• Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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• 제33권1호
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• pp.15-23
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• 2006

목 적: 본 연구는 흰쥐 난소를 실험모델로 하여 미성숙 전동 난포의 성장에 대한 pituitary adenylate cyclase-activating polypeptide (PACAP)의 영향을 얄아보고자 하였다. 연구방법: 미성숙 전동 난포를 생후 21일된 흰쥐로부터 분리하여 PACAP을 첨가하거나 첨가하지 않은 무혈청 배양액에서 3일 동안 배양하고, 푸로게스테론 호르몬의 생성, 난포의 성장, 과립막세포의 증식 및 유전자의 동태 등을 관찰하였다. 증식의 정도는 thymidine incorporation 방법으로 검색하고 유전자의 변동은 Northern 분석을 이용하였다. 결 과: PACAP으로 처리한 군은 난포의 직경이 75% 증가한 반면 난포자극호르몬인 FSH로 처리한 군은 65% 증가하였고, PACAP 처리는 과립막 세포의 증식을 강화시켰다. FSH와 PACAP 공히 배양된 흰쥐 난포의 과립막 세포와 FSH에 반응하는 세포주인 GFSHR-17에서의 프로게스테론 생성을 촉진시켰고, PACAP이 FSH의 작용을 증진시켜 SF-1과 아로마타제 유전자 발현을 촉진시켰다. 결 론: 본 연구는 PACAP이 과립막증식과 스테로이드합성을 통하여 전동 난포의 성장을 촉진함을 시사하였고, 또한, SF-1, 아로마타제 등에 대한 FSH의 작용을 도와주는 역할을 PACAP이 담당하므로 PACAP은 초기 난포성장에 필요한 난소국소인자임을 유추할 수 있었다.

• 대한약리학회지
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• 제28권2호
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• pp.129-136
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• 1992

흰쥐 해마(hippocampus)에서 acetylcholine(Ach) 유리에 미치는 $A_1-adenosine$ 수용체의 역할과 post-receptor 기전에 있어서 adenylate cyclase 계의 관여여부에 관한 지견을 얻고자 하여 $[^3H]-choline$으로 평형시킨 해마 slice를 사용하여 $[^3H]-ACh$ 유리에 미치는 여러가지 약물들의 영향을 관찰하였다. $A_1-adenosine$ 수용체 흥분제인 $N^6-cyclopentyladenosine(CPA,\;0.1{\sim}10\;{\mu}M)$은 전기자극$(3Hz,\;5\;Vcm^{-1},\;2\;ms,\;rectangular\;pulses)$에 의한 $[^3H]-ACh$ 유리를 용량 의존적으로 감소시켰다. $A_1-adenosine$ 수용체 차단제인 8-cyclopentyl-1, 3-dipropylxanthine$(DPCPX,\;1{\sim}10\;{\mu}M)$은 용량 의존적으로 $[^3H]-ACh$ 유리를 증가시켰으며, 이때 기저(basal)유리 또한 증가됨을 관찰할 수 있었고, $2\;{\mu}M$ DPCPX 전처리는 CPA의 효과를 길항하여 CPA에 의한 용량반응곡선을 우측으로 이동시킴을 볼 수 있었다. G protein 억제제인 N-ethylmaleimide$(NEM,\;10\;&\;30\;{\mu}M)$는 그 자체에 의하여 자극에 의한 ACh 유리를 증가시켰으며, 기저유리 또한 증가함을 볼 수 있었다. NEM 전처리에 의하여 CPA의 효과는 완전히 소실되었다. 한편 adenylate cyclase 활성화제인 forskolin$(0.3{\sim}10\;{\mu}M)$은 기저유리에 변함없이 용량의존적인 $[^3H]-ACh$ 유리의 증가를 초래하였으며 $3\;{\mu}M$ forskolin 전처리는 대량$(10\;{\mu}M)$의 CPA의 효과를 제외하고는 CPA의 효과를 억제시킴을 관찰할 수 있었다. 이상의 실험 결과로 흰쥐 해마의 choline 작동성신경의 presynaptic $A_1-adenosine$ heteroreceptor는 ACh 유리에 중요한 역할을 하고 있으며, ACh 유리의 조절에 Gi-단백질을 통한 adenylate cyclase 계의 관여가 확실하다 하겠다.

• 대한수의학회지
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• 제41권1호
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• pp.1-6
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• 2001

Pituitary adenylate cyclase activating polypeptide (PACAP)는 양의 뇌하수체에서 처음 분리 되었고, 뇌하수체 전엽세포의 cAMP의 생성을 자극하며, 흰쥐고환의 정자형성과 steroid 호르몬 형성에 관련한다고 알려져 있다. 이 연구는 성숙한 흰쥐의 고환에서 PACAP mRNA와 그 단백질의 분포를 조사하여 아래와 같은 결론을 얻었다. PACAP mRNA와 그 단백질은 흰쥐의 정세관에서 정자세포의 생성단계에 따라 특이적으로 발현되었다. 이들은 정세관의 발달단계 중 III~VII 기의 정자세포에서 발현되었고, 특히 V 기에서 초기 VII 기의 원형의 정자세포에서 가장 강하게 발현되었다. 이러한 결과는 흰쥐고환의 발달단계에 있는 정자세포에서 합성된 PACAP이 정자형성에 관련된다는 것을 나타내므로, PACAP이 고환의 기능에 중요한 역할을 하는 것을 암시한다.

