To isolate antifungal substances from Korean radish (Raphanus Sativus L.) seeds, various purification techniques such as DE52 cellulose anion exchange, SP-Sephadex C-25 cation exchange, and Sephadex G-50 gel filtration chromatographies were used. The molecular masses of two purified R. sativus antifungal proteins (RAPs) were estimated to be about 6.1 kDa (RAP-1) and 6.2 kDa (RAP-2) by SDS-PAGE, and 5.8 kDa(RAP-1) and 6.2 kDa (RAP-2 by a gel filtration chromatography, respectively. Purified proteins RAP-1 and 2 clearly exhibited different growth inhibitory activities against other microorganisms like Candida albicans and Saccharomyces cerevisiae. Although they have similar molecular masses, both RAP-1 and 2 proteins are not identical because their microbial inhibitory actions were different. Therefore, RAP-1 could be a new antifungal protein when compared with the antifungal activities of 2S albumins, Rs-AFPs, Mj-AMPs, chitinase, glucanase, permatin, and ribosome inactivating proteins, all of which are anifungal proteins of plants.
In order to use the symbiotic bacteria from ethomophatogenic nematodes as a biological control agent for agriculture, the cultural condition for maintaining phase I and antifungal activity was investigated. Symbiotic bacteria (SB) 1 stain from nematodes were selected from the three strains isolated from entomopathogenic nematodes. The growth of the SB 1 strain in NB, TSB, TY and YS medium was higher than that of the SB 2 and SB 3 strain. The packed cell volume of the SB 1 strain was reduced in NB medium which showed radical pH change. Phase I of the SB 1 strain was maintained in TSB medium after being stored for 2 weeks at $4^{\circ}C$. Culture broth with the SB 1 strain in TSB medium for 6 days and 7 days showed antifungal activities against Rhizoctonia solani KACC 40142, Botrytis cinerea Pers. KACC 40854, and Botrytis cinerea Pers. KACC 41008. Culture broth with the SB 1 strain in TSB medium containing 100 mM L-proline for 5 days showed antifungal activities against Rhizoctonia solani KACC 40142, and Botrytis cinerea Pers. KACC 40854.
목초액의 농약 또는 식품보존제로서의 이용 가능성을 검토하기 위하여 소나무 및 참나무류 기계식 목초액을 대상으로 항진균 및 항세균 활성을 검정하였다. 그 결과 항진균활성의 경우 미정제 목초액은 0.5% 이상의 농도 에서, 정제 목초액은 1.0% 이상의 농도에서 공시 식물병원균 및 목재부후균의 생장을 완전히 억제하여 미정제 목초액이 정제 목초액보다 항균활성이 높은 것으로 나타났다. 그리고 참나무류 목초액이 소나무 목초액보다 항 균활성이 높아 탄화 원료인 수종에 따라 항균활성의 차이가 있음을 알 수 있었다. 균종별로는 표고 해균인 주홍 꼬리버섯에 대한 항균효과가 다른 공시 균주에 비해 높은 것으로 나타나 균의 종류에 따라 목초액에 대한 감수성이 차이가 있는 것으로 밝혀졌다. 한편, 식품부패균 및 식중독균에 대한 항세균활성을 검정한 결과 소나무 및 참나무류 미정제 목초액의 경우 10% 농도에서 모든 공시 균주에 대해 생육저지환을 형성한 반면 정제 목초액 의 경우에는 저지환을 형성하지 않아 항세균활성도 미정제액이 정제액보다 높은 것으로 나타났다. 균종에 따른 감수성에도 차이가 있어 그람 양성균에 대한 항균활성이 그람 음성균에 비해 상대적으로 높았으나 탄화 원료에 의한 차이는 뚜렷하게 나타나지 않았다. 이상의 결과 목초액은 식물병원균, 목재부후균, 식품부패균 및 식중독 균에 대한 항균활성이 우수하여 유기합성 농약을 대체하거나 식품의 부패를 막기 위한 식품보존제로서 이용이 가능할 것으로 판단되었다.
