Vu, Van Hanh;Thi, Quyen Dinh;Rita, Grosch;Dung, Nguyen Ngoc
한국미생물·생명공학회지
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제41권1호
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pp.70-78
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2013
Rhizoctonia solani and Fusarium oxysporum cause yield losses in numerous economically important crops. To develop a bio-control agent, cell free extracellular compounds (ECs) of 5 bacterial strains Burkholdria sp. L1, Pseudomonas sp. L4, Pseudomonas chlororaphis VN391, Bacillus subtilis VN21 and Enterobacter sp. VN99 from Vietnamese fields, which reduced levels of R. solani root rot in lettuces and F. oxysporum root rot in tomatoes, were investigated. In a growth chamber, ECs of all antagonists markedly enhanced the biomass of lettuces (10 to 14.1%) and tomatoes (11.38 to 13.88%). In greenhouses, the disease's severity on both crops treated with ECs of the antagonists was reduced significantly and biomass losses in the plants decreased markedly. The reduction level of R. solani root rot in lettuces was 75, 66.7, 50, and 16.7% by ECs of strains L1, L4, VN21 and VN391, respectively. The biomass of lettuces increased markedly by 29.13%, 21.67%, and 23.4% by ECs of strains L1, L4 and VN21, respectively. Similarly, the reduction levels of F. oxysporum root rot in tomatoes was 76.3, 75, 41.7 and 25% by ECs of strain L1, L4, VN21 and VN391, respectively, and the biomass was significantly enhanced by 14.42, 12.7 and 13%, respectively. The ECs of strain L1 exhibited the most effective bio-control agents to suppress R. solani and F. oxysporum.
18 종의 N-치환 phenyl 1,3,5-trimethylpyrazole-4-carboxamide 를 합성하여 벼 잎집무늬 마름병균 Rhizoctonia solani $K{\ddot{u}}hn$ 에 대한 균사생육억제력 $(pEC_{50})$ 과 이 균에서 분리한 succinate dehydrogenase (SDH)의 효소활성 저해력 $(pI_{50})$ 을 측정하였다. 구조-활성 상관연구를 통해 균사생육억제력이 SDH 효소저해력과 소수성인자인 chromatographic capacity factor $(\acute{k})$ 에 의해 79%까지 유의성 있게 해석되었으며 이는 합성한 화합물의 주작용점이 SDH 이고 생체내에서 작용점까지 도달하는데 필요한 소수성성질이 살균력의 발현에 중요한 인자임을 보여준다.
Turfgrass Rhizoctonia blight is a severe disease in golf courses in Korea. Attempts were made in 1989 to 1994 to identify the Rhizoctonia species associated with turfgrass blights and also to examine their epidemiology. A total of 120 Rhizoctonia isolates collected were identified as R. solani AG1, R. solani AG2-2, R. cerealis(AG-D) and R. oryzas from brown patch, large patch, yellow patch and white patch, re-spectively. R. solani AG1 was mostly associated with brown patch of cool-season grasses. and most frequently isolated in June through July and also in September. R. solani AG2-2 was isolated exclusively from zoysiagrasses from April to November, most frequently in June through July and October through November. R. cerealis was isolated frequently from both creeping hentgrass in March through April and in November, and zoysiagrass in April and July. Thermophilic R. oryzae was isolated only from creeping bentgrass in August, although with very low frequency. R. solani AG2-2 was strongly pathogenic specifically to Korean lawngrasses(Zoysia japonica, Z.matrella, Z. tenuifolia), but non-pathogenic to creeping bentgrass(Agrostis palustris), bermudagrass (Cynodon dactylon), Kentucky bluegrass(Poa pratensis), perennial ryegrass(Lolium prenne), and creeping red fescue(Festuca rubra subsp. ruhra L.). R. cerealis was strongly pathogenic to zoysiagrass and bentgrass only, but was isolate-specific i.e., from non-pathogenic to pathogenic, for other turfgrasses. The mycelial growth was optimum at relatively high temperature ranges of 25~30$^{\circ}C$ for R.solani AG1, AG2-2 and R. oryzae, while the mycelial growth of R. cerealis was initiated at $^{\circ}C$ and almost ceased at or above $^{\circ}C$.
