex A-50 anion exchange chromatography, an ultrafiltration using a PM 10 membrane and two times of Sephadex G-100 gel filtration chromatography. The enzyme was purified 151 fold with a 9% recovery. Purified enzyme gave a single protein band with a molecular weight of 105,000 delton. The enzyme was reasonably stable. The enzyme activity was kept even after 1 hr incubation at 55.deg.C, but decreased significantly at 60.deg.C. The pH optimum was found to be from 6.5 to 7.5. Among tested compounds, the substrate activity was found with adenosine, adenine arainofuranoside, formymcin A, 2'-deoxyadenosine, 3'-deoxyadenosine, 2', 3'-isopropylidene adenosine, 2,6-diaminopurine deoxyriboside, .betha.-nicotinamide adenine dinucleotide (reduced form), 6-chloropurine riboside, 2'-adenine monophosphate (AMP), 3'-AMP and 5'-AMP. The values of Km of adenosine and 2'-deoxyadenosine were calculated to be 500 and .$710\mu$m, respectively. ADA was sensitivite to $Zn^{2+}$, $^Cu{2+}$ and $Fe^{3+}$, p-chloromercuribenzoate and mersalyl acid inactivated the enzyme. The activity of enzyme was not changed when ADA was incubated with dithiothreititol, 2-mercaptoethanol, N-ethylmaleimide, iodoacetic acid and iodoacetamide.

• 미생물학회지
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• 제27권3호
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• pp.221-224
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• 1989

녹말로부터 에탄올을 직접 생산하는 균주를 개발하고자 amylase 활성이 높은 Aspergillus oryzae와 알콜발효능이 있는 Saccharomyces cerevisiae의 원형질체를 융합하였다. 이들의 융합을 유도하기 위해서 fusogen으로 35% PEG 4000을 사용하였으며, 융합체의 선별을 위한 유전적 지표로는 아미노산 요구성을 사용하였다. 융합률은 $4.6\times 10^{-6}$이었다. 선별된 융합체들은 효모의 형태였으며 amylaseghkf성을 나타내었고, 에탄올을 생사하였다. 그리고 이들 성질 중에서 형태는 후세대에도 안정하게 유지되었으나 녹말로부터의 알콜 생성능은 현저히 감소하였다. 비록 포도당 배지에서의 융합체들의 알콜 생산은 S. cerevisiae의 0.5배에 지나지 않았으나, Prototroph인 S. cerevisiae와는 달리 이들은 녹말로부터 직접 에탄올을 생산할 수 있었다.

• 생명과학회지
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• 제16권1호
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• pp.136-140
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• 2006

Ginseng was fermented by Aspergillus oryzae to search metabolites on the basis of increased biological activity and modified structure. From this research, two biotransformed compounds (WC2-2-1 and WC2-2-2) were detected and isolated through several chromatographic techniques. WC2-2-2 was confirmed to biologically active compound K by TLC, HPLC, and mass spectroscopy, while WC2-2-1 was going to be identified until now. In biological activity, both WG2-2-1 and WG2-2-2 exhibit the cytotoxicity on PC-3 cells, but WG2-2-2 was more active than WG2-2-1. It is supposed that WG2-2-1 is an intermediate metabolite transforming to final WG2-2-2, compound K.

• 한국식품과학회지
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• 제31권6호
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• pp.1570-1576
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• 1999

고추장의 품질 향상과 전통 고추장과 유사한 관능적 특성을 갖는 고추장을 만들기 위해 재래식 전통 고추장에서 분리한 Bacillus licheniformis 균주와 공장에서 대량 생산을 위해 개량해온 Aspergillus oryzae와 비교적 호염성이며 알코올 발효 능력이 우수한 Saccharomyces rouxii를 혼용하여 고추장을 담근 후 180일까지의 숙성 기간 중 고추장의 품질 변화를 조사하였다. 고추장 숙성 중 유리당의 함량은 효모 첨가구가 다른 시험구에 비해 약간 적었으며 가장 많이 함유된 유리당은 glucose였다. 알코올 함량에 있어서는 ethanol이 현저하게 많았으며 아미노산성 질소는 A. oryzae 단용구보다 B. licheniformis와의 혼용구에서 높은 함량을 보였으며 숙성 30일에서 60일 사이에 급격히 증가하였고 90일 이후에는 감소하였다. 고추장 매운 맛의 주성분인 capsaicin 함량은 숙성기간이 경과해도 거의 변화가 없는 것으로 나타났다. 90일 및 180일 숙성된 고추장의 관능 검사 결과 A. oryzae와 B. licheniformis 및 S. rouxii를 혼용하여 제조한 고추장이 맛과 향에서 가장 좋은 것으로 평가되었다. 따라서 전통고추장과 유사한 관능적 품질을 갖는 고추장을 제조하기 위해서는 고초균과 효모를 혼용하여 koji를 제조하고 숙성시키는 것이 바람직한 방법이라 하겠다.

