Jo, Kwang-Wook;Kim, Seong-Rim;You, Seung-Hoon;Kim, Sang-Don;Park, Ik-Seong;Baik, Min-Woo
Journal of Korean Neurosurgical Society
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제37권4호
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pp.287-292
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2005
Objective: Recent clinical studies have demonstrated that intracisternal administration of recombinant tissue plasminogen activator(rt-PA) can facilitate the normal clearing of blood from the subarachnoid space. Urokinase, a first generation fibrinolytic agent, has been used to liquify such clots with some success. Therefore, recombinant tissue plasminogen activator, a second generation fibrinolytic drug that may be safer and more effective, is studied to evaluate its dosage to lyse clots in vitro and reactivity in the brain parenchyme. Methods: Intracerebral hematomas were created by stereotactically injecting 2ml of clotted autogenous blood into the brain parenchyme of total 28 anesthetized adult cats (weighting 3.8 to 4.1 kg). The control animals (group A) received 1 ml of normal saline injected into the clots and the experimental animals received each 0.1 mg of rt-PA (group B), 0.5mg of rt-PA (group C) and 1 mg of rt-PA (group D) at 6 hours after the clot injection. Results: 1. The amount of remained clots after lysing the hematomas were as follows: $1.80{\pm}0.17ml$ in group A, $1.65{\pm}0.23ml$ in group B, $0.61{\pm}0.37ml$ in group C and $0.52{\pm}0.34$ in group D. The result indicated that hematomas in rt-PA treated groups (C & D) were lysed better than the control group. 2. At least 0.5mg of rt-PA should be required for the lysis of 2ml of hematomas. 3. Light microscopic examination revealed no histological evidence of hemorrhage in tissue sections from each brain. Conclusion: Recombinant tissue plasminogen activator may be safely and effectively employed for the lysis of intracerebral hematomas in animal model.
Four dogs were brought to the Veterinary Medicine Teaching Hospital of Seoul National University (VMTH SNU) with a history of hind limb ataxia, three with pain, one without pain. Three of the four showed weak to absent femoral pulses and cold extremities. Thromboembolism was identified by ultrasonography in the external and/or internal iliac arteries. A thrombolytic agent, recombinant tissue plasminogen activator (rt-PA), was administered (0.5-1 mg/kg, every 60-120 min, 3-5 doses). Two dogs (Cases 2 and 3), which were instantly provided rt-PA treatment, survived 6 and 17 months, respectively, although hematemesis and hematochezia were observed during treatment. In the other two dogs (Cases 1 and 4), rt-PA was administered 4 and 28 days after the appearance of pelvic limb symptoms, which may have limited the benefits of the treatment. When rt-PA treatment is instituted instantly and the side effects are monitored thoroughly during treatment, a good prognosis might be expected in canine aortic thromboembolism. For this reason, we suggest that rt-PA treatment should be initiated immediately if thromboembolism is identified.
Background: Intrapleural fibrinolytic therapy (IPFT) has been used as an effective agent since 1949 for managing complicated pleural effusion and empyema. Several agents, such as streptokinase, urokinase (UK), and recombinant tissue plasminogen activator (rt-PA), have been found to be effective with variable effectiveness. However, a head-tohead controlled trial comparing the efficacy of the most frequently used agents, i.e., UK and rt-PA (alteplase) for managing complicated pleural effusion has rarely been reported. Methods: A total of 50 patients were randomized in two intervention groups, i.e., UK and rt-PA. The dose of rt-PA was 10 mg, and that of UK was 1.0 lac units. UK was given thrice daily for 2 days, followed by clamping to allow the retainment of drugs in the pleural space for 2 hours. rt-PA was instilled into the pleural space twice daily for 2 days, and intercostal drainage was clamped for 1 hour. Results: A total of 50 patients were enrolled into the study, of which 84% (n=42) were males and 16% (n=8) were females. Among them, 30 (60%) patients received UK, and 20 (40%) patients received alteplase as IPFT agents. The percentage of mean±standard deviation changes in pleural opacity was -33.0%±9.9% in the UK group and -41.0%±14.9% in the alteplase group, respectively (p=0.014). Pain was the most common adverse side effect, occurring in 60% (n=18) of the patients in the UK group and in 40% (n=8) of the patients in the alteplase group (p=0.24), while fever was the second most common side effect. Patients who reported early (within 6 weeks of onset of symptoms) showed a greater response than those who reported late for the intervention. Conclusion: IPFT is a safe and effective option for managing complicated pleural effusion or empyema, and newer agents, such as alteplase, have greater efficacy and a similar adverse effect profile when compared with conventional agents, such as UK.
