Rapid accumulation of reactive oxygen species (ROS) and their toxic reaction products with lipids and proteins significantly contributes to the damage of crop plants under biotic and abiotic stresses. We have identified several stress activated alfalfa genes, including the gene of the alfalfa ferritin and a novel NADPH-dependent aldose/aldehyde reductase enzyme. Transgenic tobacco plants that synthesize alfalfa ferritin in vegetative tissues-either in its processed form in chloroplast or in the cytoplasmic non-processed form-retained photosynthetic function upon free radical toxicity generated by paraquat treatment and exhibited tolerance to necrotic damage caused by viral and fungal infections. We propose that by sequestering intracellular iron involved in generation of the very reactive hydroxyl radicals through a Fenton reaction, ferritin protects plant cells from oxidative damage. Our preliminary results with the other stress-inducable alfalfa gene (a NADPH-dependent aldo-keto reductase) indicate, that the encoded enzyme may play role in the stress response of the plant cells. These studies reveal new pathways in plants that can contribute to the increased stress resistance with a potential use in crop improvement.
Kim, So Wun;Min, Chul Woo;Gupta, Ravi;Jo, Ick Hyun;Bang, Kyong Hwan;Kim, Young-Chang;Kim, Kee-Hong;Kim, Sun Tae
Korean Journal of Medicinal Crop Science
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v.22
no.5
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pp.398-404
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2014
Salt stress is one of the major abiotic stresses affecting the yield of ginseng (Panax ginseng C. A. Meyer). The objective of this study was to identify bio-marker, which is early responsive in salt stress in ginseng, using proteomics approach. Ginseng plants were exposed to 5 ds/m salt concentration and samples were harvested at 0, 6, 12 and 18 hours after exposure. Total proteins were extracted from ginseng leaves treated with salt stress using Mg/NP-40 buffer and were separated on high resolution 2-DE. Approximately $1003{\pm}240$ (0 h), $992{\pm}166$ (6 h), $1051{\pm}51$ (12 h) and $990{\pm}160$ (18 h) spots were detected in colloidal CBB stained 2D maps. Among these, 8 spots were differentially expressed and were identified by using MALDI-TOF/TOF MS or/and LC-MS/MS. Ethylene response sensor-1 (spot GL 1), nucleotide binding protein (spot GL 2), carbonic anhydrase-1 (spot GL 3), thylakoid lumenal 17.9 kDa protein (spot GL 4) and Chlorophyll a/b binding protein (spot GL 5, GL 6) were up-regulated at the 12 and 18 hour, while RuBisCO activase B (spot GL 7) and DNA helicase (spot GL 8) were down-regulated. Thus, we suggest that these proteins might participate in the early response to salt stress in ginseng leaves.
Kim, Hyo Chul;Song, Kitae;Moon, Jun-Cheol;Kim, Jae Yoon;Kim, Kyung-Hee;Lee, Byung-Moo
KOREAN JOURNAL OF CROP SCIENCE
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v.64
no.4
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pp.432-440
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2019
Global climate change exerts adverse effects on maize production. Among abiotic stresses, drought stress during the tasseling stage (VT) can increase anthesis-silking intervals (ASI) and decrease yield. We performed an evaluation of ASI and yield using a drought-sensitive line (Ki3) and a drought-tolerant line (Ki11) to analyze the correlation with ASI and yield. Moreover, the de novo data of Ki11 were analyzed to find putative novel transcripts related todrought stress in tropical maize. A total of 182 transcripts, with a log2 ratio >1.5, were found by comparing drought conditions to a control. The top 40 transcripts of high expression levels in the de novo analysis were selected and analyzed with PCR. Of the 40 transcripts, six novel transcripts were detected by quantitative real-time PCR (qRT-PCR) using seedling and VT stage samples. Five transcripts (transcripts_1, 12, 34, 35, and 40) were up-regulated in the Ki11 shoot at seedling stage, and transcripts_1, 12, and 40 were up-regulated at the re-watering stage after 12 h of drought stress. The transcripts_32 and 34 were up-regulated at the VT stage. Hence, transcript_34 possibly plays a significant role in drought tolerance during the seedling and VT stages. The transcript_32 was identified as chloramphenicol acetyltransferase (CAT) by Pfam domain analysis. The function of the other transcripts remained unknown. Further characterization of these novel transcripts in genetic regulation will be of great value for the improvement of maize production.