• KSBB Journal
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• 제14권3호
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• pp.259-263
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• 1999

물고기 기름에 대한 Aspergillus oryzae 유래의 Lipolase-100T의 가수분해 특성을 규명하였다. Lipolase-100T는 트리글리세라이드의 1과 3의 위치에 작용하여 이 위치에 결합되어 있는 아실 체인을 유리지방산으로 가수분해시키는 1,3-위채특이성을 보였다. 또한 Lipolase-100T는 물고기 기름을 구성하는 다중불포화지방산 보다 포화지방산을 쉽게 가수분해시키는 특성도 나타내었다. 이 특성으로 인하여 가수분해 시간에 따라서 생성되는 글리세라이드 혼합물내의 다중 불포화 지방산중 n-3 PUFAs인 C16:4, C20:5 및 C22:6의 농도는 모두 증가하였으며 특히 C22:6의 농도증가가 가장 뚜렷하였다. 이 결과로부터 물고기 기름을 구성하는 n-3 PUFAs는 트리글리세라이드의 2번 위치에 결합하고 있음을 알 수 있었다. 지방산의 결합위치특이성과 Lipolase-100T 1,3-위치특이성으로 인하여 Lipolase-100T를 반응물의 0.4 wt%사용하여 물고기 기름을 120시간 가수분해 시켰을 때 생성된 글리세라이드 혼합물내의 n-3 PUFAs농도는 50 wt%까지 상승하였다.

• 동의생리병리학회지
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• 제38권1호
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• pp.16-21
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• 2024

Haepyoijin-tang and its main components have been used for phlegm, cough and dyspnea. Using a respiratory inflammation model, we intend to reveal the anti-inflammatory effect and pharmacological mechanism of Haepyoijin-tang. We induced the respiratory inflammation model by Aspergillus oryzae protease and ovalbumin administration. Female Balb/c mice (8 weeks old) were classified into four groups as follows: saline control group, aspergillus oryzae protease and ovalbumin induced respiratory inflammation group (vehicle), inflammation with Haepyoijin-tang (200 mg/kg) administration group, inflammation with dexamethasone (5 mg/kg) administration group (n=7). To identify the anti-inflammatory effects of Haepyoijin-tang water extracts, we measured the inflammatory cell number in bronchoalveolar lavage fluid (BALF) and total live lung cell number. In addition, we checked eosinophil ratio and number in BALF. And Interleukin (IL)-5 level was also measured in lung cell culture supernatant. To confirm the mechanism of anti-inflammatory effects, we analyzed the activated helper T cell (CD4⁺CD25⁺ cell) and Th2 cell (CD4⁺GATA3⁺ cell) ratio and number in lung by using flow cytometry. Finally, we attempted to confirm the immune mechanism by measuring the ratio and number of regulatory T cells (CD4⁺Foxp3⁺ cell). Haepyoijin-tang extracts treatment diminished inflammatory cell, especially, eosinophil number in BALF and total live lung cell number. Moreover, IL-5 level was reduced in Haepyoijin-tang treated group. Surprisingly, Haepyoijin-tang extracts administration not only decreased the activated helper T cell but also Th2 cell population in lung. Additionally, regulatory T cell population was increased in Haepyoijin-tang administration group. Our findings proved that Haepyoijin-tang extract have anti-inflammatory efficacy by suppressing Th2 cell activation and promoting regulatory T cell population.

• KSBB Journal
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• 제10권1호
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• pp.38-45
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• 1995

Aspergillus oryzae에서 A. nidulans의 glyceral d dehyde-3-phosphate dehydrogenase (gpdA)와 trpC, prmoter의 발현 능력 을 E. coli lacZ gene fusion을 이용하여 비교.분석하였다. A. oryzae 내에서 발현된 E. coli $\beta$galactosidase의 specific activIty를 조사하여 본 결과, gpdA promoter를 가지는 transformant들 에서는 2,000unit/ug of protem 정도의 activity를 보이는 반면, trpC, promater를 가지고 있는 transformant들에서는 10.5~52.3unit/ug of protein 정도의 activity를 보였다. 이 결과로부터 A. oryzae 내에서 A. nidulans의 gpdA promoter가 trpC, promoter에 비해 70 배 정도 더 강한 발현 능력을 보이고 있음을 알 수 있다. Western blot 분석에서도 gpdA promoter를 가지고 있는 transf ormant에서 더 많은 E. coli $\beta$-galactosidase가 발현된 것 을 보여 주고 있다. 또한 southern blot 분석에서는 이러한 강한 발현이 transform된 plasmid의 copy number와 상관 없음을 보여주고 있다.

• Journal of Nutrition and Health
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• 제9권3호
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• pp.18-25
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• 1976

고추의 저장중에 미생물 오염에 의해서 일어나는 신미성분(辛味成分)의 변화에 대하여 검토하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. capsaicin이 함유된 배지에서 생육이 강하고 분해력(分解力)이 강한 우수균주로서 Aspergillus oryzae, Aspergillus sp. KF-7 를 오염된 고추로 부터 얻었다. 2. 건조균체량(乾燥菌體量)은 capsaicin의 농도가 $2{\sim}3{\mu}g/ml$일 때는 약간 증가하였지만 농도가 높아지면 감소하였다. 3. 배지중에 첨가한 capsaicin은 일주일 후에는 반으로 감소되고 2주일 후에는 거의 소실되었고 $30^{\circ}C$의 온도, 그리고 $pH\;7{\sim}9$일 때에 분해 소실되는 양(量)이 가장 많았다. 4. 고추분말로 된 고체배지에서 Aspergillus sp. KF-7은 거의 생육하지 못하였고 Aspergillus oryzae는 수분함량이 13%일때 가장 잘 생육하였으며 배양 40일 후에는 capsaicin의 잔존률(殘存率)이 45%가 되었다. 5. 고추씨로 된 고체배지에서 두 균주가 생육하여 배양 4주(週) 후에는 각각 55%, 38%의 capsaicin잔존률(殘存率)을 나타내었다.