Chrysanthemums showing leaf mottling were collected from three southern locations in Korea in 1998. Two kinds of viruses were isolated from the leaves and were identified as tomato aspermy virus ch-TAV) and chrysanthemum virus B (ch-CVB), according to their host range, morphology, intracellular location, agar gel double diffusion test, and double-stranded RNA (dsRNA) analysis. The purified ch-TAV was spherical particles of approximately 29 nm in diameter and ch-CVB was filamentous particles of 685 nm long. Inclusion bodies were not observed in ch-TAV and/or ch-CVB infected chrysanthemum. ch-TAV showed positive serological reaction with TAV antiserum (ATCC-127) but not with CMV-pepper antiserum. In dsRNA analysis, four kinds of viral dsRNA were observed on ch-TAV and one viral dsRNA was shown on ch-CVB. Rate of co-infection with TAV and CVB in commercial chrysanthemums was 20.9%. On the other hand, infection with CVB alone was 97.2%. However, chrysanthemums naturally infected with TAV alone were not found.
In this study, antimicrobial resistance of E. coli isolated from domestic beef on sale in Busan and Gyeongnam province was investigated from March to October 2008. A total of 400 beef samples were collected for the monitoring of antimicrobial resistance, and 39 (9.8%) strains of E. coli were isolated. Antimicrobial resistance test was carried out by agar disc diffusion method with 17 antimicrobials. In general, E. coli isolates showed the highest antimicrobial resistance to tetracycline (85.3%), followed by doxycycline (76.5%), streptomycin (61.8%) and sulfamethoxazole/trimethoprim (61.8%). Then they showed higher resistance to several antimicrobials like kanamycin and neomycin (55.9%). However, They had low antimicrobial resistance to amikacin (8.8%), amoxicillin/clavulanic acid (2.9%). Of 39 isolates, 31 (79.5%) were resistant to more than 2 antimicrobials. Among 17 antimicrobials examined, tetracyclines were the most resistant, followed by aminoglycosides, sulfonamides. The resistance was seemed to be correlated to amounts of antimicrobial use. In the result of this study, we suggest that there be need to regulate the abuse of antimicrobial on food-producing animals in Korea because the concern on antimicrobial resistant is gradually increased worldwide.
Enterovirulent Escherichia coli are among the most important causes of diarrhea in cattles. Between January and December, 2017, a total of 150 stool specimens from cattles were investigated for enterohaemorrhagic E. coli (EHEC), enteropathogenic E. coli (EPEC), enteroaggregative E. coli (EAEC), enterotoxigenic E. coli (ETEC) and enteroinvasive E. coli (EIEC) using real-time PCR. 131 E. coli were isolated from feces. The most frequently isolated pathotype in feces was EHEC (37 isolates). EPEC, ETEC and EAEC were detected in feces with 14, 7 and 3 respectively. EIEC was not detected. Antimicrobial resistance test was performed by agar disc diffusion method with 14 antimicrobials. Enterovirulent E. coli isolates showed the highest antimicrobial resistance to ampicillin 61.3%, followed by tetracycline 54.5% and streptomycin 45.5%. They had low resistance to amikacin 11.4%. Of 44 isolates, 37 (84.1%) were resistant to more than 2 antimicrobials. futher study a highest antimicrobial susceptibility to trimethoprim/sulfamethoxazole 50.0% and florofenicol 47.7%.
The growth responses of six bacterial strains exposed to materials extracted from turmeric (Curcuma longa) rhizomes were examined using impregnated paper disk agar diffusion. Methanol extracts of turmeric rhizomes exhibited strong inhibitory activity against Clostridium perfringens and weak inhibitory activity toward Escherichia coli at 5 mg/disk. However, in tests conducted with Bifidobacterium adolescentis, B. bifidum, B. longum, and Lactobacillus casei, the methanol extract showed no inhibitory response. The biologically active constituent isolated from the turmeric rhizomes extracts was characterized as ar-turmerone using various spectroscopic analyses including EI-MS and NMR. The responses varied according to the dosage, chemicals, and bacterial strain tested. At 2 and 1 mg/disk, ar-turmerone strongly inhibited the growth of C. perfringens and moderately inhibited the growth of E. coli without any adverse effects on the growth of four lactic acid-bacteria. Of the commercially available compounds originating from turmeric rhizomes, curcumin exhibited strong and moderate growth inhibition against C. perfringens at 2 and 1 mg/disk, respectively, and weak growth inhibition against E. coli at 1 mg/disk. However, little or no activity was observed for borneol, 1,8-cineole, and sabinene against all six bacteria strains tested. The observed inhibitory activity of the turmeric rhizome-derived curcumin and ar-turmerone against C. perfringens and E. coli demonstrate one of the important pharmacological activities of turmeric rhizomes.