자궁내막증은 흔한 부인과적 질병이며 여성 불임의 한 원인이 되나 그 발생 원인에 대하여서는 아직 논란의 여지가 많다. 최근 월경혈의 역류가 한 원인이며 자궁내막증 환자가 정상여성에서 보다 역류되는 월경혈의 양이 많거나 침습성이 강한 것이 자궁내막증의 발생 원인이 될 수 있다는 이론들이 소개되었다. 종양이나 자궁내막 조직의 침습이나 전이에는 세포막외 기질 및 기저막의 파괴가 일어나야 하는데 이 과정에 plasminogen activators (PAs)나 matrix metalloproteinase (MMPs)같은 proteolytic enzyme이 관여한다. 이에 자궁 내막증환자와 대조군의 자궁내막에서 PA나 MMP를 억제하는 plasminogen activator inhibitor-1 (PAI-1)나 tissue inhibitor of metalloproteinase (TIMP-3)의 mRNA 발현의 차이를 quantitative competitive RT PCR로 연구하였으며, 그 결과 자궁내막증 환자의 황체기 자궁내막에서는 정상 대조군 환자에서 보다 PAI-1과 TIMP-3 mRNA발현이 낮음을 알 수 있었다. 따라서 자궁내막증 환자의 자궁내막에서는 PA와 MMP의 활성도가 증가할 수 있으며 이 증가된 proteolytic activity로 인하여 역류된 자궁내 막 조직의 복강내 침습이 보다 쉽게 일어날 가능성이 있다.
목 적: 자궁내막증에서 그 병태생리를 연구함에 있어서 fibrinolytic system과의 연관성을 알아보기 위해서 자궁내막증 환자와 자궁내막증이 아닌 대조군의 자궁내막에서 urokinase plasminogen activator (u-PA)와 urokinase type plasminogen activator receptor (u-PAR)의 mRNA의 발현의 차이를 알아보고자 하였다. 연구방법: 본원 산부인과를 방문한 한국인 여성 중 수술을 통해 자궁내막증을 진단 받은 33명의 환자와 난소 낭종 등의 양성 질환으로 개복술이나 골반경 수술을 시행한 환자 중 자궁내막증이 없음을 확인한 여성 32명을 대조군으로 하였다. 각각의 대상으로부터 얻은 자궁내막 조직에서 RNA를 추출하여 RT-QC PCR을 시행하여 얻고자 하는 대상의 mPNA 양을 정량화하여 두 군 간에 차이가 있는지를 생리주기에 따라 비교하였다. 결 과: u-PA와 u-PAR의 mPNA는 자궁내막증 환자 및 대조군에서 모두 발현하였으며, 자궁내막증 환자에서의 u-PA mPNA는 증식기 자궁내막에서 대조군에 비해 통계적으로 유의하게 높게 발현됨을 관찰하였다. u-PAR mPNA는 두 군 사이에서 생리주기 전반에 걸쳐 비교했을 때 통계적으로 유의한 차이는 없었다. 결 론: 자궁내막증의 병태생리와 관련하여 u-PA와 u-PAR의 mPNA 발현에 대해서 조사한 결과 u-PA mPNA가 자궁내막증 환자에서 대조군보다 통계적으로 유의하게 높게 발현되었고 이것은 자궁내막증 환자의 자궁내막의 성격이 좀 더 침습적이고, 이로써 복막에의 침습에도 더 유리한 역할을 가진다고 볼 수 있다. 자궁내막증에 대한 기본적인 병태생리로 볼 때, 자궁내막 자체가 가장 중요한 역할을 하리라고 보며, 이를 단백질 분해능과 연관지어 생각해 볼 때, u-PA 발현의 dysregulation이 자궁내막의 침습에 중요한 병태생리라고 생각된다.
의료용 단백질로 중요한 인체 혈관 내피세포 유래 t-PA를 알팔파 식물체를 이용하여 생산하는 기술을 개발하였다. 식물체에서 발현된 t-PA는 동물세포에서 생산된 t-PA와 동등한 시험관 내의 인공 혈전 용해 활성 및 생화학적 특성에서 유사함을 가지고 있었다. 본 연구에서는 식물체에서 발현되는 t-PA 단백질의 알팔파 코돈 이용에 최적화된 합성 유전자이용 양적 증대, 소포체에 표적에 따른 발현양 증대, 6개의 histidine의 부착에 따른 정제의 효율성을 고려하였고 두 종류의 프로모터 (CaMV 35S와 알팔파 Rbcsk-1A)를 이용하여 t-PA 및 파생 단백질들의 발현 효율을 비교 확인하고자 6가지의 식물발현 벡터를 제작하였다. 0.3%의 제초제 살포 후에 저항성을 갖는 알팔파 식물체들의 t-PA 유전자 및 파생 유전자의 genomic DNA내의 삽입 유무는 PCR법을 활용하여 t-PA, 파생 유전자 및 합성 유전자의 크기에 해당하는 1.6 kb의 PCR 산물을 확인 할 수 있었다. 6가지 발현벡터로 형질전환된 알팔파 잎 추출물에서 전체 수용성 단백질내의 t-PA 및 파생 단백질의 평균 발현양은 $9.7-39.5{\mu}g/TSP$ (mg)로 측정되었다. 이중 p221a-t-PAER 발현벡터로 형질전환된 알팔파의 잎 추출물에서 가장 높은 $75.1{\mu}g/TSP$(mg)의 발현양을 나타났다. 알팔파 잎에 발현된 재조합 t-PA 분자량은 상업적으로 판매되는 t-PA와 동일한 68 kDa으로 확인되었다. 형질전환된 알팔파 잎 추출물들의 평균 피브린 용해활성은 3.2-8.1cm를 나타내었다. 또한 t-PA 및 그의 파생 단백질을 발현하는 알팔파 식물체는 야생종 알팔파와 비교했을 때 성장에 있어서 별 다른 차이를 보이지 않았다.
