이 글은 지난 5월 29일 본 협회에서 주최한 세계도서의해 기념 강연회에서 “도서관학과 정보과학의 최근연양”이란 주제로 강연한 내용을 간추려 정리한 것이다. 연사 장기택 선생은 1962년에 도미하여 교육심리학 및 Documentation and Information Science를 전공하였다. 1968년에는 Appalachia 교육정보센터의 소장을 역임하였으며 현재는 미국심리학회(APA)의 National Information System for Psychology (NISP)개발 Project의 선임 정보전문가로 활약주이다. 따라서 금번 KIST의 초청으로 일시 귀국하여 약 2개월간 체한하는동안 선생의 바쁜 일정의 틈을 내어 고국의 도서관과 동지들을 위해 강연회를 갖었든 것이다.
New antibiotics having moieties of penicillanic acid, cephalosporanic acid and ampicillin on both ends of the central alkylene were synthesized by reacting 6-aminopenicillanic acid (6-APA), 7-aminocephalosporanic acid (7-ACA) and ampicillin with hexamethylene diisocyanate and sebacoyl chloride, respectively. Antibacterial activities of the compounds were also investigated. The compound derived from sabacic acid and ampicillin exhibited an enhanced antibacterial activities against gram-negative bacteria and was found to be a promising wide-spectrum antibiotic.
Penicillin G amidase (PGA, benzylpenicillinaminohydrolase, EC 3.5.1.11) is industrially important enzyme which converts penicillin G to 6-aminopenicillanic acid (6-APA) and phenylacetic acid (PAA). The PGA in E. coli ATCC 11105 is secreted into the periplasm after removing signal sequences and becomes heterodimer which composed of two subunits, small subunit (24 kDa) and large subunit (65 kDa). In this study, the PGA gene was obtained from E. coli ATCC 11105 using PCR (polymerase chain reaction) technique. The active PGA was successfully secreated into periplasm in E. coli BL2 1(DE3) harboring pET-pga plasmid. The optimized fed-batch fermentation, consisting of a three-step shift of culture temperature from $37^{\circ}C$ to $22^{\circ}C$, gave a productivity of 19.6 U/mL with a cell growth of 62 O.D. at 600 nm.
Jang Sung-Sik;Choo Eui-Young;Han Ki-Seon;Miyamoto Takahisa;Heu Sung-Gi;Ryu Sang-Ryeol
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.16
no.8
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pp.1276-1284
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2006
Listeria monocytogenes is a well-known high-risk foodborne pathogen that grows at refrigeration temperature and is responsible for outbreaks of listeriosis. We report here the incidence of L. monocytogenes in fresh chicken carcasses and present genetic diversity of L. monocytogenes isolates. In this study, 25 g of chicken carcasses from markets in Korea were examined according to the FDA method, and presumptive isolates were confirmed by multiplex PCR assay. L. monocytogenes isolates were analyzed by Pulsed-Field Gel Electrophoresis using restriction enzymes, ApaI and AscI, to obtain strain-specific DNA fragments profiles. Antimicrobial resistance of L. monocytogenes strains against generally used antibiotics (Penicillin G, Kanamycin, Tetracycline, Vancomycin, Cephalothin, Rifampicin, Erythromycin, Ampicillin, Gentamicin, Streptomycin, and Chloramphenicol) were analyzed by NCCLS protocols to examine the presence of antimicrobial resistance in natural L. monocytogenes. Of a total 274 chicken samples, 81 samples (29.6%) were positive for L. monocytogenes. Listeria innocua (50.1%), Listeria welshimeri (6.9%), and Listeria grayi (11.3%) were also detected. PFGE analysis, using restriction enzymes ApaI and AscI, showed 27 pulsotypes of L. monocytogenes. Antimicrobial resistance analysis confirmed the existence of antimicrobial resistance for penicillin G and tetracycline in isolated L. monocytogenes strains.
