• Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
• /
• 제14권9호
• /
• pp.5391-5396
• /
• 2013

Aim: To investigate the role of Golgi phosphoprotein 3 (GOLPH3) in tumour growth and metastasis of esophageal squamous cancer. Methods: A lentiviral shRNA-vector was utilized to stably knockdown GOLPH3 in Eca-109 esophageal squamous cancer cells. mRNA transcription and protein expression of GOLPH3 were examined by real-time quantitative PCR and Western blotting, respectively. Cell proliferation activity was assessed by MTT assay and invasion and migration potentials by matrigel invasion and transwell motility assays. Results: Stable knockdown in the GOLPH3 cell line was established. PD-A gene expression was significantly suppressed by lentivirus-mediated RNAi, which resulted in reducing the capacity for cell proliferation, migration, invasion and adhesion in vitro. In vivo, GOLPH3 depletion resulted in inhibition of tumour growth, with stable decrease in the expression of GOLPH3 in tumor xenografts. Conclusions: Our findings suggest that lentivirus mediated silencing of the GOLPH3 gene has a significant anti-tumour effect on esophageal squamous cancer in vitro and in vivo. In addition, the results indicate that GOLPH3 might be an effective molecular target for gene therapy in esophageal squamous cancer.

• 동의생리병리학회지
• /
• 제17권2호
• /
• pp.525-528
• /
• 2003

Spatholobus Suberectus dunn. has been applied to blood stasis in oriental medicine. We selected one potent ethyl acetate subfraction-2 from Spatholobus Suberectus Dunn.(SSD) from anti-metastasis screening. It exerted the cytotoxicity against HT1080 and B16BL6 with the IC50 of 60 ug/ml and also significantly inhibited tumor cell induced platelet aggregation (TCIPA). It effectively didn't inhibit cell adhesion of HT1080 to matrigel coated wells, while it inhibited the cell invasion of HT1080 at the doses of 10, 20, 40 μg/ml by Boyden chamber assay. It effectively suppressed lung metastasis by B16BL6 melanoma in C57BL6 mice. These results indicate that the EtOAc subfraction-2 of Spatholobus Suberectus Dunn. can be applied to caner treatment with anti-metastatic activity.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
• /
• 제28권8호
• /
• pp.1332-1338
• /
• 2018

In the course of studies to discover natural products with anti-angiogenic properties, two cyclic octapeptides, octaminomycins A (1) and B (2), were isolated from the cultures of Streptomyces sp. RK85-270. Octaminomycins suppressed the vascular endothelial growth factor (VEGF)-induced proliferation, adhesion, tube formation, migration, and invasion of HUVECs. Anti-angiogenic activity was futher confirmed in vivo by the chicken chorioallantoic membrane assay. We also identified that 1 and 2 inhibited the phosphorylation of VEGF receptor 2, AKT, and ERK1/2 and the expression and activities of MMP-2 and MMP-9. These results suggest that 1 and 2 may serve as potential scaffolds for the development of therapeutic agents to angiogenesis-dependent diseases.

• 혜화의학회지
• /
• 제10권2호
• /
• pp.21-29
• /
• 2002

To evaluate the antitumor activity and antimetastatic effects of Polygoni Orientalis Fructus(POF), studies were done experimentally. The results were obtained as follows : 1. In cytotoxicity against A549, and XF498 cell concentration inhibiting cell growth up to below 30% of control was recognized at $200{\mu}g/m{\ell}$ of POF. Also POF inhibited cell growth up to below 30% of control against SK-OV-3, SK-MEL-2, HCT15 and MCF-7 cell at $100{\mu}g/m{\ell}$. 2. The concentration inhibiting adhesion of A549 and SK-OV-3 to complex extracellular matrix up to below 70% of control was recognized at $100{\mu}g/m{\ell}$ of POF. 3. In pumonary colonization assay, a number of colonies in the lungs were decreased significantly in POF treated group as compared with control group. These results suggested that POF extracts might be usefully applied for prevention and treatment of cancer.