목적: 고형암이 주위조직으로의 침윤과 타장기로의 전이에는 단백분해효소의 활동이 필요하다. Urokinase type plasminogen activator (uPA)는 serine proteinase의 하나로 세포주의 단백분해와 혈관형성에 중요한 물질로서 고형암의 침윤과 전이에 중요한 역할을 한다. uPA는 유방암, 폐암, 방광암, 위암, 직장결장암, 난소암, 및 연조직 육종에서 중요한 예후지표로 알려져 있다. 본 연구에서 저자들은 위암 조직과 정상 점막에서 uPAR유전자의 발현양상에 대해서 조사하고 기존에 알려진 예후인자와의 연관성을 비교 분석하여 향후 중요한 분자학적 치료 target으로의 역할로서의 의의를 살펴보고자 한다. 대상 및 방법: 1997년 5월 이후 위암으로 진단되어 근치적 혹은 고식적 위장절제술을 시행한 위암 환자 35명을 대상으로 하였다. Northern blot analysis와 RT-PCR을 통해 uPAR mRNA의 발현을 확인하였으며, RNA추출을 위한 재료는 위장절제술 직후 종양조직과 동결절편 생검상 종양세포가 없는 것으로 확인된 부위의 정상 위암 조직을 동일 환자로부터 추출하였다. 이들 환자의 육안적 소견, 조직학적 소견, 생존율 등은 내시경과 수술보고서 병리보고서, 병록지 등을 참고하였다. 결과: uPAR mRNA의 expression과 환자의 예후와의 관계를 평가하기 위해서, gene expression과 이미 확립된 clinicopathologic prognostic와의 관계를 비교하였다. 이러한 factor를 중에서 uPAR mRNA expression은 림프절 전이 여부 (P=0.03), TNM stage (P=0.01)와는 일정한 연관성이 있음을 보였으며, 나이나 성별, 종양크기, histologic type, Lauren classification, Ming classification, serosa invasion, vascular invasion, lymphatic vessel invasion, Neural invasion, omental invasion, macroscopic type와는 상관관계를 보이지 않았다. 결론: 종양 세포에서 uPAR를 평가하는 것은 위암의 예후 뿐만 아니라 질병의 재발을 예측하는데 사용될 수 있을 것으로 생각된다.
Objective: CXCL12 exerts a wide variety of chemotactic effects on cells. Evidence indicates that CXCL12, in conjunction with its receptor, CXCR4, promotes invasion and metastasis of tumor cells. Our objective was to explore whether the CXCL12-CXCR4 biological axis might influence biological behavior of pancreatic cancer cells. Methods: Miapaca-2 human pancreatic cancer cells were cultured under three different conditions: normal medium (control), medium + recombinant CXCL12 (CXCL12 group), or medium + CXCR4-inhibitor AMD3100 (AMD3100 group). RT-PCR was applied to detect mRNA expression levels of CXCL12, CXCR4, matrix metalloproteinase 2 (MMP-2), MMP-9, and human urokinase plasminogen activator (uPA). Additionally, cell proliferation and invasion were performed using CCK-8 colorimetry and transwell invasion assays, respectively. Results: CXCL12 was not expressed in Miapaca-2 cells, but CXCR4 was detected, indicating that these cells are capable of receiving signals from CXCL12. Expression of extracellular matrix-degrading enzymes MMP-2, MMP-9, and uPA was upregulated in cells exposed to exogenous CXCL12 (P<0.05). Additionally, both proliferation and invasion of pancreatic cancer cells were enhanced in the presence of exogenous CXCL12, but AMD3100 intervention effectively inhibited these processes (P<0.05). Conclusions: The CXCL12-CXCR4 biological axis plays an important role in promoting proliferation and invasion of pancreatic cancer cells.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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