Background: Vitamin D receptor (VDR) gene has been a subject of extensive pharmacogenetic research recently. Association studies between different types of cancers including prostate cancer (PCa) and VDR gene polymorphism have also been conducted. The objective of this study was to find possible associations between PCa and VDR gene polymorphisms in the Pakistani population. Materials and Methods: A total of 162 subjects, including prostate cancer patients and controls, were genotyped for Apa I, Taq I and Fok I polymorphisms in the VDR gene using allele specific PCR, PCR-RFLP and direct DNA sequencing. Allelic frequencies were tested for Hardy-Weinberg equilibrium and associations between the genetic markers and PCa were calculated using logistic regression. Results: Apa I CC genotype was found to have strongest association with PCa risk, and "A" genotype was found to have protective effect. Fok I and Taq I did not have appreciable levels of association with PCa, although Taq I "TC" heterozygotes seemed to have some protective effect. Similarly the "C" allele of Fok I also seemed to have protective effect. Conclusions: To our knowledge, this is the first report showing association between VDR gene polymorphisms and PCa in Pakistan. Our findings may be somewhat skewed because of small sample size and tendency of consanguineous marriages in Pakistani society; nevertheless, it shows the trend of association and protective effects of certain VDR gene polymorphisms against PCa.
In this study, we report on a simple, efficient method for obtaining penicillin G amidase (PGA) from recombinant Escherichia coli using a formulation mixed with detergent and lysozyme. Research was conducted on the extraction efficiency of PGA from the periplasmic space in cells in terms of the type of detergent, detergent concentration, pH, reaction time, and temperature of permeabilization. The extraction yield of PGA in the formulated surfactant/lysozyme treatment was increased by approximately (55-65 U/ml) in comparison with that in the single surfactant treatment. The released PGA solution was concentrated and exchanged with buffer using an ultrafiltration (U/F) system. The yields of diatomite filtration, membrane filtration (M/F), and U/F were 69.7%, 93.8%, and 77.3%, respectively. A total of 212 KU of PGA was recovered. At the 25-L culture scale, the overall yield of extraction using the mixed surfactant/lysozyme method was 49.2%. The specific activity of extracted PGA was 11 U/mg in protein. The concentrated PGA solution was immobilized on microporous silica beads without further purification of PGA. The total immobilization yield of PGA on the resin was 48.7%, while the enzyme activity was 101 U/g. The immobilized PGA was successfully used to produce 6-APA from penicillin G. Our results indicated that a simple extraction method from periplasmic space in E. coli may be used for the commercial scale production of ${\beta}-lactam$ antibiotics using immobilized PGA.
Penicillins and cephalosporins are biosynthesized from L-.alpha.-aminoadipic acid, L-cysteine and L-valine. A tripeptide, LLD-$\delta$-($\alpha$-aminoadipyl)cysteinylvaline(LLD-ACV) was isolated from fermentation broths of Cephalosporium acremonium as well as of Penicillium chrysogenum and it was proved that the LL-$\delta$-($\alpha$-aminoadipyl cysteine was formed first in mycelia, to which valine would be connected to give LLD-ACV. However, several points are still unsolved; first, what mechanism is involved in the configurational change from L-valine to D-valine, second, what kind of cyclization mechanism gives a $\betha$-lactam ring and a thiazolidine ring and third, what is the pathways for the ring expansion from penicillins to cephalosporins. At present, it seems clear that LLD-ACV is cyclized to give isopenicillin N, which is transformed to penicillin N and further to cepbalosporin C. Other hydrophobic penicillins, including benzyl penicillin and penicillin V, are formed from isopenicillin N by acyl-exchange reactions catalyzed by penicillin transferase, rather than by acylation reaction on 6-aminopenicillanic acid(6-APA), which was isolated from the fermentation broth of P. chrysogenum and which would be formed by hydrolysis of $\delta-(\alpha$-amincadipyl)amido moiety at the C-6 position in isopenicillin N or penicillin N by penicillin acylase. Acylation of 6-APA is catalyzed also by penicillin acylase, but the reaction is proved not to be involved in penicillin biosynthesis. Understanding the biosynthesis of penicillins and cephalsoporins would provide solutions to increase in fermentation yields of penicillins, especially of cephalosporins and a solution to biological production of 7-aminocepbalosporanic acid (7-ACA) which is of importance in pharmaceutical industry. Still regulation mechanisms in penicillin and cephalosporin biosynthesis are unveiled at all.
