In order to clarify one of the biological functions of pork, we investigated whether a peptic hydrolysate of denatured porcine crude myosin showed inhibitory activity against angiotensin I-converting enzyme (ACE), which contributed to hypertension. Our results indicated that this hydrolysate showed relatively strong activity, and we therefore attempted to separate the involved peptides, which were considered to be active substances. To isolate these active peptides, the hydrolysate was separated using a solidphase separation, gel filtration high-performance liquid chromatography (HPLC), and two kinds of reverse phase HPLC. In each stage of separation, many fractions were detected, almost all of which showed ACE inhibitory activity. Thus, we suggested that the activity of the hydrolysate as a whole was a result of the activities of the many individual peptides. Six peaks were distinguished, with yields from 34 to 596 ppm of original crude myosin. In addition to the six peaks, many other active fractions were found throughout the separation steps, strongly suggesting that whole porcine crude myosin itself had ACE inhibitory activity. Moreover, pork as food was considered to function as an ACE inhibitory material in vivo, because pork proteins consist primarily of crude myosin, which included almost all the myofibrillar structural proteins.
본 연구에서는 ACE 저해능 및 항산화능이 있는 식물성 젖산균을 다양한 식물체로부터 분리한 후, 그 특성을 조사하였다. 김치, 부추, 포도 및 동동주에서 K-1, K-21, L-5, G-3 및 D-3 균주가 분리되었으며, 16S rRNA gene 염기서열 분석을 통하여 이들은 각각 Pediococcus pentosaceus, Lactobacillus plantarum, Weissella cibaria, L. plantarum 및 L. brevis로 동정되었다. 분리균주들은 MRS broth에서 44.3-71.9%의 ACE 저해능을 나타내었으며, 특히 G-3, L-5, K-1 균주는 skim milk가 함유된 MRS broth에서 59.0-8-98.6%의 높은 ACE 저해능을 나타내었다. 분리 균주는 42.5-82.7%의 DPPH radical 소거능을 나타내었으며, G-3 및 K-1 균주는 pH 2.5의 인공위액에서 42.2-88.1%의 높은 생존율을 나타내었다. 분리균주는 0.3% oxgall에서 24시간 배양시 55.4-112.8%의 내성을 나타내었다. 또한 분리균주는 유기산 생성에 따른 pH 감소 효과로 인하여 Pseudomonas aeruginosa를 포함한 일부 병원성 세균의 생육을 억제할 수 있었다.
번데기 단백질의 최적 가수분해 조건을 선정하기 위해 4종의 가수분해 효소를 이용하여 번데기분말 첨가량별 및 가수분해시간에 따른 단백질 용해지수, 각각의 가수분해물의 ACE 저해활성 및 항산화활성 등을 조사하였다. 탈지번데기 분말의 최적 분산농도는 $5{\sim}10%$ 범위였으며 가수분해시간은 18시간이었고, ACE 저해활성은 neutrase, trypsin, pepsin 및 alcalase 효소처리 시 각각, 85.16, 83.46, 70.45 및 65.39%로 모든 효소 처리구가 비효소 처리구(24.94%)에 비해 높은 활성을 나타내었다. 가수분해물의 항산화활성($IC_{50}$)은 상업용 효소인 neutrase와 alcalase의 경우 각각 352.75 및 $396.09\;{\mu}g/mL$로 비효소처리구($327.24\;{\mu}g/mL$)와 유사한 값을 보였고, pepsin 및 trypsin은 각각 626.09 및 $677.44\;{\mu}g/mL$로 비효소처리구보다 낮게 나타났다.
유자씨 종피와 배유부분에 대한 n-hexane 및 ethanol 추출물에 대한 항산화활성, ACE 저해활성, $\alpha$-glucosidase 억제활성 및 항암활성을 살펴보았다. 항산화활성은 종피 nhexane 추출물(CSH1), 배유 n-hexane 추출물(CSH2), 종피 70% ethanol 추출물(CSE1) 및 배유 70% ethanol 추출물(CSE2) 가운데 CSE1이 가장 높은 활성을 나타내었으며, CSE1의 용매분획물 가운데 ethylacetate 층이 2 mg/mL의 농도에서 라디칼소거능이 73.81% 그리고 총항산화력이 56.64 mg AA eq/g으로 우수한 항산화활성을 나타내었다. 또한 ACE 저해활성과 $\alpha$-glucosidase 억제활성도 CSE1이 각각 31.63% 및 45.17%로 가장 높은 활성을 나타내었다. 각각의 추출물에 대한 유방암, 간암, 폐암, 대장암 및 전립선암 세포에 대한 증식억제효과는 모든 암세포에 대하여 5mg/mL의 농도에서 종피 ethanol 추출물(CSE1)이 가장 높은 암세포 증식억제효과를 보였다.
문어육의 Aroase AP10 가수분해물을 제조하고 이들 가수분해물을 한외여과막을 통과시켜 회수한 분자량 10,000 Da이하의 저분자물질을 Bio-gel P-2 gel chromatography를 행하여 ACE 저해효과를 가지는 3개 획분을 분취하였다. 또한 이들 획분을 SuperQ-Toyopearl 650S column을 이용한 이온교환크로마토그래피에 의해 4개의 활성획분을 분리하였다. 이중 ACE 저해효과가 가장 높은 C-1 획분의 아미노산 조성은 arginine, lysine, histidine 및 leucine의 함량이 가장 많아 전체의 약 60%를 차지하였으며 $IC_{50}$은 $3.10{\mu}g$으로 나타났다.
