Purpose: Adipose-derived stromal cells (ADSCs) are multipotent cells that have been found to promote wound healing through the process of angiogenesis and reepithelialization. Generally, it is well known that the antigenicity of ADSCs doesn't affect stem cell therapy. In this study, we investigated the effect of allogeneic ADSCs in the wound healing process by applying allogeneic ADSCs on the wound healing splint model of mice. Methods: Adipose tissue was harvested from the epididymal fat pads of BALB/c and C57BL/6 mice. Twenty four mice BALB/c were divided into three groups; control, isogeneic, and allogeneic groups. Two full thickness defects with 6 mm diameters were created on the back of BALB/c mice. $1{\times}10^6$ ADSCs from BALB/c mice were applied on the isogeneic group. In the allogeneic group, ADSCs from the C57BL/6 mice were applied. No cells were applied to the control group. The sizes of the wounds were evaluated in 3, 5, 7, 10, and 14 days after the wounds were applied, and tissues were harvested in 7 and 14 days for histological analysis. Results: Wound healing rates had showed significant increase in 10, and 14 days when the isogeneic group was compared to the control group, but the allogeneic group showed significantly decrease compared to the isogeneic group (p<0.05). Histological scores in the isogeneic group were significantly high, but significantly lower in the allogeneic group when compared to the isogeneic group in 2 weeks (p<0.05). In the isogeneic group, thick inflammatory cell infiltration with abundant capillaries were observed in 1 week, and thick epithelium with many large capillaries were observed in 2 weeks. Conclusion: When isogeneic ADSCs were applied to wounds, they presented a faster wound healing rate compared to controls and the allogeneic group. Unlike general stem cell therapy, these findings suggest that cell therapy targeted at enhancing wound healing may benefit from the use of ADSCs with identical antigenicity, as opposed to allogeneic or xenogenic ADSCs.
To study the antigenicity of BR92021(Vi polysaccharide typhoid vaccine), active systemic ana-phylaxis and passive cutaneous anaphylaxis were tested in guinea pigs. The groups were as follows: group I(low dose, 30 $\mu\textrm{l}$/kg), group II(high dose, 300 $\mu\textrm{l}$/kg), group III(300 $\mu\textrm{l}$/kg plus complete Freund's adjuvant), group IV(positive control, ovalbumin plus complete Freund's adjuvant) and group V(saline-treated control). Male Hartley guinea pigs at 7 weeks of age were sensitized subcutaneously with the test article or saline three times per week for three weeks(j.e., total 9 times). For groups III and IV, animals were sensitized subcutaneously with either the test article or ovalbumin plus complete Freund's adjuvant once per three week for 6 weeks(i.e., total 3 times). Twelve days after the last sensitization, the blood was collected from the sensitized animals for the passive cutaneous anaphylaxis test. In addition, the sensitized animals were subjected to the active systemic anaphylaxis test on fourteen days after the last sensitization by an intravenous challenge with either the test article or ovalbumin. In group I, mild(1/5) or moderate(4/5) symptoms of anaphylactic shock were observed. In group II, no sign(1/5), moderate(3/5) and severe(1/5) symptoms were observed. In group III, four animals of revealed moderate signs and one of 5 showed no signs of anaphylactic shock. In group IV, all 5 animals showed severe signs of shock. In group V, one of 5 revealed moderate and four of 5 showed no signs. The necropsy findings related to the active systemic anaphylaxis were observed in most animals of groups I to V In the passive cutaneous anaphylaxis test, the antiserum was diluted 10- to 5120- fold and was injected intradermally on the clipped back of recipient animals, followed by an intravenous challenge with either the test article or ovalbumin. No animals in groups I, II, III and V showed the positive reaction, whereas all animals in group IV, the positive control, showed the positive reaction at the dilution range of x1280 to x5120. Our results indicate that the test article, BR92021, may have weak antigenic potential in male guinea pigs.
Although there are still many technical difficulties to be overcome, recent advances in the molecular and cellular biology of gene transfer have made it likely that gene therapy will soon start to play an increasing role in clinical practice. However. safety issues are raised from vector system. It is not clear whether it is safe to incorporate genes into nuclear DNA. Little is known about the antigenicity of gene product which the immune system is encountering. In this review, some safety-related topics are introduced and discussed.