• Nutrition Research and Practice
• /
• 제17권5호
• /
• pp.844-854
• /
• 2023

BACKGROUND/OBJECTIVES: Fucoidan, a polysaccharide content in brown algae, has been reported to inhibit the growth of cancer cells. The present study aimed to investigate the suppression effects of fucoidan on A549 non-small cell lung cancer cells migration. MATERIALS/METHODS: The anti-migratory activity of fucoidan in A549 cells was examined by wound healing assay and phalloidin-rhodamine staining in response to fucoidan (0-100 ㎍/mL) treatment for 48 h. Western blot analysis was performed to clarify the protein expressions relevant to migratory activity. RESULTS: Fucoidan (25-100 ㎍/mL) significantly suppressed A549 cells migration together with reduced the intensity of phalloidin-rhodamine which detect filopodia and lamellipodia protrusions at 48 h of treatment. The protein expression indicated that fucoidan significantly suppressed the phosphorylation of focal adhesion kinase (FAK), Src, and extracellular signal-related kinase (ERK). In addition, the phosphorylation of p38 in A549 cells was found to be increased. CONCLUSIONS: Our data conclude that fucoidan exhibits anti-migratory activities against lung cancer A549 cells mediated by inhibiting ERK1/2 and FAK-Src pathway.

• Tuberculosis and Respiratory Diseases
• /
• 제52권2호
• /
• pp.145-155
• /
• 2002

연구배경 : 혈관내피세포와 호중구의 상호작용은 급성염증반응의 생리 및 병리학적 핵심적인 과정으로서 특별한 분자들에 의해서 매개되고 있다. 적절한 자극이 주어질 때 혈관 내피세포에서는 부착 및 신호인자가 표현되며 이들은 호중구의 수용체에 의해 인지된다. 본 연구에서는 IL-1과 LPS로 혈관내피세포를 자극하였을 때 CXC chemokine family에 속하는 GRO-${\alpha}$, IL-8 및 ENA-78이 내피세포에서 분비되는 양상을 관찰하였고, ENA-78과 GRO-${\alpha}$가 호중구-내피세포의 부착에 미치는 영향을 평가하였다. 방 법 : 인제대혈관 내피세포를 배양하여 다양한 농도로 IL-1과 LPS로 자극하였다. 자극된 내피세로로부터 분비 되어진 GRO-${\alpha}$, IL-8 및 ENA-78의 농도는 ELISA로 측정하였다. recombinant human ENA-78 및 GRO-${\alpha}$로 자극된 내피세포에 동위원소가 부착된 정상백혈구를 이용하여 부착능을 측정하였다. 결 과 : IL-1a과 LPS로 자극된 내피세포에서 GRO-${\alpha}$ IL-8 및 ENA-78의 분비는 자극의 농도와 지속시간에 비례하여 증가되었고, recombinant human ENA-78과 GRO-${\alpha}$의 농도가 증가함에 따라 호중구의 부착율이 더욱 증가하였다. 결 론 : ENA-78과 GRO-${\alpha}$는 CXC chemokine family에 속하며 주로 상피세포에서 발현되어 백혈구의 화학적 주성을 유발하며 염증성 반응을 매개하는 중요한 물질로 알려져 있다. 본 연구에서는 다양한 농도의 IL-1과 LPS로 자극된 내피세포에서 농도에 비례하여 GRO-${\alpha}$, IL-8 및 ENA-78이 분비됨을 확인할 수 있었으며, 또한 ENA-78과 GRO-${\alpha}$를 각각 다른 농도로 배양한 후 호중구 부착능이 농도에 따라 증가함을 알 수 있었다. 따라서 본 연구의 결과는 염증성 자극으로 혈관내피세포에서 분비되는 ENA-78과 GRO-${\alpha}$ 등의 CXC chemokine 이 염증반응의 진행 기전에서 중요한 역할을 담당할 것임을 시사하며, 향후 염증성 질환의 발병기전 규명이나 치료법개발을 위한 기초적 자료를 제공하는데 도움이 될 것으로 생각된다.

