Saccharomyces cerevisiae and Zygosaccharomyces rouxii are known to produce alcohol in gochujang. To reduce alcohol production, garlic and chives were applied to gochujang solution to find their inhibitory effect on S. cerevisiae and Z. rouxii. The 70% ethanol extract of garlic and chives showed significant inhibition activity against S. cerevisiae and Z. rouxii, showing growth inhibition zone of 14.00±0.00~25.33±0.58 mm by disc diffusion method. In addition, the addition of 70% ethanol extract of garlic and chives in 10% gochujang solution spiked with S. cerevisiae and Z. rouxii reduced the numbers of total aerobic bacteria (below 7 Log CFU/g) and yeast (below 4 Log CFU/g), alcohol content (below 0.30%), respectively. In conclusion, the addition of garlic ethanol (70%) extract or chives ethanol (70%) extract to gochujang inhibited the growth of S. cerevisiae and Z. rouxii, resulting in reduced alcohol content in gochujang. For further study, it is necessary to conduct food application experiments by using real gochujang paste.
Kim, Seung-Hwan;Chung, Oon-Chan;Woo, Im-Sun;Shin, Jae-Ho;Rho, Dong-Hyun;Rhee, In-Koo;Park, Heui-Dong
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제10권6호
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pp.776-783
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2000
Various alcohol yeast strains have been isolated from main mashes of Korean traditional liquors, and their genetic diversities were previously reported [23]. In this study, the strain SHY111, showing the highest alcohol production, was tested for its fermentation and sporulation characteristics. Additionally, its haploid cells were isolated and tested for their growth and fermentation patterns. The strain was identified as Saccharomyces cerevisiae based on its morphological and physiological characteristics. The sequences of the ITS(internal transcribed spacer) and 5.8S rDNA regions of S. cerevisiae SHY111 were found to be identical to those of S. cerevisiae that was obtained from through the yeast genome project. The maximum fermentation ratio obtained by the strain SHY111 (96.7%) was almost the same as that by S. cerevisiae Balyun No. 1 (96.5%) that was a little higher than that by S. cerevisiae KCCM11215(95.8%). The strain was induced for sporulation in a sporulation liquid medium using log phase cells grown in different types of pre-sporulation media, and its haploid cells were obtained by spore dissection using a micromanipulator. The majority of the spores formed a small colony on a YPD agar plate, and the haploid yeast cells derived from the strain SHY111 showed a variety of growth and alcohol fermentation patterns. It was proposed that the fermentation patterns were related to their growth phenotypes in the most haploid strains, but possible not in some strains.
본 실험의 목적은 starch의 alcohol발효에 있어서 전분의 $\alpha$-1.4 linkage을 분해하여 alcohol발효를 하는 S diastaticus와 전분 중의 $\alpha$-1.4, $\alpha$-1.6 linkage를 모두 분해할 수 있는 C. tropicalis 간의 이속간의 protoplast fusion을 시켰다. 이때 세포 융합의 빈도는 $10^{-5}$-$10^{-6}$이였으며, 이틀 융합체중 amylase 생성능과 유전적으로 안정한 융합체를 분리하였다. fusant의 성질을 조사하기 위하여 탄소원 자화능을 조사한바 parent와 달리 탄소원 자화능이 일부 보완됨을 보였고 또한 fusant는 원 parent보다 세포의 크기가 클 뿐만아니라, DNA함량도 많았다. spore형성능은 S. diastaticus A4는 spore를 형성하나 C. tropicalis는 형성할 수 없는 반면에 fusant는 형성하였고, Cu$^{++}$ 내성과 NaCl 내염성도 조사하였는데 fusant는 parent의 중간 성질을 가졌다. Fusant의 증식율을 조사하기 위하여 생육도를 조사한 결과 Parent보다 유도기가 길었음을 알았다.
Park, Heui-Dong;Kim, Seung-Hwan;Shin, Jae-Ho;Rhee, In-Koo
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제9권6호
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pp.744-750
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1999
Forty alcohol yeast strains were isolated from the main mashes (10 strains from each mash) for brewing of 4 different kinds of Korean traditional liquor (3 different types of Yakju and 1 Takju). Thirty-eight out of 40 strains were identified to be the same strain, Saccharomyces boulardii, by the Automated Bacteria, Yeast, and Fungi Identification System (Biolog Co., U.S.A.) based on the metabolic fingerprints. One strain that showed the highest ethanol production among the 38 strains in YPD medium, designated SHY 111, was selected and used for differentiating from other yeast type strains using the polymerase chain reaction (PCR). Amplified DNA, from transcribed internal spacers of SHY 111 chromosomal DNA, was found to be the same in both size and sequence as those of S. cerevisiae KCCM 11215 (formerly S. coreanus) and S. boulardii along with that of S. cerevisiae AB 972, which was used as a type strain for the yeast genome project. However, when PCR was carried out with the intron splice site primer, it resulted in the amplification of the SHY 111-specific DNA fragment which was about 200 bp in size. When PCR was carried out using the primer to test diversity of 40 isolated yeast strains, it was found that the PCR patterns were similar to each other except for the 200 bp bands derived from all the 10 strains from one Yakju, and 2 strains from another Yakju. These results suggest the strain identified as S. boulardii by the Automated Identification System to be a dominant strain for the fermentation of Korean traditional liquors.