Dimethyl dimethoxy biphenylate (DDB) is an agent used to treat hepatits. DDB-S (DDB-soluble), a new DDB derivative, was synthsized to increase water solubility of the original DDB. In the present study, the antigenic potential of DDB-S was examined by active systemic anaphylaxis (ASA), passive cutaneous anaphylaxis (PCA) and passive hemagglutination (PHA) tests. The experimental groups consist of a low dosage group, a high dosage group, he group emulsified with Freund's complete adjuvant (FCA, ASA test) or an alum (PCA and PHA tests) and the macromolecule conjugate group emulsified with FCA or an alum. In the ASA test, all experimental groups showed negative responses whereas the positive control group given ovalbumin plus FCA showed severe anaphylactic responses. In the heterologous PCA test using mice and rats, positive responses were not detected in any of the experimental groups. In the PHA test, all experimental groups showed negative responses whereas the positive control group given ovalbumin plus an alum showed 512~2048 PHA titers. These results demonstrated that DDB-S does not have any antigenic potential. These can be utilized as a part of preclinical data for the development of DDB-S as an intravenous injection.
폐흡충 성충 표피의 구성 단백질의 분자량을 측정하고. 항원성을 갖는 표피 단백질을 규명하였다. 10개월 성충을 0.1% digitonin용액에 담궈 표피하 기저 막까지 박리하여 회수한 표피층을 초음파 분쇄하여 표피 단백질을 추출하였다. 표피 단백 질 추출액을 SDS-PAGE와 immunoblot으로 분석하였다 폐흡충 표피의 구성 단백질은 분자량이 각각 94. 74 (76-66). 62. 54. 44. 42. 38, 28, 26, 25 24. 17. 15.5. 13.5 IEDa으로 측정되었고. 94 kDa 단백질이 가장 주된 표피단백질이었다. 폐흡충 감염자 혈청을 사용한 immunoblot에서 항원성이 확인된 표피단백질의 분자량은 각각 94. 90. 78. 76. 74. 68. 65. 62. 60, 59. 54 kDa 이었다. 이 표피항원 단백질은 폐흡충증 혈청 10개중 7개에서 immunoblot 양성반응을 나타내었고. 7개 양성반응 혈청 각각에서 표피항원 단백질의 특이 항원성이 모두 관찰되었다. 그러나. 이들 폐홉충 표피항원은 간흡충란 양성자혈청과는 전혀 반응하지 않았다. 이상의 결과로. 폐흡충 표피 단백질중에서 분자량 94-54 kDa 사이의 것들이 폐흡충 특이 항원임을 알 수 있었고. 특히 94 kDa 단백질은 가장 양이 많은 대표적인 표피단백질이면서 아울러 특이항원성도 갖고 있었고. 양이 적은 표피단백질이었던 76. 66 kDa 단백질도 상대적으로 높은 특이 항원성을 보여주고 있음을 확인할 수 있었다.
This study was conducted to investigate antigenic potential of DA-3030, a recombinant human granulocyte-colony stimulating factor, in guinea pigs and mice. In the active systemic anaphylaxis test, the guinea pigs sensitized with 1.25 or 12.5 $\mu\textrm{g}$/head of DA-3030 alone did not show any anaphylactic reaction. In the homologous passive cutaneous anaphylaxis reaction, anti-DA-3030 antibody was not detected in guinea pigs sensitized with 1.25 or 12.5 $\mu\textrm{g}$/head of DA-3030 alone. On the other hand, the guinea pigs sensitized with 12.5 $\mu\textrm{g}$/heed of DA-3030 incorporated in Freund's complete adjuvant(FCA) or 1 mg/head of ovalbumin incorporated in FCA showed anaphylactic reaction. Anti-DA-3030 antibody was also detected in those guinea pigs. In immunodiffusion test using the sera sensitized with DA-3030 incorporated in FCA, precipitating antibodies were detected only in the sera sensitized with DA-3030 or DA-3030 incorporated in FCA showed. In 24-hour heterologous PCA reaction with sera of C57BL/6 mice immunized with 1.25 or 12.5 $\mu\textrm{g}$/head of DA-3030 alone, none of the sera showed positive reaction. But sera of the animals immunized with 12.5 $\mu\textrm{g}$/head of DA-3030 incorporated in aluminum hydroxide gel(Alum) or 5 $\mu\textrm{g}$/head of ovalbumin incorporated in alum showed positive PCA reaction. DA-3030 did not cause anaphylactic shock or passive cutaneous anaphylaxis in guinea pigs and mice when given alone although DA-3030 incorporated in FCA or Alum induced anaphylactic shock and passive cutaneous anaphylaxis. From these results, it may be concluded the DA-3030 does not induce systemic allergic reaction when administered alone in its clinical use.