• 대한의생명과학회지
• /
• 제2권1호
• /
• pp.31-40
• /
• 1996

비뇨기계 병원성 대장균의 중요한 병원성 인자 중의 하나로 인정되고 있는p-fimbriae의 subtype의 분포를 확인하기 위하여 요로감염증으로 확진된 환자의 혈청을 이용하여 immunoblotting 을 실시하였고, 이와 동시에 효소면역 측정법을 실시하여 p-fimbriae특이 항체 보유를 확인하였다. Immunoblotting 결과 우리나라 요로감염증환자에서 높은 빈도로 확인되는 p-fimbriae subtype의 분포는 $F7_1$34(56.7%), $F7_2$28(46.7%), F13 30(50%)등이 높게 나타났으며, 이와 같은 결과는 효소면역측정법에서도 동일하게 나타났다. 그러나 P-pili를 순수분리하지 않고 whole cell을 이용한 효소면역 측정법은 교차반응 때문에 비뇨기 감염증의 혈청학적인 진단에 적합하지 않는 것으로 나타났다. 또 우리 나라의 요로감염 환자에서 항체 양성율이 높은 $F7_1$, $F7_2$, F13만을 혼합하여 항원으로 이용한 효소면역측정법의 특이도와 민감도가 각각 92.6%, 90%로 나타나, 이와 같은 방법을 임상진단에 응용할 수 있을 것으로 판단되었다.

• Tuberculosis and Respiratory Diseases
• /
• 제48권6호
• /
• pp.887-897
• /
• 2000

연구배경 : 급성호흡부전증후군(ARDS)의 병인론을 호중구의 산소기 생성 및 apoptosis 의 관정에서 PLA2 및 PAF의 역할과 연관하여 알아보았다. ARDS의 원인 중 산소기의 역할이 주로 염증성 cytokine 및 지질분자와 관련하여 연구되고 있는 점에 착안하여 내독소에 의한 PLA2, PAF의 작용 및 이에 따른 호중구의 혈관내피세포로의 유착, 산소기에 의한 pulmonary surfactant의 기능에 미치는 영향에 대해서도 알아보았다. 방법 : PMA로 자극된 호중구에서 PLA2 및 PAF의 억제에 따른 산소기 형성의 변화에 대해서도 알아보았으며 내독소에 의한 호중구에서의 PLA2활동도의 변화, lysoPAF remodelling에 미치는 PLA2 및 PAF의 억제의 효과에 대해서도 알아보았다. 또한 내독소 및 PMA에 의해 자극된 상태에서의 PLA2 및 PAF의 억제가 호중구의 apoptosis에 미치는 영향도 알아보았다. 호중구에 의한 조직의 손상은 혈관내피세포로의 호중구의 유착이 선행되어야 하므로 이러한 작용에 PLA2 및 PAF가 미치는 영향을 호중구 유착검사를 통하여 알아보았고 형태학적으로는 산소기와 pulmonary surfactant의 결합을 확인하였다. 결론 : ARDS 시의 호중구의 역할은 PLA2 및 PAF의 작용에 의한 산소기 형성 및 염증성 지질분자의 생성을 통해 조작의 손상을 유발하는 듯하며 이때 PLA2의 억제는 호중구의 apoptosis의 증가 및 산소기의 생성을 감소시키고 또한 호중구의 혈관내피세포로의 유착을 감소시켰다. PAF의 억제는 호중구의 산소기 생성의 감소 및 호중구의 유착을 억제하여 조직의 손상을 감소시키는 것으로 생각되었다.

• Journal of the Korean Association of Oral and Maxillofacial Surgeons
• /
• 제31권3호
• /
• pp.199-218
• /
• 2005

