발효식품이 유해곰팡이에 의한 발암물질(aflatoxin)생성에 미치는 억제 효과에 관한 연구의 일환으로 유산균 및 유산균 발효유가 Asperillus Parasiticus ATCC 15517의 성장과 aflatoxin 생성에 미치는 영향을 실험하였다. 발효유를 일정 농도별로 첨가한 YES 배지에서 Asperillus Parasiticus를 배양말기에 대조군에 비하여 건조 균체량, 배양물의 pH, 그리고 alftoxin 생성량 등이 낮게 나타났다(p<0.05). Aflatoxin B1은 48.6~58.1% 각 감소되었으며 G1은 29.8~34.2%가 감소되었다. 이 발효유의 발효에 사용된 유산간균(lactobacillus casei)과 Asperillus Parasiticus를 변형 APT 배지에 혼합 배양한 결과 Asperillus Parasiticus 단독 배양의 경우에 비하여 균체량이 배양 5일째까지는 현저하게 억제되었으나 배양 말기에는 유의한 차이를 보이지 않았다. 또한 배양 말기에 단독 배양의 경우보다 pH가 훨씬 감소되고 (p<0.05) aflatoxin의 생성량도 감소되었다. 이로부터 발효유는 유해곰팡이인 Asperillus Parasiticus의 성장과 aflatoxin 생성을 억제시키는 효과를 가짐을 알 수 있으며, 이는 발효에 관여한 미생물의 경쟁뿐만 뿐만아니라 유산균의 대사산물에 의한 영향으로 보여진다.
In this study, th effective extraction of 5 vegetables, which have been shown to inhibit the growth of the aflatoxin production of Aspergillus parasiticus R-716, was investigated and their effects were examined. Radish, cabbage, garlic and zinger were effectively with water-chloroform, but crown daisy with n-hexane. Among them, water-chloroform extract of radish was remarkably effective, and garlic extract only inhibited the growth strongly. The growth and the aflatoxin production of the strain were showed 0.758g/25ml, 763ug/25ml with the addition of water-chloroform extract equivalent 15g of raw radish, and an increase in the level of radish extract resulted in a decrease both the growth and the aflatoxin production per mycerial weight.
Author investigated fluorence antibody reaction for the antigenic relationships between Asp niger group, Asp flavus and Asp parasiticus which was indicated as follows: 1. It was concluded that there are complete differences in the antigenic properties each other because it has not cross reaction, therefore identification of strains will be simpley classified. 2. A complete cross reaction between Asp flavus and Asp parasitic us in the Asp flavus groups existed, accordingly this reaction could not identified the strain and classified between Asp. flavus and Asp. parasiticus. 3. This experiment also followed with the separated each strains from the origin (Meju, Nuruk, ATCC, NRRL), but there no differences. From the above results, this method could be classified between Asp flavus group and Asp niger group in the genus Aspergillus, but classification of Asp. flavus and Asp. parasiticus should hardely conclude with this method.
This study was designed to synthesize triglycerol monolaurate (TGML) with Lipozyme 435 as the catalyst, and explore its effects on the growth of Aspergillus parasiticus (A. parasiticus) and Aspergillus flavus (A. flavus) and the secretion of aflatoxin b1. The highest content of TGML (49.76%) was obtained at a molar ratio of triglycerol to lauric acid of 1.08, a reaction temperature of 84.93℃, a reaction time of 6 h and an enzyme dosage of 1.32%. After purification by molecular distillation combined with the washes with ethyl acetate and water, the purity of TGML reached 98.3%. Through characterization by electrospray-ionization mass spectrometry, infrared spectrum and nuclear magnetic resonance, the structure of TGML was identified as a linear triglycerol combined with lauroyl at the end. Finally, the inhibitory effects of TGML on the growths of A. parasiticus and A. flavus and the secretion of aflatoxin b1 were evaluated by measuring the colony diameter, the inhibition rate of mycelial growth and the content of mycotoxin in the media. The results indicated that TGML had a stronger inhibitory effects on colony growth and mycelial development of both toxic molds compared to sodium benzoate and potassium sorbate, and the secretions of toxins from A. parasiticus and A. flavus were completely suppressed when adding TGML at 10 and 5 mM, respectively. Based on the above results, TGML may be used as a substitute for traditional antifungal agents in the food industry.