천연물 유래의 보다 안전하고 활성이 우수한 항균 및 항산화물질을 탐색할 목적으로 산벚나무 심재로부터 분리한 pinostrobin, eriodictyol, naringenin. pinocembrin, taxifolin, verecundin의 항균 및 항산화활성을 검정 하였다. 배지점적법을 이용하여 항진균활성을 조사한 결과, pinocembrin(5,7-dihydroxyflavanone)이 공시균주 모두에 대해 80% 이상의 균사생장억제율을 나타내어 가장 활성이 우수한 것으로 나타났으며 그 다음이 naringenin(4',5,7-trihydroxyflavanone), 그리고 verecundin(7-hydroxyflavanone 5-O-${\beta}$-D-glucopyranoside)은 활성이 없는 것으로 나타났다. 특히, pinocembrin의 경우 현재 천연물로부터 분리되어 실용화되고 있는 항균물질인 히노키치올에 비견될 수 있는 항진균활성을 나타내었다. 한천배지확산법을 이용한 항세균활성 조사에서는 단리물질 모두 생육저지환을 형성하지 않아 활성이 없는 것으로 나타났다. 또한, 항산화활성 검정을 위해 프리라디칼소거능 및 과산화물가를 조사한 결과, taxifolin(3,3',4',5,7-pentahydroxyflavanone)과 eriodictyol(3',4',5,7-tetrahydroxyflavanone)이 천연항산화제인 ${\alpha}$-tocopherol의 2배의 프리라디칼소거능을 나타내었으며, 항산화지수도 천연항산화제보다 높은 것으로 나타나 항산화활성이 우수한 것으로 판단되었다. 이상의 결과 산벚나무 심재 에탄올 추출물의 높은 항균활성은 pinocembrin에, 항산화활성은 taxifolin과 eriodictyol에 기인하는 것으로 사료되었다.
For the purpose of searching for the new antifungal agent from the plant origin, we have examined twenty seven species of medicinal plants for the antifungal activity against Candida albicans and Pityrosporum ovale. The whole MeOH extract of each plant material and the n-hexane and EtOAc fractions were evaluated individually for the antifungal activity. Among the test materials, the fractions from the root bark of Zanthoxylum schinifolium, Zanthoxylum piperitum and Citrus unshiu showed significant antifungal activities in a dose dependent manner against Pityrosporum ovale and Candida albicans, respectively.
Extracts from sawdust of Pinus densiflora were showed antifungal activity against Lentinula edodes. It was extracted by hot water and then successively extracted by n-hexane, ethyl acetate, and methanol. The yields of the n-hexane-soluble, ethyl acetatesoluble, methanol-soluble and methanol-insoluble fractions of water extracts were 8.2%, 10.6%, 32.0%, and 49.2%, respectively. The ethyl acetate-soluble fraction showed the greatest antifungal activity against L. edodes: 41.5% inhibition at 1,000 ppm. However, there were not significant differences of antifungal activities between n-hexane-soluble fraction and methanol-soluble fraction at a concentration of 1,000 ppm. The hot water extracts showed 23.5% of antifungal activity against L. edodes at a concentration of 1000 ppm. The four antifungal compounds were separated from ethyl acetate fraction by thin layer chromatography.
본 논문에서는 다양한 온도조건에서 발효한 퇴비차의 항진균 효능에 관한 연구내용을 제시하였다. 최근에 많은 농가에서 일반 대중의 친환경 농산물에 대한 선호에 부응하고 식물병 예방을 위하여 퇴비차를 선택하고 있다. 퇴비차에 대한 많은 연구가 진행되었으나 아직 퇴비차에 대한 이해가 부족하고 퇴비차가 발효되는 동안 온도가 항진균 효과에 미치는 영향에 대한 연구는 없었다. 본 연구에서는 10, 20, 30, $40^{\circ}C$에서 발효한 퇴비차의 항진균 활동이 본 연구에서 선정한 10종의 병원성 미생물에 미치는 영향을 관찰하였다. 결과에 따르면 20에서 $30^{\circ}C$에서 발효한 퇴비차의 항진균 활동이 가장 강한 것으로 나타났으며 $10^{\circ}C$에서 발효한 퇴비차가 가장 약한 것으로 밝혀졌다. 발효온도가 항진균 활동에 미치는 변화는 퇴비차의 미생물이 항진균 활동에 강하게 개입하고 있음을 시사해주고 있다.