• The Korean Journal of Physiology and Pharmacology
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• 제19권5호
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• pp.435-440
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• 2015

This study aimed to investigate the effect of pituitary adenylate cyclase-activating peptide (PACAP) on the pacemaker activity of interstitial cells of Cajal (ICC) in mouse colon and to identify the underlying mechanisms of PACAP action. Spontaneous pacemaker activity of colonic ICC and the effects of PACAP were studied using electrophysiological recordings. Exogenously applied PACAP induced hyperpolarization of the cell membrane and inhibited pacemaker frequency in a dose-dependent manner (from 0.1 nM to 100 nM). To investigate cyclic AMP (cAMP) involvement in the effects of PACAP on ICC, SQ-22536 (an inhibitor of adenylate cyclase) and cell-permeable 8-bromo-cAMP were used. SQ-22536 decreased the frequency of pacemaker potentials, and cell-permeable 8-bromo-cAMP increased the frequency of pacemaker potentials. The effects of SQ-22536 on pacemaker potential frequency and membrane hyperpolarization were rescued by co-treatment with glibenclamide (an ATP-sensitive $K^+$ channel blocker). However, neither $N^G$-nitro-L-arginine methyl ester (L-NAME, a competitive inhibitor of NO synthase) nor 1H-[1,2,4]oxadiazolo[4,3-${\alpha}$]quinoxalin-1-one (ODQ, an inhibitor of guanylate cyclase) had any effect on PACAP-induced activity. In conclusion, this study describes the effects of PACAP on ICC in the mouse colon. PACAP inhibited the pacemaker activity of ICC by acting through ATP-sensitive $K^+$ channels. These results provide evidence of a physiological role for PACAP in regulating gastrointestinal (GI) motility through the modulation of ICC activity.

• 한국식품영양과학회지
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• 제27권2호
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• pp.333-337
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• 1998

This study was carried out to get infomation on the nitric oxide production ability and its formation mechanisms of polysaccharides extracted from Ganoderma lucidum(PSG) by using murine macrophage cell line. The cultured mycelial cells of Ganoderma lucidum were extracted by alkali, and than neutralized by acid. The extract were passed through the column of DEAE cellulose for more purification. The neutral fraction was concentrated and precipitated with 95% ethanol. The precipitate was lyophilized and PSG was obtained. The immunomodulating effects of PSG on macrophage were performed by using murine macrophage cell line ATCC TIB 71 cells with PSG 0.5mg. PSG alone could not induce the production of nitrite, but it had a significant potential effect on nitrite secretion when the cells were primed and triggered with BCG and Interferon(IFN)-${\gamma}$. Also it was prominent by using calcium channel blocker(verapamil) and adenylate cyclase activator(forskolin).

• 대한생식의학회:학술대회논문집
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• 대한불임학회 2004년도 제47차 추계학술대회
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• pp.41-41
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• 2004

• 한국미생물학회:학술대회논문집
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• 한국미생물학회 2009년도 International Meeting of the Microbiological Society of Korea
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• pp.123-124
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• 2009

• The Korean Journal of Physiology and Pharmacology
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• 제1권3호
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• pp.303-313
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• 1997

The role of the lower esophageal sphincter(LES) is characterized by the ability to maintain tone and to relax allowing the passage of a bolus. It is known that LES relaxation during swallowing may be induced by the cessation of the tonic neural excitation and the activation of non-adrenergic, non-cholinergic(NANC) inhibitory neurons. Furthermore, it is generally accepted that the relaxation of the smooth muscle is mediated primarily by the elaboration of adenosine 3',5'-cyclic monophosphate(cyclic AMP) and guanosine 3',5'-cyclic mono-phosphate(cyclic GMP) via activation of adenylate cyclase and guanylate cyclase, respectively. It is thus possible that cyclic nucleotides might be a second messenger involved in neural stimulation-induced relaxation of LES, although a relationship between relaxation and changes in cyclic nucleotides after neural stimulation has not been established. The present study was performed to define the participation of cyclic nucleotides in the relaxation of LES of dog in response to neural stimulation. Electrical field stimulation(EFS) caused relaxation of the canine isolated LES strips in a frequency-dependent manner, which was eliminated by pretreatment with tetrodotoxin$(1{\mu}M)$, but not by atropine$(100{\mu}M)$, guanethidine$(100{\mu}M)$ and indomethacin$(10{\mu}M)$. The nitric oxide synthase inhibitors, $N^G-nitro-L-arginine$, $N^G-nitro-L-arginine$ methyl ester and $N^G-monomethyl-L-arginine$ inhibited EFS-induced relaxation. Additions of sodium nitroprusside, a nitrovasodilator and forskolin, a direct adenylate cyclase stimulant, caused a dose-dependent relaxation of LES smooth muscle. Effects of sodium nitroprusside and forskolin were selectively blocked by the corresponding inhibitors, methylene blue for guanylate cyclase and N-ethylmaleimide(NEM) for adenylate cyclase, respectively. Dibutyryl cyclic AMP and dibutyryl cyclic GMP caused a concentration-dependent relaxation of the LES smooth muscle tone, which was not blocked by NEM or methylene blue, respectively. However, both NEM and methylene blue caused significant antagonism of the relaxation in LES tone in response to EFS. EFS increased the tissue cyclic GMP content by 124%, whereas it did not affect the tissue level of cyclic AMP. Based on these results, it is suggested that one of the components of canine LES smooth muscle relaxation in response to neural stimulation is mediated by an increase of cyclic GMP via the activation of guanylate cyclase. Additionally, an activation of cyclic AMP generation system was, in part, involved in the EFS-induced relaxation.