Purpose of Study: Peripheral nerve regeneration depends on neurotrophism of distal nerve stump, recovery potential of neuron, supporting cell like Schwann cell and neurotrophic factors such as BDNF. Peripheral nerve regeneration can be enhanced by the conduit which connects the both sides of transected nerve. The conduit maintains the effects of neurotrophism and BDNF produced by Schwann cells which can be made by gene therapy. In this study, we tried to enhance the peripheral nerve regeneration by using calcium phosphate coated porous conduit and BDNF-Adenovirus infected Schwann cells in sciatic nerve of rats. Materials and Methods: Microporous filter which permits the tissue fluid essential for nerve regeneration and does not permit infiltration of fibroblasts, was made into 2mm diameter and 17mm length conduit. Then it was coated with calcium phosphate to improve the Schwann cell adhesion and survival. The coated filter was evaluated by SEM examination and MTT assay. For effective allogenic Schwann cell culture, dorsal root ganglia of 1-day old rat were extracted and treated with enzyme and antimitotic Ara-C. Human BDNF cDNA was obtained from cDNA library and amplified using PCR. BDNF gene was inserted into adenovirus shuttle vector pAACCMVpARS in which E1 was deleted. We infected the BDNF-Ad into 293 human mammary kidney cell-line and obtained the virus plaque 2 days later. RT-PCR was performed to evaluate the secretion of BDNF in infected Schwann cells. To determine the most optimal m.o.i of BDNF-Ad, we infected the Schwann cells with LacZ adenovirus in 1, 20, 50, 75, 100, 250 m.o.i for 2 hours and stained with ${\beta}$-galactosidase. Rats(n=24) weighing around 300g were used. Total 14mm sciatic nerve defect was made and connected with calcium phosphate coated conduits. Schwann cells$(1{\times}10^6)$ or BDNF-Ad infected Schwann cells$(1{\times}10^6)$ were injected in conduit and only media(MEM) was injected in control group. Twelve weeks after surgery, degree of nerve regeneration was evaluated with gait analysis, electrophysiologic measurements and histomorphometric analysis. Results: 1. Microporous Millipore filter was effective conduit which permitted the adhesion of Schwann cells and inhibited the adhesion of fibroblast. We could enhance the Schwann cell adhesion and survival by coating Millipore filter with calcium phosphate. 2. Schwann cell culture technique using repeated treatment of Ara-C and GDNF was established. The mean number of Schwann cells obtained 1 and 2 weeks after the culture were $1.54{\pm}4.0{\times}10^6$ and $9.66{\pm}9.6{\times}10^6$. 3. The mRNA of BDNF in BDNF-Ad infected Schwann cells was detected using RT-PCR. In Schwann cell $0.69\;{\mu}g/{\mu}l$ of DNA was detected and in BDNF-Adenovirus transfected Schwann cell $0.795\;{\mu}g/{\mu}l$ of DNA was detected. The most effective infection concentration was determined by LacZ Adenovirus and 75 m.o.i was found the most optimal. Conclusion: BDNF-Ad transfected Schwann cells successfully regenerated the 14mm nerve gap which was connected with calcium phosphate coated Millipore filter. The BDNF-Ad group showed better results compared with Schwann cells only group and control group in aspect to sciatic function index, electrophysiologic measurements and histomorphometric analysis.

• 한국식품영양과학회지
• /
• 제34권5호
• /
• pp.581-585
• /
• 2005

김치의 발효와 숙성 에 관여하는 2종의 유산균과 3종의 유제품으로부터 분리된 유산균을 Caco-2 세포 부착성과 $AFB_1$ 흡착능에 대해 비교 검토하여 보았다. 또한 유산균을 생균군, 열처리군, 강산처리군으로 나누어 유산균의 부착성 및 흡착력이 세포벽의 구조와 관련이 있다는 보고를 재확인하고자 하였다. L. plantarum KCTC 3099의 경우 Caco-2 세포 부착성이나 $AFB_1$ 흡착능이 높게 나타났으며 이것은 양성 대조군으로 사용된 L. rhamnosus GG와 유사한 수준을 나타내었다. 하지만 L. mesenteroides KCTC 3001은 Caco-2 부착성은 다소 높게 나타났으나 $AFB_1$ 흡착능은 낮게 나타났다. 이것은 Caco-2세포에 결합하는 부위와 $AFB_1$에 결합하는 부위가 일치하지는 않는다는 것을 암시하는 것으로 사료된다. 또한 유산균의 처리방법에 따라서도 다양한 차이를 보였는데 본 실험에서는 강산처리군의 경우 보다 효과적인 것으로 나타났으며 세포벽의 주된 구조인 peptidoglycan과 polysaccharides이 강산의 처리에 의해 결합이 파괴되면서 Caco2 세포 부착성이나 $AFB_1$ 흡착능의 상승에 영향을 미쳤으리라 여겨진다. 하지만 강산처리에 의한 세포벽의 변화는 비특이적으로 발생하기 때문에 동일한 형태로 모든 유산균에 적용 되기는 어려울 것이며 각 유산균종의 세포벽 구조와 특이 성분의 함량에 따라 다양하게 변화가 일어날 것으로 사료된다.