15종의 채소를 Chloroform으로 추출물을 조제하여 공시균(Aspergillus parasiticus R-716)의 생육 및 aflatoxin 생성에 미치는 영향을 조사하였다. 그 결과 마늘, 생강, 무우 및 양배추의 순으로 공시균의생육을 저해하였으나, 가지, 상치 등은 오히려 생육을 촉진하였다. 또한 균체생성시 공시균의 aftlatoxin기 생성은 무우, 생강, 쑥갓, 양배추의 순으로 저해하였으나, 우엉, 고추는 오히려 증가시켰다. 특히 무우는 균체 g당 aflatoxin 함량을 감소시켜 가장 효과적인 채소로 나타났으며, 고체배지에서도 무우 30g에 해당되는 추출물의 첨가로 약 $80\%$의 aflatoxin생성이 저해되어 쌀, 보리배지에서 각각 484 및 $191{\mu}g$의 aflatoxin만이 생성되었다.
본 연구에서 8종의 생약 추출물이 A. parasiticus의 배양시 aflatoxin $B_1$ 생성에 미치는 효과를 조사하였다. 배지의 pH는 배양 3일 후에 모든 생약 추출물이 pH 4 이하를 나타냈으며 구기자, 오매, 계피, 두충은 배양 6일에 다시 pH 4 이상으로 상승하였고 이중 대추가 배양 기간 중 가장 낮은 pH를 나타냈다. 균체 생성량은 모든 실험군이 대조군보다 높았으며 갈근, 두충, 오미자, 대추, 오매,구기자, 목과의 순으로 나타났다. 이중 갈근이 최대 생성량을 나타냈으며 목과가 가장 낮은 생성량을 나타냈다. Aflatoxin $B_1$은 갈근과 대추 추출물을 제외한 모든 실험군에서 생성이 억제되었다. 특히 계피, 오매, 두충 구기자, 오미자 추출물 에서 aflatoxin $B_1$ 생성이 현저히 저하되었으며 계피가 가장 큰 억제 효과를 나타냈다. 균체량이 많이 생성되면 aflatoxin $B_1$ 생성이 적어지고 균체량이 적게 생성되면 aflatoxin $B_1$의 생성이 많아졌다. Aspergillus parasiticus에 의해 aflatoxin $B_1$을 가장 적게 생성하는 계피와 가장 많이 생성하는 갈근 추출물의 총단백질 생성량은 계피는 3일째 (34.5%), 갈근 ext ract는 4일째 (36.4%) 총단백질의 함량이 최대가 되어 균체 내의 총단백질의 함량은 계피와 갈근 추출물을 첨가한 시험군이 게조군의 총단백질 함량 (32.7%)보다 약간 많았으며 aflatoxin $B_1$ 생성 및 축적이 최대가 되는 시기는 총단백질량이 최대가 되는 시기보다 대체로 1일 정도 늦게 나타났다.
Of the Asp. spp. isolated by the Institute of Applied Microbiology, Kon-Kuk University, 7 strains were selected for the study of the immunological differencences among them using gel precipitation test. The strains were the following types : 1 type of flavus and 2 types of oryzae were isolated from Meju ; 1 type of flavus from Nuruk ; and each one type of flavus, parasiticus and oryzae from Kokja.Asp.flavus from ATCC, Asp. parasiticus nad Asp. niger NRRL strains were also used in the study as a standard. From this study, several points can be raised ; 1) There was no common antigenic property between Asp. niger and Asp. flavus, because of no formation of reaction line. Therefore, all strains could be easily distinguished. 2) There was common antigenic property, that is, the formation of reaction line between Asp. flavus and Asp. parasticus. Accordingly two strains could not be easily distinguished by the gel precipitation test. 3) Each type of oryzae, parasiticus and flavus of Asp. flavus group had common antigen one another as well as specific antigens only in the difference of the reaction lines, so they could be easily identified in the gel precipitation test. 4) Each isolated strain from Meju and Nuruk appeared to be identical. 5) It was shown that the gel precipitation test of serological methods was very useful for the classification of Asp. spp.
