• 생명과학회지
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• 제17권7호통권87호
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• pp.948-955
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• 2007

생체 면역반응에 중요한 역할을 하는 호중구의 세포사멸은 자연적으로 일어나거나 여러 외부자극에 의한 신호의 전달에 의해 증가하거나 지연된다. 또한 사이토카인과 같은 분화제에 의해 세포사멸이 지연되고 항원 제시 기능을 가진 수지상 세포로 분화되기도 한다. 본 연구에서는 세포사멸 억제제와 사이토카인을 이용한 시스템에서 호중구가 수지상 세포로 분화되는가를 조사하였다. Pancaspase와 serine protease의 억제제인 zVAD-fmk와 AEBSF를 처리하였을 때 호중구의 세포사멸은 현저히 감소되며 AEBSF는 caspase-3와 serine protease활성을 모두 억제하였다. 호중구의 세포사멸을 효과적으로 억제하는 AEBSF와 함께 분화제로 널리 쓰이는 CM-CSF를 같이 처리하여 3일 동안 배양하면 수지상 세포에서 높이 발현되는 CD8O, CD83 및 MHC class ll의 세포표면 마커의 발현이 증가하였다. AEBSF와 CM-CSF를 처리한 호중구를 T-세포와 함께 배양하였을 때 SEB가 존재할 경우 T-세포가 증식되었으며 SEB가 없이도 $IFN{\gamma}$는 생성되었다. 이들 결과들로 부터 serine protease 억제제인 AEBSF를 호중구에 처리하여 세포사멸을 효과적으로 억제하는 것과 수지상 세포로의 분화를 촉진하는 사이토카인인 CM-CSF의작용을 나타내게 하는 조건과는 서로 상호적으로 연관되어 작용할 수 있다는 것을 제시하고 있다.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제21권1호
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• pp.20-27
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• 2011

The purification and characterization of a $Mn^{2+}$-dependent alkaline serine protease produced by Bacillus pumilus TMS55 were investigated. The enzyme was purified in three steps: concentrating the crude enzyme using ammonium sulfate precipitation, followed by gel filtration and cation-exchange chromatography. The purified protease had a molecular mass of approximately 35 kDa, was highly active over a broad pH range of 7.0 to 12.0, and remained stable over a pH range of 7.5 to 11.5. The optimum temperature for the enzyme activity was found to be $60^{\circ}C$. PMSF and AEBSF (1 mM) significantly inhibited the protease activity, indicating that the protease is a serine protease. $Mn^{2+}$ ions enhanced the activity and stability of the enzyme. In addition, the purified protease remained stable with oxidants ($H_2O_2$, 2%) and organic solvents (25%), such as benzene, hexane, and toluene. Therefore, these characteristics of the protease and its dehairing ability indicate its potential for a wide range of commercial applications.