숙성기간(1, 3 및 3년)이 다른 멸치액젓으로부터 추출한 peptide는 정제과정에서 숙성 1년의 멸치액젓은 3개, 숙성 3년의 멸치액젓은 4개, 숙성 5년의 멸치액젓은 5개의 peak를 각각 나타내었다. 숙성기간이 길수록 멸치액젓의 Peptide는 저분자화 되었으며, gel chromatography상의 후반부에 나타났다. 숙성기간이 다른 멸치액젓으로부터 추출한 peptide들의 생리활성 (항산화, 항암, ACE 저해활성)은 숙성기간이 길수록 증가하였다. 특히 항산화 및 항암활성은 $IC_{50}$/이 각각 34 및 44 $\mu\textrm{g}$/mL인 3년 숙성 peak 3이 제일 높았으나, ACE 저해활성 은 $IC_{50}$/이 32 $\mu\textrm{g}$/mL인 1년 숙성 peak 3이 제일 높았다. 천연 숙성 멸치액젓의 저분자 peptide는 뛰어난 생리활성을 갖고 있음이 밝혀졌으나 구조분석 등의 추가 연구가 필요하다고 본다.
기호도가 높으면서 생리기능성이 우수한 배 음료를 개발하고자 배와 딸기를 혼합하여 시판 알콜 발효 효모인 Saccharomyces cerevisiae C-2로 발효시켰다. 이 발효액을 감압 농축하여 얻은 농축물로 음료를 제조한 후 $20^{\circ}C$와 $40^{\circ}C$에서 8주까지 저장하면서 품질과 생리 기능성변화를 조사하였다. 발효 농축물은 항고혈압활성인 엔지오텐신전환효소 (ACE) 저해 활성이 70.8%로 우수하였고 이를 이용하여 제조한 배 음료는 $20^{\circ}C$에서 8주까지 pH와 생균수 및 항고혈압성 ACE저해 활성 등이 큰 변화가 없이 안정하였다.
This study analyzed the chemical characteristics and physiological activity of five kinds of fresh vegetables produced in trees in early spring and tried to use them as basic data for wild vegetable producers and processed food manufacturers using wild vegetables. The crude protein, minerals, ascorbic acid, folate, total phenol, total flavonoid, DPPH (2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl) radical scavenging activity and ACE (angiotensin converting enzyme) inhibitory activity were determined. Five spring wild vegetables contain high protein and phosphorus, indicating that they are useful food ingredients as sources of protein and phosphorus. Vitamin C content was high in R. venicifera and C. sinensis shoots, and in particular, R. venicifera and A. cortex shoots have high folic acid (folate) contents of 1,903.91 ug% and 1,525.35 ug%, respectively, which is considered a good food for folic acid intake in spring. The total phenol content was between 0.52% and 1.27%, and it was the highest in C. sinensis of 1.27%, followed by the order of R. venicifera, A.cortex, K.pictus, and A. elata, which tended to be consistent with the total flavonoid content. As for DPPH radical scavenging ability, C. sinensis (55.93%) showed the highest activity, and ACE inhibitory activity showed the highest activity in A. cortex (88.04%).
Soybean quality is determined based on protein content, lipid content and fatty acid composition, and several functional components including isoflavones, anthocyanins and functional activity. Because the level of each component changes during seed development, it is necessary to know the concentration of quality-related components in developing seeds. Little is known of the pattern of changes in quality-related components. Seeds from field-grown soybean was harvest from the $R_6$ stage to the $R_8$ stage in 2004. Seed characteristics and the level of nutritional components were examined. Seed moisture content was dropped rapidly after the $R_7$ stage in the tested varieties. Seed growth rate was the highest from the beginning of the $R_6$ stage to the mid-$R_6$ stage. Chlorophyll content was decreased rapidly in pods and seeds. However, seed growth period from the $R_6\;to\;R_8$ was 35 days. The crude protein content was. increased dramatically between 63 DAF and 70 DAF and then increased slightly. The pattern of isoflavone accumulation was nearly similar to that of seed weight increase. From the late $R_6$ stage to the $R_7$, the accumulation rate was higher as compared to other stages. The angiotensin inhibitory activity was increased according to seed development from 63 ($R_6$) to 84 DAF ($R_8$). The difference of inhibitory activity in heated soybean powder, however, was not great among stages. The inhibitory activity was affected by heating treatment. The most effective heating time was 10 min. Excessive heating longer than 30 min resulted in a lowered inhibitory activity of soybean on ACE.
양파 조미액으로부터 ACE 저해활성 물질을 분리하기 위해 hexane, ethylether, ethylacetate, butanol과 물로 분획시, 4.8g의 당 함량과 31.9 mg의 phenol성 물질을 함유한 butanol 분획이 82.1%의 ACE 저해활성을 나타내었고, 70.3%의 ACE 저해활성을 보인 양퍄 조미액보다 높은 저해활성을 보였다. Butanol 분획을 Amberite XAD-2column으로 분리한 결과, ACE 저해활성을 보이는 미흡착 분획(F1)를 얻었다. 활성분획 F1을 Sephadex LH-20column으로 분획한 결과, 4개(F1-1,F1-2,F1-3,F1-4)의 분획을 얻었으며, 이중 F1-3 분획의 ACE 저해활성은 93%로 가장 높은 저해활성을 보였다. Sephadex LH-20 column chromatography에 의해 얻어진 활성분획F1-3을 Supercosil LC-18 column을 이용하여 분리한 결과, 6분대에서 ACE 저해활성을 가지는 단일 peak(F1-3a)를 얻었다. 각 정제 과정에서 얻은 분획들은 전형적인 flavonoid의 band I과 bandII의 피크를 보였다. 또한 ACE에 대한 저해기작은 flavonoid 물질이 보이는 전형적인 비경쟁적 저해양상을 보였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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