Knock-out of a gene by insertional mutagenesis is a direct way to address its function through the mutant phenotype. Among ca. 15,000 gene-trapped Ds insertion lines of rice, we identified one line from selected sensitive lines in highly salt stress. We conducted gene tagging by TAIL-PCR, and DNA gel blot analysis from salt sensitive mutant. A gene encoding an oligopeptide transporter (OPT family) homologue was disrupted by the insertion of a Ds transposon into the OsOPT10 gene that was located shot arm of chromosome 8. The OsOPT10 gene (NP_001062118.) has 6 exons and encodes a protein (752 aa) containing the OPT family domain. RT-PCR analysis showed that the expression of OsOPT10 gene was rapidly and strongly induced by stresses such as high-salinity (250 mM), osmotic, drought, $100\;{\mu}M$ ABA. The subcellular localization assay indicated that OsOPT10 was localized specifically in the plasma membrane. Overexpression of OsOPT10 in Arabidopsis thaliana and rice conferred tolerance of transgenic plants to salt stress. Further we found expression levels of some stress related genes were inhibited in OsOPT10 transgenic plants. These results suggested that OsOPT10 might play crucial but differential roles in plant responses to various abiotic stresses.
Huo, Yue;Kang, Jong Pyo;Ahn, Jong Chan;Kim, Yeon Ju;Piao, Chun Hong;Yang, Dong Uk;Yang, Deok Chun
Journal of Ginseng Research
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v.45
no.2
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pp.218-227
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2021
Background: Panax ginseng is one of the most important medicinal plants and is usually harvested after 5 to 6 years of cultivation in Korea. Heavy metal (HM) exposure is a type of abiotic stress that can induce oxidative stress and decrease the quality of the ginseng crop. Siderophore-producing rhizobacteria (SPR) may be capable of bioremediating HM contamination. Methods: Several isolates from ginseng rhizosphere were evaluated by in vitro screening of their plant growth-promoting traits and HM resistance. Subsequently, in planta (pot tests) and in vitro (medium tests) were designed to investigate the SPR ability to reduce oxidative stress and enhance HM resistance in P. ginseng inoculated with the SPR candidate. Results: In vitro tests revealed that the siderophore-producing Mesorhizobium panacihumi DCY119T had higher HM resistance than the other tested isolates and was selected as the SPR candidate. In the planta experiments, 2-year-old ginseng seedlings exposed to 25 mL (500 mM) Fe solution had lower biomass and higher reactive oxygen species level than control seedlings. In contrast, seedlings treated with 108 CFU/mL DCY119T for 10 minutes had higher biomass and higher levels of antioxidant genes and nonenzymatic antioxidant chemicals than untreated seedlings. When Fe concentration in the medium was increased, DCY119T can produce siderophores and scavenge reactive oxygen species to reduce Fe toxicity in addition to providing indole-3-acetic acid to promote seedling growth, thereby conferring inoculated ginseng with HM resistance. Conclusions: It was confirmed that SPR DCY119T can potentially be used for bioremediation of HM contamination.
Transposon-mediated insertional mutagenesis is one of powerful strategy for assessing functions of genes in higher plants. In this report, we have selected highly susceptible and tolerance plant by screening about high salt (3% NaCl) and cold stresses ($4^{\circ}C$) from F2 seeds of 30,000 Ac/Ds insertional mutagenesis lines in rice (Oryza sativa L. cv. Dongjin). In order to identify the gene tagging, insertion of Ds element was analyzed by Southern blot and these results revealed that 19 lines were matched genotype of selected lines with phenotype from the first selected 212 lines, and 13 lines have one copy of Ds elements. The Franking Sequence Tags (FSTs) of selected mutant lines showed high similarities with the following known function genes: signal transduction and regulation of gene expression (transpoter, protease family protein and apical meristem family protein), osmotic stress response (heat shock protein, O-methyltransferase, glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase and drought stress induce protein), vesicle trafficking (SYP 5 family protein) and senescence associated protein. The expression pattern of 19 genes were analyzed using RT-PCR under the abiotic stresses of 9 class; 250mM NaCl, osmotic, drought, 3% $H_2O_2$, $100{\mu}M$ ABA, $100{\mu}M$ IAA, 0.1 ppm 2,4-D, $4^{\circ}C$ cold and $38^{\circ}C$ high temperature. Isolated knock-out genes showed the positive response about 250 mM NaCl, drought, $H_2O_2$, PEG, IAA, 2,4-D, ABA treatment and low ($4^{\circ}C$) and high temperature ($38^{\circ}C$). The results from this study indicate that function of selected knock-out genes could be useful in improving of tolerance to abiotic stresses as an important transcriptional activators in rice.