밀의 근권(根圈)에서 병원성(病原性) 사상균(絲狀菌)에 대해 길항성(拮抗性)이 높은 균주(菌株)를 분리(分離), 동정(同定)하여 연작장해(連作障害)의 피해경감과 생물방제(生物防除)의 기초자료(基礎資料)를 삼고자 그 균이 생성(生成)하는 siderophore에 의한 사상균(絲狀菌)의 생육(生育) 저해력(沮害力)을 조사한 결과(結果)를 요약(要約)하면 다음과 같다. 1. 밀의 근권(根圈)에서 형광성(螢光性) 세균(細菌)을 선별하여 R. solani, F. oxysperum, F. solani에 대한 생육저해(生育沮害)가 큰 (10mm이상) 균주(菌株)를 P. fluerescens Biovar I(Ps-1, Ps-2, Ps-5)과 Biovar II(Ps-3)로 동정(同定)되었다. 2. 선발균주(選拔菌株)가 생성(生成)하는 색소(色素)는 green-yellow 로 410nm에서 최대의 흡광도(吸光度)를 나타내었다. 3. Siderophore는 $Fe^{+3}$의 첨가시 생성량(生成量)은 현저히 감소하였으나 $Fe^{+2}$의 첨가시에는 생성량(生成量)의 감소는 보이지 않았다. 4. 선발균주(選拔菌株)중 Ps-5가 생성(生成)한 색소(色素)는 R. solani의 생육(生育)에 영향을 미치지 않았으며 $FeSO_4$의 처리시 생육(生育)이 증가되었다. 그러나 균주(菌株) Ps-1, Ps-2, Ps-3가 생성(生成)한 색소(色素)는 R. solani, F. oxysperum, F. solani에 대한 생육저해(生育沮害)는 컷으며 $Fe^{+2}$의 첨가시 저해력(沮害力)은 현저히 감소되었다. 5. 암소재배법(暗所栽培法)을 이용한 오이의 연작지토양(連作地土壤)에 오이를 파종하여 접종효과(接種效果)를 본 결과(結果) Ps-2>Ps-1>Ps-5>Ps-3의 순(順)으로 접종효과(接種效果)가 있었으며 Ps-1과 Ps-2는 captan 50ppm의 처리구 보다도 효과(效果)가 더 좋았다.
More than 30 isolates of Alternaria were obtained from various solanaceous crops in Korea. For all isolates, morphological characteristics of the conidia were determined and compared with those of representative isolates of A. solani and A. tomatophila. Pathogenicity test was performed to Potato, tomato, egg plant and red Pepper and molecular characteristics of them including the representative isolates were determined using sequence analyses of ITS rDNA and histone H3 gene, and URP-PCR analysis. Based on morphological characteristics, the isolates from the solanaceous crops were grouped as identical or very similar to either A. tomatophila(ATO), A. solani(ASO), and unidentified Altemaria sp.(ASP). Among the molecular markers used in this study, the URP-PCR analysis was found to be appropriate for taxonomic resolution of these species. Based on the conidial morphology, pathogenicity test and molecular characteristics, A. tomatophila(early blight of tomato) could be distinguished from A. solani(early blight of potato), and the Alternaria sp.(ASP) from potato, which was closely related to A. solani in conidial morphology, was considered as a new species.
결구상추 밑둥썩음병의 병원균 Rhizoctonia solani에 대한 길항세균을 분리하기 위하여 결구상추 재배 포장에서 결구상추의 밑둥부위, 뿌리조직 그리고 근권토양에서 세균 702균주를 분리하였다. 분리균주 중에서 대치배양에 의해 길항능을 나타낸 7균주를 선발하였으며, 그 중 포트검정 실험에서 유묘와 성체식물에서 발병억제효과가 우수한 BW-13균주를 길항균으로 최종선발하였다. 최종 선발된 BW-13균주의 동정을 위하여 생리$\cdot$생화학적 특성, API test 및 16S rDNA sequence를 분석한 결과 Stenotrophomonas maltophilia로 동정되었으며, 본 균주를 S. maltophilia BW-13으로 명명하였다. 본 연구의 결과는 S. maltophilia BW-13이 결구상추 밑둥썩음병의 생물적 방제원으로 이용될 수 있음을 보여준다.
An antifungal Pseudomonas stutzeri YPL-1 produced extracellular chitinase and .betha.-1, 3-glucanase that were key enzymes in the decomposition of fungal hyphal walls. These lytic extracellular enzymes markedly inhibited mycelial growth of the phytopathogenic fungus Fusarium solani. A chitinase from P. stutzeri YPL-1 inhibited fungal mycelial growth by 87%, whereas a .betha.-1, 3-glucanase from the bacterium inhibited growth by 53%. Furthermore, co-operative action of the enzymes synergistically inhibited 95% of the fungal growth. The lytic enzymes caused absnormal swelling and retreating on the fungal hyphal walls in a dual cultures. Scanning electron microscopy clearly showed hyphal degradation of F. solani in the regions interacting with P. stutzeri YPL-1. In an in vivo pot test, P. stutzeri YPL-1 proved to have biocontrol ability as a powerful agent in controlling plant disease. Planting of kidney bean (Phaseolus vulgaris L.) seedlings with the bacterial suspension in F. solani-infested soil significantly suppressed the development of fusarial root-rot. The characteristics of a crude preparation of .betha.-1, 3-glucanase produced from P. stutzeri YPL-1 were investigated. The bacterium detected after 2 hr of incubation. The enzyme had optimum temperature and pH of 40.deg.C and pH 5.5, respectively. The enzyme was stable in the pH range of 4.5 to 7.0 and at temperatures below 40.deg.C, with a half-life of 40 min at 60.deg.C.