• Biomolecules & Therapeutics
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• 제8권4호
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• pp.325-331
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• 2000

The present study was designed to assess the role of spinal adenosine $A_2$ receptor in the regulation of cardiovascular functions such as mean arterial pressure (MAP) and heart rate (HR) in male Sprague-Dawley rats. Rats (250~300 g) were anesthetized with urethane and paralyzed with d-tubocurarine and artificially ventilated. blood pressure and HR were continuously monitored via a femoral catheter connected to a pressure transducer and a polygraph. Drugs were administered intrathecally using injection cannula through guide cannula which was inserted inthrathecally at lower thoracic level through a puncture of an atlantooccipital mombrane. Intrathecal injection of an adenosine $A_2$ receptor agonist, 5'-(N-cyclopropyl)-carboxamaidoadenosine (CPCA; 1, 2 and 3 nmol, respectively), produced a dose-dependent decrease in MAP and HR. Pretreatment with $N^{G}$-nitro-L-arginine methyl ester (L-NAME), a nitric oxide synthase inhibitor or 10 nmol of MDL-12,330, an adenylate cyclase inhibitor blocked significantly the depressor and bradycardic effect of 2 nmol of CPCA. But, Pretreatment with 3 nmol of bicuculline, gamma-aminobutyric acid A (GAB $A_{A}$) receptor antagonist, or 50 nmol of 5-aminovaleric acid, GAB $A_{B}$ receptor antagonist did not inhibit the depressor and bradycardic effect of 2 nmol of CPCA. These results indicate that adenosine $A_2$ receptor in the spinal cord plays an inhibitory role in the regulation of cardiovascular function and that the depressor and bradycardic action of adonosine $A_2$ receptor are mediated via the synthesis of nitric oxide and the activation of adenylate cyclase in the spinal cord of rats.s.s.s.

• 한국동물학회지
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• 제30권1호
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• pp.1-9
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• 1987

생쥐 난자-난구 복합체를 인공배양하면서 adenylate cyclase의 촉진제인 forskilin과 phosphodiesterase의 저해제인 3-isobutyl-1-methylxanthine(IBMX)을 배양액에 첨가하여 이들이 난구세포의 분산과 난자의 성숙(핵붕괴)에 미치는 효과를 관찰한 결과 다음과 같았다. 1. Forskilin은 0.001$\mu$M에서 부터 난구세포의 분산을 유도하기 시작하여 (36%) 0.1-10$\mu$M 구간에서 최대의 분산율을 나타내었고 (80-90%) 100$\mu$M에서는 그 효과가 줄어들었다(60%). 이때 난자의 핵 붕괴는 10$\mu$M까지 정상으로 일어나다 (75-80%) 100$\mu$M에서 부분적으로 억제되기 시작하였다(40%). 2. IMBX는 0.01$\mu$M에서 부터 난구세포의 분산을 유도하기 시작하여 (30%) 1-1,000$\mu$M의 전 구간에서 최대의 분산율(81-89%)을 나타내었다. 난자들은 10$\mu$M의 농도까지 정상적으로 핵 붕괴를 일으키었으나(90% 이상) 100$\mu$M 이상에서 급격히 억제되었다(14%). 3. 난구세포의 분산을 유도하는데 필요한 최소의 자극기간을 조사해 본 결과 HCG는 2분, FSH와 forskilin은 15-30분, IBMX는 2시간이었다. 위 결과로 부터 생쥐 난구세포에서 cAMP의 농도를 높이는데 adenylate cyclase 와 phosphodiesterase의 두 효소가 모두 중요한 기여를 하며 난구세포는 단 기간에 생긴 cAMP의 peak로서 분산이 유도될 수 있으나 난자의 성숙억제 과정에서는 지속적인 cAMP의 존재가 필요하다는 것을 알았다.