본 연구는 편백나무 건조 중 발생하는 휘발성 유기화합물로 구성된 응축수에 대해 항진균 및 항산화 활성을 평가하였다. 응축수는 hexane과 ethyl acetate로 각각 추출하였으며 추출액의 농도 100-500 mg/L에서 피부사상균에 대한 항진균 활성을 측정하였다. 추출액 농도가 증가할수록 항진균 효과도 증가하였으며 500 mg/L에서는 모든 피부사상균에 대해 높은 항진균 활성을 나타냈다. 추출용매에 따라서는 hexane으로 추출하였을 경우 높은 활성을 나타냈으며, 특히 Trichophyton rubrum에 대한 항진균 활성이 높았다. 항산화 활성을 측정한 결과 25 mg/L 이상의 농도에서는 90% 이상의 항산화 활성을 나타냈으며 추출용매에 따른 차이는 거의 없었다. 하지만 25 mg/L 이하의 농도에서는 hexane 추출물에서 높은 항산화 활성을 나타냈다. 각각의 추출물 구성성분을 분석한 결과 hexane 추출물의 주요 구성성분은 torreyol, alpha-cadinol, tau-cadinol이며, ethyl acetate 추출물의 주요 구성성분은 alpha-amorphene, alpha-cadinol, gamma-cadinene으로 나타났다.
항균활성이 우수한 헛개나무 목부 에탄올 조추출물로부터 7종의 화합물을 단리하였으며, 기기분석 결과 flavonoid인 5-hydroxy-7-methoxyflavone를 비롯하여 5,7-dihydroxyflavone (chrysin), 5,7-dihydroxyflavanone (pinocembrin), 3,5,7-trihydroxyflavanone (pinobanksin), 3,4',5,7-tetrahydroxyflavanone (aromadendrin)과 stilbenoid인 3-hydroxy-5-methoxystilbene과 3,5-dihydroxystilbene (pinosylvin)으로 각각 동정되었다. 이들 단리물질에 대한 항균활성을 조사한 결과 stilbenoid인 3-hydroxy-5-methoxystilbene이 공시균주의 생장을 완전히 저해하여 단리물질 중 활성이 가장 높은 것으로 나타났다. 그 다음이 pinocembrin과 pinosylvin으로 Cryphonectria parasitica, Trametes versicolor, Tyromyces palustris 그리고 Trichoderma viride에 대해 높은 균사생장억제율을 나타내어 활성이 우수한 것으로 나타났다. 그러나, flavonoid인 pinobanksin, 5- hydroxy-7-methoxyflavone, chrysin, 그리고 aromadendrin은 항균활성이 낮은 것으로 나타났다. 이상의 결과, 헛개나무 목부 에탄올 조추출물의 높은 항균활성은 3-hydroxy-5-methoxystilbene과 pinocembrin, 그리고 pinosylvin에서 유래된 것으로 사료되었다.
Objectives: The purpose of this study was to investigate the antifungal effect of bee venom (BV) and sweet bee venom (SBV) against Candida albicans (C. albicans) clinical isolates. Methods: In this study, BV and SBV were examined for antifungal activities against the Korean Collection for Type Cultures (KCTC) strain and 10 clinical isolates of C. albicans. The disk diffusion method was used to measure the antifungal activity and minimum inhibitory concentration (MIC) assays were performed by using a broth microdilution method. Also, a killing curve assay was conducted to investigate the kinetics of the anti-fungal action. Results: BV and SBV showed antifungal activity against 10 clinical isolates of C. albicans that were cultured from blood and the vagina by using disk diffusion method. The MIC values obtained for clinical isolates by using the broth microdilution method varied from $62.5{\mu}g/mL$ to $125{\mu}g/mL$ for BV and from $15.63{\mu}g/mL$ to $62.5{\mu}g/mL$ for SBV. In the killing-curve assay, SBV behaved as amphotericin B, which was used as positive control, did. The antifungal efficacy of SBV was much higher than that of BV. Conclusion: BV and SBV showed antifungal activity against C. albicans clinical strains that were isolated from blood and the vagina. Especially, SBV might be a candidate for a new antifungal agent against C. albicans clinical isolates.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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