Ampliciline was synthesized from 6-amino-pencillanic acid (6-APA) and D-.alpha. phenylglycine methyl ester by using amplicilin synthesizing enzyme from Peudomonas melanogenum (IAM 1655). The whole cell enzyme was immobilized by entrapping it in the polyacrylamide gel lattices. The polymer used in the enzyme entrapment was made from 150 mg per ml of acrylamide monomer and 8 mg per ml of N, N'-methylenebisacrylamide. About 200 mg/whole cell enzyme was mixed in the polymer for entrapment. The maximal activity retention after immobilization was 56%. The optimal pH values for the whole cell enzyme and the immobilized whole cell enzyme were 6.0 and 5.9, respectively. The optimal temperature for the enzyme activity were the same for both type of preparations. The enzyme stabilities against pH and heat increased for immobilized whole cell enzyme. Immobilized cell was more stable especially in the acidic condition while both type were found to be very suceptible to thermal inactivation at a temperature above 4.deg.C. The kinetic constants obtained from Lineweaver-Burk plot based on two substate reaction mechanism showed somewhat higher value for immobilized whole cell enzyme as compared to the whole cell enzyme : the Km value for 6-APA were 7.0 mM and 12.5 mM while Km values for phenylglycine methyl ester were 4.5 mM and 8.2 mM, respectively. Using the immobilized whole cell enzyme packed in a column reactor, the productivity of ampiciline was studied by varying the flow rate of substrate solution. At the space velocity, SV, 0.14 hr$^{-1}$ the conversion was 45%. Operational stability found in terms of half life was 30 hr at SV = 0.2 hr.
In this paper, we propose a new affine projection sign algorithm (APSA) to improve the convergence speed of the conventional APSA which has been proposed to enable the affine projection algorithm (APA) to operate robustly in impulsive noise environment. The conventional APSA has two advantages; it operates robustly against impulsive noise and does not need calculation for the inverse matrix. The proposed algorithm also has the conventional algorithm's advantages and furthermore, better convergence speed than the conventional algorithm. In the conventional algorithm, each input signal is normalized by $l_2$-norm of all input signals, but the proposed algorithm uses input signals normalized by their corresponding $l_2$-norm. We carried out a performance comparison of the proposed algorithm with the conventional algorithm using a system identification model. It is shown that the proposed algorithm has the faster convergence speed than the conventional algorithm.
Alakline phosphatase activity (AP A) as a phosphorus deficiency measurement in flowing waters and of microhabitats (rocks, wood, leaves, and sediments) was measured and its relationship to flux of nutrients and response to rainfall events were determined for two geologically different streams in west Alabama from August to November. Results indicated water column AP A in both streams had a low correlation with levels of orthophosphate, total organic phosphorus, nitrate, ammonia, dissolved organic carbon, and discharge (r=0.075-0.583; n=g-IU. Communities on rock surfaces showed a higher AP A level than those on wood and leaves. Sediment passed through a $106{\mu}m$ sieve showed 2-9 times higher AP A level than material passed through $425{\mu}m$ sieve. The first storm after drought at Yellow Creek introduced substantial quantities of DOC (2.5 times baseflow concentrations) and $N0_3-N$ (5.8 times baseflow concentrations) which did not affect AP A significantly. The second storm at Little Schultz Creek caused minor changes in nutrient cocentrations; however $N0_3-N$ levels and AP A were drastically lower due to the dilution effect. Retention of stream water AP A at Yellow Creek and Little Schultz Creek on $0.45{\mu}m$ filter (54 and 43%, respectively) and $0.22{\mu}m$ (83 and 77% of total APA. respectively) indicated more free dissolved portion of the enzyme was present at Little Schultz Creek. Little Schultz Creek (with carbonate and with a higher productivity and biomass) showed a consistantly greater AP A activity $(132{\pm}54\;{\mu}M{\cdot}1^{-1}{\cdot}min^{-I};\;n=g)$ than Yellow Creek $(41{\pm}23\;{\mu}M{\cdot}1^{-I}{\cdot}min^{-I}$, with a sandstone substrate; n=l1, $p{\leq}O.OO1)$. Overall, a greater APA on all microhabitats and the presence of more dissolved enzyme in Little Schultz Creek during the study period may indicates it is more P deficient than Yellow Creek.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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