콩은 우유, 계란과 더불어 우리나라에서 과민성 알레르기를 일으키는 대표적인 식품중의 하나로 손꼽힌다. 이에 본 연구에서는 콩에 알레르기 반응을 일으키는 환아의 혈청과 콩 단백질을 토끼에 면역하여 얻은 다클론 항체를 이용하여 immunoblotting 및 ELISA 방법을 통하여 가열 처리한 콩과의 반응성을 조사 함으로서 가열처리가 콩의 항원성 내지는 알레르기성에 미치는 영향을 조사하였다. 물중탕으로 1 시간까지 가열처리 후 SDS-PAGE에 의해 분리된 콩 단백질은 열처리에 따른 콩 단백질 band의 변화를 관찰할 수 없었다. 또한 다클론 항체와의 반응성 확인을 위한 immunoblot 방법에서도 열처리에 따른 반응성의 차이는 나타나지 않았으며 콩 알레르기 환자의 혈청 역시 가열 처리에 따른 콩과의 반응성의 차이가 ELISA법을 이용한 측정에서 관찰되지 않았다. 이상의 결과로 부터 콩 알레르겐의 항원성 및 알레르기성은 가열처리에 의해 변화되지 않음을 확인할 수 있었다.
BACKGROUND/OBJECTIVES: Due to its beneficial health effects, use of buckwheat has shown a continuous increase, and concerns regarding the allergic property of buckwheat have also increased. This study was conducted for evaluation of the hydrolytic effects of seven commercial proteases on buckwheat allergens and its allergenicity. MATERIALS/METHODS: Extracted buckwheat protein was hydrolyzed by seven proteolytic enzymes at individual optimum temperature and pH for four hours. Analysis was then performed using SDS-PAGE, immunoblotting, and competitive inhibition ELISA (ciELISA) with rabbit antiserum to buckwheat protein, and direct ELISA with pooled serum of 21 buckwheat-sensitive patients. RESULTS: Alkaline protease, classified as serine peptidase, was most effective in reducing allergenicity of buckwheat protein. It caused decomposition of the whole buckwheat protein, as shown on SDS-PAGE, and results of immunoblotting showed that the rabbit antiserum to buckwheat protein no longer recognized it as an antigen. Allergenicity showed a decrease of more than 50% when pooled serum of patients was used in ELISA. Two proteolytic enzymes from Aspergillus sp. could not hydrolyze buckwheat allergens effectively, and the allergenicity even appeared to increase. CONCLUSIONS: Serine-type peptidases appeared to show a relatively effective reduction of buckwheat allergenicity. However, the antigenicity measured using rabbit antiserum did not correspond to the allergenicity measured using sera from human patients. Production of less allergenic buckwheat protein may be possible using enzymatic hydrolysis.
Fowl red mite, Dermanyssus gallinae, is the most important ectoparasite affecting egg layers worldwide. More than 35 compounds have been used for fowl red mite control. Although some of them are efficient, several compounds are unsuitable in terms of food safety and environmental problems. Some compounds are efficient in theory but inadequate in practice. It is also expensive in material and labor to control effectively. Effective doses are very close to toxic doses and repeated treatment is required. Repeated, long term treatment of compounds on fowl red mite populations, may cause heritable resistance against the mites. In this study, antigenicity of fowl red mite and house dust mite, Dermatophagoides pteronyssinus, were identified by SDS-PAGE, silver staining, Western blotting and ELISA to investigate immune effects against fowl red mite using somatic antigens of fowl red mite and house dust mite. By SDS-PAGE, silver staining and Western blotting, several common antigens (110, 60, 56, 49, 46 kDa) of both fowl red mite and house dust mite were recognized. To identify immune effect of somatic antigens of fowl red mite and house dust mite, sixty white leghorn broilers(1 week old) were used. Among sixty white leghorn broilers, twenty were immunized with fowl red mite somatic antigens(Group I), twenty immunized with house dust mite antigens(Group II), and twenty were control group without antigen(Group III), respectively. After immunization, it was identified that antibody titers were increased both in group and II. Then all groups were challenged with fowl red mites. After 2 months, measurements of body weights, packed cell volume(PCV), ELISA OD values and numbers of mites were significant(p<0.05). These results suggest that fowl red mite and house dust mite, which are easy to collect and maintain, can be good vaccine candidates against fowl red mite in chicken.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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