1982년부터 1885년 동안, 인삼뿌리썩음병 및 근권 토양에서 분리한 Fusarium균(115균주)을 Snyder-Hansen 방식(주로 F. solani 및 F. oxysporum의 동정에 적용) 및 Gerlach-Nirenberg 방식(주로 F. moniliforme[Liseola section]의 균주 동정 및 F. roseum[Snyder-Hansen 분류개념에 의한]에 속하는 균주 동정에 적용), 그리고 Cylindrocarpon균은 Booth 방식으로 분류 동정한 결과, 11개의 종으로 나눌 수 있었다. 가장 많이 분리된 균은 Fusarium solani(55균주), F. oxysporum(35균주), 그리고 F. moniliforme(10균주) 등이었다. Snyder와 Hansen(1945) 분류방식에 의해 F. roseum으로 불리우는 나머지 균주들(15균주)은 매우 드물게 분리되었으며, 8개의 종으로 다시 분류할 수 있었다. 이들은 F. equiseti, F. avenaceum, F. graminum, F. arthrosporioides, F. sambucinum, F. reticulatum, F. semitectum and F. poa 등이었다. 1985년 6월 이들 Fusarium 균주들과 Cylindrocarpon destructans 균주들 및 주요 인삼의 토양전염성 병원균 균주들을 증평인삼시험장 3년생 격리포장에서 균총 절편으로 뿌리 상부에 접종시켜 그 병원성을 검정한 결과, Phytophthora cactorum과 Pythium ultimum은 접종 12일 만에 지상부 위조 및 뿌리의 물렁썩음을 일으키는 높은 병원성을 나타내었다. 접종 후 77일경에 뿌리를 채굴하여 뿌리의 마른 썩음을 조사한 결과, Fusarium solani 균은 34 균주 중 1개 균주만이 병원성을 보였으나, Cylindrocarpon destructans는 12개 접종 균주 모두 인삼의 뿌리썩음에 높은 병원성을 나타내었다 . Fusarium solani 및 Cylindrocarpon destructans는 전형적인 기주-위주의 인삼 토양병원균으로 추정할 수 있었다.
남부지방의 고추, 오이, 대추, 딸기, 수도 등에 발생한 모잘록병 이병주에서 분리한 9가지 Rhizoctonia solani 균주의 고추, 오이, 무, 대추에 대한 병원성을 조사한 결과를 요약하면 다음과 같다. AGI 균주는 공시한 모든 기주에 대해 강한 병원성이 있었고, AG2군 1형 균주는 무와 배추에 대해서는 강한 병원성을, 고추에 대해서는 묘령이 증가함에 다라 발병이 적어 중정도의 병원성이 있었으나, 오이에 대해서는 병원성이 매우 약한 경향이었다. AG2군 2형 균주는 고추를 제외한 나머지 작물에는 병원성이 없거나 약하였고, AG5 균주는 공시한 모든 기주에 대해 중정도의 병원성이 있었다. 각 균주의 병원성 정도는 균계융합군(AG)간에는 차이가 있었으나, 같은 균사융합군(AG)내에서는 큰 차이가 없었다. 즉, AG1은 공시한 모든 기주에 강한 병원성을 보였으며, AG2군 1형 균주는 오이에 대해서만 약한 정도의 병원성을, 다른 기주에 대해서는 강한 병원성을 나타내었다. 각 기주의 묘령별 발병율은 살균토나 비살균토에서 묘령이 많을수록 감소하는 경향을 보였으나, 오이 뿌리와 수도줄기에서 분리한 병원성이 강한 균주에 대해서 각 기주는 묘령에 따른 발병율의 차이가 없었다. 살균토와 비살균토에서 병원성을 비교하면 병원균이 분리된 기주 및 근록의 작물에 대해서는 비살균토보다 살균토에서 더 강한 병원성을 보였으나, 병원균이 분리된 작물과 원록의 작물에 대해서는 살균토보다 비살균토에서 더 강한 병원성을 보였는데, 전반적으로는 다른 토양전염성병과는 달리 살균토보다 비살균토에서 병원성이 더 강하였다.
재배지에서 경작된 아스파라거스의 이병조직으로 부터 Fusarium oxysporum이 가장 많이 분리되었고 F. moniliforme와 F. solani가 그다음 순으로 분리되었다. 유묘와 조직배양을 통해 얻은 개체를 이용한 병원성 검정 결과, F. oxysporum과 F. moniliforme는 병원성이 강한 것으로 밝혀졌고, F. solani와 잠두의 배축으로 부터 분리한 비 병원성 F. oxysporum (AVFO)은 병원성이 약하거나 없는 것으로 밝혀졌다. 또한, F. moniliforme가 F. oxysporum 보다 병원성이 더 강한 것으로 밝혀졌고, F. moniliforme가 F. oxysporum보다 더욱 일관된 병원성을 지니고 있음이 밝혀졌다. 비병원성 Fusarium균을 이용한 생물적 방제 실험 결과, 병원성 균주를 접종하기 5-7일전에 비병원성 균주들을 접종하여 방제효과를 거둘 수 있었다. 비병원성 F. oxysporum (AVFO)은 F. oxysporum에 대해서 보다 F. moniliforme에 대해 더욱 효과적인 방제효과를 나타냈고, F. solani는 F. moniliforme에 대해서 보다 F. oxysporum의 방제에 더욱 효과적이었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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