• International Journal of Oral Biology
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• 제32권1호
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• pp.13-22
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• 2007

The stem cell research is emerging as a cutting edge topic for a new treatment for many chronic diseases. Recently, dental stem cell would be possible for regeneration of tooth itself as well as periodontal tissue. However, the study of the cell characterization is scarce. Therefore, we performed the genetic profiling and the characterization of mouse fetus/neonate derived dental tissue and cell to find the identification during dental development. We separated dental arch from mandibles of 14.5 d fetal mice and neonate 0 d under the stereoscope, and isolated dental cells primarily from the tissues. Then, we examined morphology and the gene expression profiles of the primary cells and dental tissues from fetus/neonate and adult with RT-PCR. Primary dental cells showed heterogeneous but the majority was shown as fibroblast-like morphology. The change of population doubling time levels (PDLs) showed that the primary dental cells have growth potential and could be expanded under our culture conditions without reduction of growth rate. Immunocytochemical and flow cytometric analyses were performed to characterize the primary dental cell populations from both of fetus (E14.5) and neonate. Alpha smooth muscle actin (${\alpha}-SMA$), vimentin, and von Willebrand factor showed strong expression, but desmin positive cells were not detected in the primary dental cells. Most of the markers were not uniformly expressed, but found in subsets of cells, indicating that the primary dental cell population is heterogeneous, and characteristics of the populations were changed during culture period. And mesenchymal stem cell markers were highly expressed. Gene expression profile showed Wnt family and its related signaling molecules, growth factors, transcription factors and tooth specific molecules were expressed both fetal and neonatal tissue. The tooth specific genes (enamelin, amelogenin, and DSPP) only expressed in neonate and adult stage. These expression patterns appeared same as primary fetal and neonatal cells. In this study we isolated primary cells from whole mandible of fetal and neonatal mice. And we investigated the characteristics of the primary cells and the profile of gene expressions, which are involved in epithelial-mesenchymal interactions during tooth development. Taken together, the primary dental cells in early passages or fetal and neonatal mandibles could be useful stem cell resources.

• Applied Microscopy
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• 제30권3호
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• pp.285-293
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• 2000

임신중에 투여된 불소가 흰쥐태아의 법랑질형성에 미치는 영향을 알아보고자 어미흰쥐에게 불소를 음용 시킨 후, 생후 11일이 경과된 어린 흰쥐를 희생하였다. 이후, 하악절치를 발치한 후, 법랑단백질의 종류 및 양적 변화와 법랑질 표면의 형태학적 변화를 관찰하였다. 분비법랑질과 성숙법랑질에서 추출한 법랑단백질을 전기 영동한 결과, 분비법량질에서는 분자량 $22\sim24kDa$의 amelogenin이 확인되었는데, 대조군에서보다 불소투여 농도가 높아질수록 양이 감소하였다. 성숙법랑질에서는 분자량이 68kDa의 enamelin이 확인되었으며, 대조군에 비해 불소투여 농도가 높을수록 양적인 증가가 확인되었다. 그리고 주사전자현미경을 사용하여 법랑질 표면을 관찰한 결과, 대조군에서는 평탄하고 매끄러운 표면인 반면에 불소투여군은 거친 표면과 균열이 심하게 나타났고, 불규칙한 소공이 관찰되었다. 그리고 일부에서는 균열과 함께 주머니 같은 결절과 법랑질 형성부전을 확인하였다. 따라서 본 연구결과, 태아발생과정 중 투여된 불소가 법랑질형성에 관여하는 법랑모세포에 영향을 줌으로써 단백질의 형성과 분비가 지연 또는 억제되며, 수분과 단백질 제거에 관여하는 법랑모세포의 기능을 저하시키는 것으로 사료된다. 이러한 단백질의 비정상적인 형성과 분비는 법랑질 형성부전 등의 법랑질형성에 전반적으로 영향을 미치는 것으로 확인되었다.

• 보존과학회지
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• 제30권4호
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• pp.409-416
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• 2014

유적지에서 발굴되는 조선시대 인골은 보존 상태가 대부분 양호하여 형질인류학, 유전학, 그리고 화학적 연구를 수행할 수 있다. 본 연구에서는 김포 장기동 유적지에서 발굴된 조선시대 인골 6개체에 대한 DNA 분석을 통하여 미토콘드리아 DNA 변이형을 결정하였으며, 성별 분석결과를 토대로 남성 피장자의 Y 하플로그룹을 동정하였다. 유전자 분석에 앞서 보존상태가 양호한 것으로 판단되는 인골 6구를 대상으로 조직학 지수를 판별하였다. 미토콘드리아 DNA 변이형은 아시아인에서 높은 빈도로 나타나는 G, R11, M7, A5 등의 하플로그룹이 확인되었다. 인골의 성별을 확인하기 위하여 아밀로제닌 유전자 분석을 수행한 결과, 6구의 인골에서 여성 4구와 남성 2구의 성별을 확인할 수 있었다. 남성으로 판명된 인골에 Y 염색체 단일염기다형성 분석을 적용해본 결과, 하플로그룹 O로 확인되었다. 향후 출토 인골의 광범위한 분석을 위하여 인골을 선별한 경우에는 본 연구에서 제시한 조직학 지수를 적용하고, 미토콘드리아 DNA와 핵 DNA의 다양한 분석을 병행하여 출토 인골간의 유연관계를 규명하는 것이 필요하다.

• Molecules and Cells
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• 제26권3호
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• pp.314-318
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• 2008

Korean long-tailed goral (Nemorhaedus caudatus) is one of the most endangered species in South Korea. However, detailed species distribution and sex ratio data on the elusive goral are still lacking due to difficulty of identification of the species and sex in the field. The primary aim of this study was to develop an economical PCR-RFLP method to identify species using invasive or non-invasive samples from five Korean ungulates: goral (N. caudatus), roe deer (Capreolus pygargus), feral goat (Capra hircus), water deer (Hydropotes inermis) and musk deer (Moschus moschiferus). The secondary aim was to find more efficient molecular sexing techniques that may be applied to invasive or non-invasive samples of ungulate species. We successfully utilized PCR-RFLP of partial mitochondrial cytochrome b gene (376 bp) for species identification, and sex-specific amplification of ZFX/Y and AMELX/Y genes for sexing. Three species (goral, goat and water deer) showed distinctive band patterns by using three restriction enzymes (Xbal, Stul or Sspl). Three different sexing primer sets (LGL331/335 for ZFX/Y gene; SE47/48 or SE47/53 for AMELX/Y gene) produced sex-specific band patterns in goral, goat and roe deer. Our results suggest that the molecular analyses of non-invasive samples might provide us with potential tools for the further genetic and ecological study of Korean goral and related species.