Lactobacillus strains were isolated from volunteer's feces, including from newly-born infants and adults in their 20's, by using differential MRS-BPB plates. Total 56 presumptive Lactobacillus strains were isolated and the bacteriocin productions by the isolates were examined by agar diffusion method. Six bacteriocin-producing strains were confirmed. Among them, two isolates, HU-1 and H22-3, showed the most outstanding antimicrobial activities, which were not affected by pH adjustments or catalase treatments of culture. HU-1 was originated from a two-years old boy and H22-3 was originated from a newly-born infant. HU-1 and H22-3 had the same morphology(short rod) when examined by scanning electron microscope, and the same biochemical traits including growth temperature range, salt tolerance and sugar-fermenting abilities. But the growth-inhibition spectrum and plasmid profiles of HU-1 and H22-3 were different. Both strains inhibited the growth of various Gram (+) microorganisms including Listeria monocytogenes. Micrococcus luteus, and Staphylococcus aureus in addition to many species of lactic acid bacteria, indicating the production of broad-spectrum bacteriocins. Bacteriocins produced by HU-1 and H22-3 were stable up to 90℃, 15 min heat treatments. Their activities were not affected by pepsin or trypsin treatments but destroyed by proteinaseK or pronase treatments.
Recently, number of honeybees (Apis mellifera) has visibly decreased because they are vulnerable to some diseases like American foulbrood disease. American foulbrood disease, which is caused by Paenibacillus larvae, is emerged as great cause of decrease in number of honeybees. After antibiotic-resistant strain emerged, it is now more difficult to treat those pathogens successfully. Researches on finding alternative antibacterial compound are ongoing. In this study, we examined the antibacterial effect of honokiol on P. larvae. Honokiol showed great antibacterial effect with minimum inhibitory concentration of 12.5 ㎍/mL and minimum bactericidal concentration of 50 ㎍/mL. An agar diffusion test also confirmed the anti-Paenibacillus larvae activity of honokiol with an inhibitory zone of 9±0.5 mm. Since honokiol is known to interact membrane of some bacteria, we measured 260 nm absorbing particles, which could be induced by leakage of cells, and confirmed that the leakage of P. larvae occurred in dose-dependent manners. However, result of crystal violet assay suggested that honokiol has only mild anti-biofilm formation effect on P. larvae, which means honokiol controls the bacteria by inducing the bursting of membrane. Finally, an additive effect of honokiol with tetracycline and terramycin was found using a checkerboard assay with a fractional inhibitory concentration index value of 0.5.
The emergence of multi-drug resistant, pathogenic methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) is a threat to global health and has created a need for novel functional therapeutic agents. In this study, we evaluated the underlying mechanisms of the anti-MRSA effect of an azaphilone pigment, sclerotiorin (SCL) from Penicillium sclerotiorum. The antimicrobial activity of SCL was evaluated using agar disc diffusion, broth microdilution, time-kill assays and biophysical studies. SCL exhibits selective activity against Gram positive bacteria including MRSA (range, MIC = 128-1028 ㎍/ml) and exhibited rapid bactericidal action against MRSA with a > 4 log reduction in colony forming units within three hours of administration. Biophysical studies, using fluorescent probes and laser or electron microscopy, demonstrated a SCL dose-dependent alternation in membrane potential (62.6 ± 5.0.4% inhibition) and integrity (> 95 ± 2.3%), and the release of UV260 absorbing materials within 60 min (up to 3.2 fold increase, p < 0.01) of exposure. Further, SCL localized to the cytoplasm and hydrolyzed plasmid DNA. While in vitro checkerboard studies revealed that SCL potentiated the antimicrobial activity of topical antimicrobials such as polymixin, neomycin, and bacitracin (Fractional Inhibitory Concentration Index range, 0.26-0.37). Taken together these results suggest that SCL targets the membrane and DNA of MRSA to facilitate its anti-MRSA antimicrobial effect.
