돼지의 장 및 분변에서 분리한 14종의 유산균으로부터 항세균 활성물질을 분석하였다. 각 균주의 세포배양액을 대상으로 여러 종류의 단백질 분해효소와 열, 알칼리 처리 등을 수행한 후 활성도를 조사한 결과, 효소 및 열처리 시료에서는 활성도가 유지되었으나, 1M의 NaOH로 중화 처리한 시료에서는 활성도가 사라짐에 따라, 항세균 활성물질이 단백질성이라기보다 유기산일 가능성이 큰 것으로 나타났다. Sep-pak $C_{18}$ Cartridges을 이용한 음이온 추출실험과 Bio-LC system을 이용한 high performance anion exchange chromatography를 실시하여 물질을 정제한 결과, 주요 활성물질로 옥살산, 구연산, 젖산 및 초산 등, 4종류의 유기산이 검출되었다. 이중 젖산은 각 균주에 따라 전체 유기산의 54~77%를 차지하는 것으로 나타나 유기산 중에서도 일차적인 항세균 활성물질일 것으로 추정된다.
This study evaluated the antimicrobial effects of meat processing-related organic acids on Burkholderia thailandensis (Burkholderia pseudomallei surrogate) with different water activities. B. thailandensis KACC12027 (4 log CFU/mL) was inoculated in microwell plates containing tryptic soy broth pH-adjusted to 4, 5, 6, and 7 with ascorbic acid, citric acid, and lactic acid and with water activities adjusted to 0.94, 0.96, 0.98, and 1.0 with NaCl, followed by incubation at $35^{\circ}C$ for 30 h. The optical density (OD) of the samples was measured at 0, 3, 6, 12, 24, and 30 h at 595 nm to estimate the growth of B. thailandensis. Growth of B. thailandensis was observed only at water activity of 1.0. In general, more bacterial growth (p<0.05) was observed at pH 6 than at pH 7, and the antimicrobial effects of the organic acids on B. thailandensis were in the following order: Ascorbic acid > lactic acid > citric acid after incubation at $35^{\circ}C$ for 30 h. These results indicate that organic acids in meat processing-related formulations should be useful in decreasing the risk related to an emerging high risk agent (B. pseudomallei).
Acceptance of antibiotic growth promoters (AGP) in agricultural animal production is rapidly disappearing. Both government regulations and consumer preference are driving this change. Producers in any country that seek export markets will be forced to give up AGP if they are to sell to the EU and many other markets. This report will first review the history of AGP use in the animal industry and the concerns about development of antimicrobial resistance. A description of the development and structure of the gut and how it is affected by AGP administration will conclude with results of studies to replace AGP with antimicrobial organic acids.
본 연구에서는 다양한 유래에서 분리한 병원성 세균 S. aureus에 대한 5종의 유기산(acetic, propionic, citric, malic, lactic acid)과 3종의 정유성분(carvacrol, thymol, eugenol) 및 그 밖의 자연유래 항균물질(nisin, cinnamic acid)의 항균효과, 최소저해농도 및 각각의 최소사멸농도를 연구하였으며, 이를 바탕으로 항균물질간의 혼합처리 시 항균효과를 평가함으로써 이와 같은 자연유래 항균물질들의 화학합성 보존제 대체 가능성을 연구하고자 하였다. Agar disc diffusion실험을 통해 propionic acid (1.38 cm) > nisin (1.00 cm) > thymol (0.98 cm) > carvacrol (0.90 cm) 순으로 S. aureus에 대해서 높은 항균력을 나타내었다. 최소저해 농도는 carvacrol (0.06%), thymol (0.06%), nisin (0.06%)이 항균효과가 가장 좋은 것으로 나타났다. 그 이외의 항균물질의 경우 eugenol (0.13%), propionic acid (0.23%), acetic acid (0.38%), citric acid (0.60%), malic acid (1.66%) 순으로 효과가 나타났다. 이를 바탕으로 항균물질간의 혼합 처리시 propionic acid와 citric acid의 결합처리 효과가 가장 높게 나타났다. 자연유래 항균물질은 합성 보존료에 비해 항균활성이 미약해 보존료의 이용이 어렵지만 본 연구결과 자연유래 항균물질들의 혼합처리를 통해 시너지 효과를 알 수 있었다. 따라서 자연유래 항균물질의 혼합처리를 통한 연구가 계속적으로 이루어진다면 인공 합성보존료를 대신하는 천연 보존료의 상업적 이용이 가능할 것으로 사료된다.