본 연구는 쌀 맥주에 적합한 양조용 효모를 우리나라의 전통 누룩에서 분리 동정하고, 분리된 효모에 대한 쌀 맥주의 양조 적성을 파악하고자 하는데 그 목적이 있다. 6개월간의 연구 결과, 전통 누룩에서 선발된 4종의 양조용 효모는 이화학적 데이터 측면(pH, 당도, 알코올)에서 상업용 양조용 효모와 유사한 정상적인 발효 패턴을 보였으며 상업용 양조용 효모 보다 더 높은 활력을 보였다. 또 한편으로, 쌀 맥주의 아로마 성분 중에 특히 맥주의 아로마를 나타내는 고급 알코올과 에스터 농도는 각각 78.4로 부터 106.5 ppm 그리고 15.1부터 29.3 ppm을 나타내어 일반적으로 맥주에서 나타나는 농도를 나타내었다. 특히 Saccharomyces cerevisiae(KCCM 90313)는 상업용 효모에 의해 제조된 쌀 맥주에서 보다 유의적으로 더 높은 고급 알코올 농도와 에스터 농도를 보여주었기 때문에 쌀맥주의 아로마에 대한 긍정적인 효과가 있을 것으로 판단된다. 결론적으로, 전통 누룩에서 분리 동정한 4종의 효모들은 쌀 맥주의 제조에 적합한 것으로 판단되며, 특히 S. cerevisiae (KCCM 90313) 효모는 우수한 효모 활성과 아로마 생성능을 보여 주었으므로 향후 쌀 맥주 제조에서의 응용 가능성을 보였다.
The entanol productivity of superoxide dismutase (SOD)-deficient mutants of Saccharo-Myces cerevisiae was examined under the oxidative stress by Paraquat. It was observed that MnSOD-deficient mutant of S. cerevisiae had higher ethanol productivity than wild type or CuZnSOD-deficient yeast both in aerobic and in anaerobic culture condition. Pyruvated dehydrogenase activity decreased by 35% and alcohol dehydrogenase activity increased by 32% were observed in MnSOD-deficient yeast grown aerobically. When generating oxygen radicals by Paraquat, the ehanol productivity was increased by 40% in CuZnSOD-deficient or wild strain, resulting from increased activity of alcohol dehydrogenase and decreased a activity of pyruvate dehydrogenase. However, the addition of ascorbic acid with Paraquat returned the enzyme activities at the level of control. These results imply that SOD-deficiency in yeast strains may cause the metabolic flux to shift into anaerobic ethanol fermentation in order to avoid their oxidative damages by Paraquat.
In each nuruk using today, effect of pH on glucoamylase activity and viable cell count of yeast and bacteria was measured. Common components during fermentation, alcohol, acetaldehyde and acetone, amino acid composition, and total sugars and mineral content were determined in yakju(korean wine) brewed from different ingredients and by different methods. Results are summarized as follows ; 1. The lower the pH, the lower the glucoamylase activity in JK, BK, JK-S BK-S and JN. But the higher the glucoamylase activity ratio in Koji and KN. 2. Yeast and bacteria cell count could not determined in nuruk inoculated of seed. In JK, BK and JN, yeast cell count was 50${\times}$104∼80${\times}$104, bacteria cell count was 5${\times}$106∼24${\times}$106. 3. In yakju during fermentation, pH was higher in RU, total acidity content was higher in ST-N, ST-K, RU and ST-RUPO and alcohol content was lower in RUPO and ST-RUPO. 4. Ethanol and acetaldehyde content were highest in dukyunju. Trace amount of acetone was determined only in ST-K, RUPO and ST-RUPO . n-Propyl alcohol content was higher in ST-K, ST-RUPO and ST-N, iso-butyl alcohol content was higher in L-RUPO, Dukyunju and Songyupju and iso-amyl alcohol content was higher in Songyupju, RU, L-RUPO and Dukyunju. 5. In amino acids composition of each yakju, Pro, Ala and Val content was higher than other amino acids. Total amino acids content was the highest in Dukyunju and second highest in ST-N, NH3 was higher in ST-N, Dukyunju, RUPO than other samples. 6. Total sugars content was the highest in ST-N and second highest in RU. 7. P, K and Mg content were higher in Dukyunju and ST-N than in other samples. In Dukyunju, Ca and P ratio was 0.075 because of low Ca content and high P content.
Gly-224 residue of yeast alcohol dehydrogenase was mutated by site-directed mufagenesis to isoleucine, which is the corresponding amino acid residue of horse liver alcohol dehydrogenase. The mutated gene on M13 vector was subcloned in YEp13 and used to transform Saccharomyces cerevisiae 302-21 #2 strain, and the expressed protein was purified. The tumover numbers of mutant enzyme for ethanol and acetaldehyde were decreased copared to wild-type enzyme. The results of product inhibition studies indicated that the reaction mechanism was changed to Iso Theorell-Chance from Ordered Bi Bi. We supposed that Gly-224 was related to the enzyme reaction mechanism.
Bacillus subtilis의 Beta-1,4-glucanase 유전자와 Saccharomyces cerevisiae의 alcohol dehydrogenase isoenzyme I 유전자 (ADHI)의 promoter와 mouse $\alpha$-amylase의 분비신호를 연결하여 분비형 플라스미드를 구성하였으며 이를 산업용 알콜생산 효모인 Saccharomyces cerevisiae 54에 도입하여 형질전환시켰다. 한편 $\beta$-glucanase 유전자의 발현정도를 증대시키기 위해 CYC1 유전자의 전사종결신호를 부가한 후 역시 Saccharomyces cerevisiae 54에 도입하였다. 형질전체들은 carboxymethyl cellulose가 함유된 평판배지에서 $\beta$-glucanase를 분비하고 있음을 확인할 수 있었다. 전사종결 신호가 부가된 경우엔 전체역가가 2배 정도 증가하였다. 형질전환체들이 세포밖으로 분비한 효소역가는 전체의 60 정도였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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