Multiwalled carbon nanotubes (MWCNTs) were first oxidized (O-CNTs) to introduce carboxylic group and then further functionalized (F-CNTs) with m-phenylenediamine, which was confirmed by FTIR and SEM. It was used as an effective adsorbent for the adsorptive removal of diclofenac drug from water. Under optimum conditions of pH 6, stirring speed 600 rpm, the maximum adsorption capacity obtained was 532 mg g-1 which is superior to the values reported in literature. The adsorption was quite rapid as 25 mg L-1 drug solution was adsorbed in only 3 minutes of contact time with 10 mg of adsorbent dose. The adsorption kinetics and isotherms were studied using various models to evaluate the adsorption process. The results showed that the data best fit in kinetics pseudo-second order and Langmuir isotherm model. Furthermore, the oxidized and functionalized MWCNTs were applied on gram-negative Escherichia coli and gram-positive Staphylococcus aureus using agar disc diffusion assay to validate their anti-microbial activity. Results were unique as both oxidized and functionalized MWCNTs were equally active against both E. coli and S. aureus. The newly synthesized F-CNTs have great potential in water treatment, with their dual action of removing drug and pathogens from water, makes it potential applicant to save environment.
Objectives: The quorum-sensing-inhibitory and anti-biofilm activities of the methanol extract of E. globulus leaves were determined against clinically isolated multidrug-resistant Pseudomonas aeruginosa. Methods: The preliminary anti-quorum-sensing (AQS) activity of eucalyptus was investigated against a biosensor strain Chromobacterium violaceum ATCC 12472 (CV12472) by using the agar well diffusion method. The effect of sub-minimum inhibitory concentrations (sub-MICs) of the methanol extract of eucalyptus on different quorum-sensing-regulated virulence factors, such as swarming motility, pyocyanin pigment, exopolysaccharide (EPS), and biofilm formation, against clinical isolates (CIs 2, 3, and 4) and reference PA01 of Pseudomonas aeruginosa were determined using the swarm diameter (mm)-measurement method, chloroform extraction method, phenol (5%)-sulphuric acid (concentrated) method, and the microtiter plate assay respectively, and the inhibition (%) in formation were calculated. Results: The preliminary AQS activity (violacein pigment inhibition) of eucalyptus was confirmed against Chromobacterium violaceum ATCC 12472 (CV12472). The eucalyptus extract also showed concentration-dependent inhibition (%) of swarming motility, pyocyanin pigment, EPS, and biofilm formation in different CIs and PA01 of P. aeruginosa. Conclusion: Our results revealed the effectiveness of the E. globulus extract for the regulation of quorum-sensing-dependent virulence factors and biofilm formation at a reduced dose (sub-MICs) and suggest that E. globulus may be a therapeutic agent for curing and controlling bacterial infection and thereby reducing the possibility of resistance development in pathogenic strains.
현재 국내에 유통되고 있는 담수관상어의 대부분은 수입에 의존하므로 외래 병원체 및 항생제 내성균의 유입 가능성이 크다. 본 연구에서는 담수에 상재하는 균으로 인수공통 감염이 가능하며 어류에 조건성병원균으로 작용하는 Aeromonas hydrophila를 다양한 수입 담수관상어로부터 분리하여 특성을 분석하고자 하였다. 수입 후 1일 이내의 관상어를 수족관으로부터 수집하여 0.5% NaCl을 포함하는 TSA 배지에 간, 신장, 비장을 도말하여 세균을 분리하였다. 세균의 형태, 생화학적 특성 및 starch- ampicillin agar (SA)에서의 clear zone 형성 유무에 근거하여 분리 균의 약 70%인 226 균주가 Aeromonas spp.로 확인되어 이들의 분리 빈도가 매우 높음을 알 수 있었다. 이들 중 9균주를 선택하여 16S rRNA gene의 sequence를 분석한 결과 모두 A. hydrophila로 동정되었으며 API 20E test에서 대부분의 분리 균주는 amygdalin, D-melibiose, D-sucrose, trisodium citrate, L-arabinose 이용에서 표준 균주와 차이를 보였다. 10종의 항균제에 대한 분리 균주의 감수성을 디스크 확산법으로 확인한 결과 amoxycillin, ampicillin에 대해서는 모든 균주가 저항성이었고 florfecicol에 대해서는 모두 감수성이었다. 그러나 7균주는 tetracycline 계통의 항균제와 erythromycin, nalidixic acid 등에 복합내성을 보였다. A. hydrophila로 동정된 9개 분리 균주를 금붕어에 인위 감염을 실시한 결과, 3 균주는 5일 이내에 60~80%의 폐사를 나타내었다. 이러한 결과는 다약제내성이면서 독력이 있는 Aeromonas가 수입관 상어를 따라 국내로 유입되어 전파될 수 있으므로 수입상에서 소비처로 판매되기 전의 방어적 조치가 필요하다는 것을 시사한다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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