Minimal inhibitory concentrations (MIC) and antimicrobial effects of glycerol monolaurate (monolaurin) and organic acids, either alone or in combination, against Escherichia coli O157:H7 in tryptic soy broth were determined. MIC values of monolaurin(ML), acetic (AA), citric (CA), lactic (LA) and hydrochloric acid (HCl) were 300$\mu\textrm{g}$/mL (0.03%), 1250$\mu\textrm{g}$/mL(0.125%), 5000$\mu\textrm{g}$/mL(0.5%), 2500$\mu\textrm{g}$/mL(0.25%) and 2500$\mu\textrm{g}$/mL(0.25), respectively. When 150$\mu\textrm{g}$/mL of ML was combined with 50$\mu\textrm{g}$/mL AA, 250$\mu\textrm{g}$/mL HCl and 125$\mu\textrm{g}$/mL LA, the combined agents did not increase the inhibitory effect of the most active single compound alone. This result indicates that there was little interaction between ML and A, HCl and LA. However, the combination of 150$\mu\textrm{g}$/mL ML and 250$\mu\textrm{g}$/mL CA synergistically inhibited growth of E. coli O157:H7. The present study showed that the nature of combined antimicrobial response against E. coli O157:H7 was complex, but this information would be useful for determining interaction that could compromise effectiveness in food systems.
The stressful physiological and environmental conditions around weaning often promote the proliferation of pathogens in the digestive tract of piglets resulting in diarrhoea and reduced daily weight gain. Typical dietary practices to maintain growth performance and health have led to an increased use of antimicrobial growth promoters. Due to the advanced ban of antibiotics in pig production, new concepts have been developed to secure animal health and growth performance, feed efficiency, and product quality as well. Several naturally occurring compounds seem to beneficially affect the composition and activity of the microflora in the gastrointestinal tract (GIT) of pigs. These are, among others, organic acids, probiotics, prebiotics, and enzymes. Organic acids are already widely used, especially in pigs, due to their positive effects on GIT health and growth performance. Probiotics have been shown to be effective against diarrhoea though effects may be dependent on diet composition and environmental conditions. Prebiotics may influence composition and activity of the intestinal microflora. Additionally, pre- and probiotics may exert positive influences on immune response, whereas enzymes may enhance feed digestibility by breaking down anti-nutritional factors. In the following, the focus will be directed to the role of organic acids, probiotics, prebiotics, and feeding enzymes as potential modulators of GIT health.
The dried Prunus mume, an alkaline food abundant in organic acids (citric acid, malic acid and tartaric acid), has been largely used in both folklore remedies and Chinese herbal medicine for a long time. This study was performed to investigate the antimicrobial activity of the dried Prunus mume. The fractionation of the methanol extracts from Prunus mume was conducted using petroleum ether, chloroform, ethyl acetate and butanol, respectively. The antimicrobial activity of the Prunus mume extracts was then determined against food-borne pathogens using a paper disc method. The ethyl acetate extract showed the strongest antimicrobial activity against the eigth food-born pathogens used in this present study. Diaion HP 20 column chromatography was performed to remove some sugars that might inhibit the antimicrobial activity of Prunus mume. The strongest antimicrobial activity of ethyl acetate fraction of Prunus mume was shown against Staphylococus aureus. The growth inhibition curve was determined using ethyl acetate extracts of Prunus mume against Staphylococus aureus, which showed the growth inhibition up to 72 hours at 1,000 ppm concentration.