Proceedings of the Korean Society of Plant Pathology Conference
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2003.10a
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pp.78.2-79
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2003
Pepper defensin ( CADEFl) clone was isolated from cDNA library constructed from pepper leaves infected with avirulent strain Bv5-4a of Xanthomonu campestris pv. vesicatoria. The deduced amino acid sequence of CADEFl is 82-64% identical to that of other plant defensins. Putative protein encoded by CADEFl gene consists of 78 amino acids and 8 conserved cysteine residues to form four structure-stabilizing disulfide bridges. Transcription of the CADEF1 gene was earlier and stronger induced by X campestris pv. vesicatoria infection in the incompatible than in the compatible interaction. CADEF1 mRNA was constitutively expressed in stem, root and green fruit of pepper. Transcripts of CADEFl gene drastically accumulated in pepper leaf tissues treated With Salicylic acid (SA), methyl jasmonate (MeJA), abscisic acid (ABA), hydrogen Peroxide (H$_2$O$_2$), benzothiadiazole (BTH) and DL-${\beta}$-amino-n-butyric acid (BABA). In situ hybridization results revealed that CADEF1 mRNA was localized in the phloem areas of vascular bundles in leaf tissues treated with exogenous SA, MeJA and ABA. Strong accumulation of CADEF1 mRNA occurred in pepper leaves in response to wounding, high salinity and drought stress. These results suggest that bacterial pathogen infection, abiotic elicitors and some environmental stresses may play a significant role in signal transduction pathway for CADEF1 gene expression.
Kim, Yu-Jin;Shim, Ju-Sun;Lee, Jung-Hye;Jung, Dae-Young;Sun, Hwa;In, Jun-Gyo;Yang, Deok-Chun
BMB Reports
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v.42
no.10
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pp.673-678
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2009
The cDNA of alcohol dehydrogenase (PgADH) was isolated and characterized from the leaf of Panax ginseng. The cDNA had an open reading frame of 801 bp and a deduced amino acid sequence of 266 residues. The calculated molecular mass of the mature protein is approximately 29 kDa with a predicated isoelectric point of 6.84. Homology analysis revealed that the deduced amino acid of PgADH shares a high degree of homology with the short-chain ADH proteins of other plants. Genomic DNA hybridization analysis indicated that PgADH represents a multi-gene family. The expression of PgADH under various environmental stresses was analyzed at different time points using real-time PCR. ABA, SA and especially JA (80-fold) significantly induced PgADH expression within 24 h of treatment. The positive responses of PgADH to abiotic stimuli suggest that ginseng ADH may protect against hormone-related environmental stresses.
The full-length cDNA of LeAPR1 encoded a protein of 461 amino acid residues, which contained homology with phosphoadenosine phosphosulphate reductase (PAPS reductase) in N-terminal and an adenylylsulfate reductase in N-term and C-terminal. Analysis of the deduced amino acid sequence of LeAPR1 revealed that it shares high sequence identity with potato StAPR (96% identity)(Gene bank accession no. CDC44841). We found that multiple copies of LeAPR1 gene are present in the tomato genome through southern blot using genomic DNA was digested with 3 different restriction enzymes. The expression of LeAPR1 was also examined in various organs and its expression was also detected at high levels in roots and stems. Only high amounts of LeAPR1 transcripts were detected at high transcripts in the leaves at time 0, and then reduced as the plant stressed by the NaCl and abscisic acid (ABA). After 24h treatment of NaCl and ABA were showed increasing patterns of LeAPR1 gene. Time course of LeAPR1 gene expression was examined under oxidative stresses from metyl viologen (MV) and hydrogen peroxide ($H_2O_2$). In the presence of 10 mM $H_2O_2$ and $50\;{\mu}M$ MV, the levels of LeAPR1 transcript in leaves decreased after 1 h, and then increased strongly, peaked at 24 h. Our results indicated that LeAPR1 may play a role function of circadian regulation involved in abiotic stresses signaling pathways.
Chilli peppers are predominantly cultivated in open field systems under abiotic and biotic stress conditions. Abiotic and biotic factors have a considerable effect on plant performance, fruit quantity, and quality. Chilli peppers grow well in a tropical climate due to their adaptation to warm and humid regions with temperatures ranging from 18 to 30℃. Nowadays, chilli peppers are cultivated all around the world under different climatic conditions, and their production is gradually expanding. Expected climate changes will likely cause huge and complex ecological consequences; high temperature, heavy rainfall, and drought have adverse effects on the vegetative and generative development of all agricultural crops including chilli peppers. To gain better insight into the effect of climate change, the growth, photosynthetic traits, morphological and physiological characteristics, yield, and fruit parameters of chilli peppers need to be studied under simulated climate change conditions. Moreover, it is important to develop alternative agrotechnologies to maintain the sustainability of pepper production. There are many conceivable ideas and concepts to sustain crop production under the extreme conditions of future climate change scenarios. Therefore, this review provides an overview of the adverse impacts of climate change and discusses how to find the best solutions to obtain a stable chilli pepper yield.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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