본 연구는 한국 전통 된장과 간장 및 메주등에서 주된 상재균으로 나타나는 B. subtilli가 Aspergillus parasicus의 성장과 발암물질(Aflatoxin) 생성에 미치는 영향을 관찰하기 위하여 수행되었다 변형 APT 배지를 사용하여 $30^{\circ}C$에서 12일 동안 B. subtilis KCCM 11316과 Aspergillu parasiticus ATCC 15517를 단독 배양(대조군) 및 혼합 배양하고 그 성장과 배양물의 변화를 경시적으로 관찰하였으며 HPLC에 의하여 aflatoxin을 분석하였다. 혼합 배양시에는 곰팡이의 건조 균체량이 배양 직후로부터 배양 말기에 이르기까지 현저하게 억제되었으며, 배양 말기에 단독 배양시보다 85.3% 감소되었다(p<0.01). Aflatoxin의 생성량도 배양 말기에 대조군에 비하여 50%이상 감소되었다(p<0.05). 이로부터 Bacillus subtilis는 메주 및 간장과 된장에 있어서 유해 곰팡이의 생육과 aflatoxin 생성을 주도적으로 억제하는 것을 알 수 있다. Aflatoxin 생성에 대한 억제 효과는 곰팡이의 성장에 대한 억제 효과보다 낮게 나타났으나 메주 중에는 다른 발효 관련 세균들이 함께 존재하는 바, 이들에 의한 억제적 영향도 기대된다.
한의원에서 오래 전부터 사용되어 오고 있는 몇 종의 한약재를 구입하여 이들을 chloroform으로 추출하여 추출물을 조제한 다음 공시균(Aspergillus parasiticus R-716)의 생육과 aflatoxin 생성에 미치는 영향을 조사한 결과 다음과 같은 결론을 얻었다. 1. 목단 추출물 첨가군에서 가장 현저하게 공시균의 생육이 저해되었고 그 외의 첨가 군에서도 강황, 봉출, 향부자, 백작양, 백출의 순으로 저해되었다. 2. Aflatoxin 생성은 백출과 강황 추출물 첨가군에서만 저해되었고, 나머지 첨가군에서는 오히려 증가되거나 효과가 적었다. 3. 백출 추출물 0.2$m\ell$ 첨가 시 3일째부터 균체 생성을 시작하여 9일째에 0.953/30ml이었고 aflatoxin 함량은 792${\mu}\ell$으로서 대조군에 비해 약 50%가 감소되었다. 균체 g당 aflatoxin 함량은 992${\mu}\ell$으로서 대조군의 1,467${\mu}\ell$에 비해 역시 크게 감소되었으며 NADPH oxidase 활성은 대조군 보다 높아 백출추출물이 공시균의 생성과 aflatoxin 생성에 저해 효과가 있는 것으로 나타났다.
A female Holstein calf with five legs and two tails was examined macroscopically and radiographically. The external feature included two normal forelimbs, two normal hindlimbs, a normal tail and each of underdeveloped extra hindlimb and tail, which was attached to the pelvic region. The extra hindlimb consisted of an underdeveloped femur, crural meromelia, duplicated calcaneous, partially duplicated metatarsal bone, three rows of digits with hoofs. This extra hindlimb was connected to an extra os coxa. The cervical and thoracic vertebrae were fused partially. The lumbar, sacral and coccygeal vertebrae were duplicated. This calf is a dipygus associated with pygopagus parasiticus.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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