Automated turbidometer, Bioscreen(Labsystem)을 이용하여 tryptic soy broth에 에탄올(3%, 5%. 7%(v/v)) 및 유기산( 초산, 구연산 .젖산, 피로피온산 및 주석만(W/V))을 단독으로 첨가하거나, 혼합하여 Staphylococcus aureus, Salmonella typimurium, Escherichia coil O157 : H7, Listeria monocytogenes의 증식 곡선의 면적(AREA)과, 최대성장율(MGR), MGT(minimum generation time), DT(detection time)를 조사하였다. 모든 균주는 7% 에탄올에서 24 시간 동안 전혀 증식하지 못했으나 0.1% 유기산에서는 미생물의 종류와 유기산의 종류에 따라 다양한 양상을 보였다. S. aureus의 경우 프로피온산이 뚜렷한 증식 저해 효과를 나타내었으며, S. typhimurium의 경우 초산이 비교적 높은 효과를 보였다 L. monocytogenes에 대해서는 프로피온산, 주석산 및 젖산이 뚜렷한 증식 저해 효과를 보인 반면, E. coil O157 : H7의 경우에는 초산과 프로피온산이 효과가 있었다. 1%· 에탄올과 0.01% 유기산을 병용했을 때 S. typhimurium은 AREA에서 2% 에탄올 및 0.05% 초산의 증식 저해율과 비슷한 효과를 보였으며, L. monocytogenes는 AREA에서 0.05%프로피온산 및 MGR, MGT, DT에서 2% 에탄올과 비슷한 저해율을 보였다. S. aureus은 0.01% 프로피온산을 단독으로 사용했을 때가 오히려 0.01% 프로온피산과 1% 에탄올을 동시에 처리한 경우보다도 월등히 증식 저해 효과를 나타내었으며, E. coil O157 : H7은 1% 에탄올과 0.01% 유기산을 동시에 사용해도 AREA를 제외하고는 증식 저해를 받지 않았다.
The culture filtrate of Lentinula edodes shows potent antimicrobial activity against the plant pathogenic bacteria Ralstonia solanacearum. Bioassay-guided fractionation was conducted using Diaion HP-20 column chromatography, and the insoluble active compound was not adsorbed on the resin. Further fractionation by high-performance liquid chromatography (HPLC) suggested that the active compounds were organic acids. Nine organic acids were detected in the culture filtrate of L. edodes; oxalic acid was the major component and exhibited antibacterial activity against nine different phytopathogenic bacteria. Quantitative analysis by HPLC revealed that the content of oxalic acid was higher in the water extract from spent mushroom substrate than in liquid culture. This suggests that the water extract of spent L. edodes substrate is an eco-friendly control agent for plant diseases.
본 연구는 신선편이 양상치를 대상으로 전해수와 유기산의 단독 또는 병용처리에 의한 위해미생물의 살균효과를 조사하였다. 산성전해수는 액상배지에서 L. monocytogenes를 60초 내에 완전히 사멸하였으나, 알칼리전해수는 약 1.7 log CFU/g 정도 감소하였다. 그러나 L. monocytogenes를 접종한 양상치에서 산성전해수는 현저하게 살균력이 감소하여 3분 침지시 약 2.5 CFU/g의 감소를 나타내었으나 알칼리전해수는 산성전해수와 거의 살균력의 차이가 없었다. 한편, L. monocytogenes에 오염된 양상치를 전해수와 유기산 단독 또는 병용처리 하였을 때 무처리구에 비하여 산성전해수와 알칼리전해수는 약 2 log CFU/g 정도의 감소를 나타냈으며, $1\%$ acetic acid, lactic acid, citric acid 및 ascorbic acid를 처리하였을 경우 각각 1.52.5 log CFU/g의 감소를 나타냈으나, 산성전해수와 알칼리전해수에 $1\%$ 유기산을 병용처리 하였을 경우 약 2.63.7 log CFU/g의 현저한 감소를 나타내었다. 특히 산성전해수와 알칼리전해수 모두 $1\%$ citric acid와 병용처리 하였을 때 가장 강한 살균력을 나타내었다. 양상치에 오염된 총균수, 효모 및 곰팡이의 경우도 L. monocytogenes에 오염된 양상치의 살균력과 비슷한 경향을 나타내었다. 또한, L. monocytogenes를 접종한 양상치를 전해수 처리한 후 온도별로 저장하면서 생육변화를 측정한 결과, 병용처리구에서 현저하게 생육이 저해되는 것으로 나타나 양상치를 세척시 알칼리전해수와 $1\%$ citric acid를 병용처리하면 총균수는 물론 L. monocytogenes에 의한 오염방지에 매우 효과적이었다. 한편, SEM 결과, 양상치에 오염된 L. monocytogenes 는 알칼리수와 $1\%$ citric acid의 병용처리구에서는 현저하게 세포막이 파괴되어 세포가 사멸하는 것으로 나타났다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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