Park, Jong Hwa;Lee, Jae-Kwan;Um, Heung-Sik;Chang, Beom-Seok;Lee, Si-Young
Journal of Periodontal and Implant Science
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제44권2호
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pp.79-84
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2014
Purpose: While single-species biofilms have been studied extensively, we know notably little regarding multispecies biofilms and their interactions. The purpose of this study was to develop and evaluate an in vitro multispecies dental biofilm model that aimed to mimic the environment of chronic periodontitis. Methods: Streptococcus gordonii KN1, Fusobacterium nucleatum ATCC23726, Aggregatibacter actinomycetemcomitans ATCC33384, and Porphyromonas gingivalis ATCC33277 were used for this experiment. The biofilms were grown on 12-well plates with a round glass slip (12 mm in diameter) with a supply of fresh medium. Four different single-species biofilms and multispecies biofilms with the four bacterial strains listed above were prepared. The biofilms were examined with a confocal laser scanning microscope (CLSM) and scanning electron microscopy (SEM). The minimum inhibitory concentrations (MIC) for four different planktonic single-species and multispecies bacteria were determined. The MICs of doxycycline and chlorhexidine for four different single-species biofilms and a multispecies biofilm were also determined. Results: The CLSM and SEM examination revealed that the growth pattern of the multispecies biofilm was similar to those of single-species biofilms. However, the multispecies biofilm became thicker than the single-species biofilms, and networks between bacteria were formed. The MICs of doxycycline and chlorhexidine were higher in the biofilm state than in the planktonic bacteria. The MIC of doxycycline for the multispecies biofilm was higher than were those for the single-species biofilms of P. gingivalis, F. nucleatum, or A. actinomycetemcomitans. The MIC of chlorhexidine for the multispecies biofilm was higher than were those for the single-species biofilms of P. gingivalis or F. nucleatum. Conclusions: To mimic the natural dental biofilm, a multispecies biofilm composed of four bacterial species was grown. The 24-hour multispecies biofilm may be useful as a laboratory dental biofilm model system.
1. 연구배경 교원질 분해작용을 하는 호중구의 세포질 효소인 기질금속단백분해효소-8은 치주질환, 류마티스 관절염, 그리고 궤양결장염과 같은 염증성 질환에서 농도가 증가한다고 알려져 있다. 최근에는 A. actinomycetemcomitans의 leukotoxin이 사람호중구에서 기질금속단백분해효소-8의 분비를 유도하는 것이 보고되었다. 이 연구의 목적은 선천면역 체계에서 세포표면 항원무리14, Toll-like 수용기, 그리고 $NF-{\kappa}$ B경로를 통하여 A. actinomycetemcomitans의 지질다당질로 유도된 기질금속단백분해효소-8의 분비 여부와 세포기전을 알아보고자 하였다. 2. 연구재료 및 방법 건강한 개인 제공자(남자 13명, 여자 3명)로부터 얻은 개개인의 20ml 말초혈액을 제조사의 지침에 따라 호중구를 추출한 후 항세포표면 항원무리14와 함께 $4^{\circ}C$에서 30분간 전배양 한 후, $37^{\circ}C$에서 9시간 동안 배양시켰다. 추출한 호중구에 Toll-like 수용기 억제제 또는 $NF-{\kappa}$ B억제제인 TPCK를 첨가한 후 $37^{\circ}C$에서 1시간 동안 전배양하고 $37^{\circ}C$에서 9시간 동안 배양시켰다. 호중구에 세포뼈대 억제제인 cholchicine, nocodazole, demecolcine, 그리고 cytochalasin B를 A. actinomycetemcomitans의 지질다당질과 함께 $37^{\circ}C$에서 9시간 동안 배양시켰다. 기질금속단백분해효소-8 분비량은 효소면역측정법을 통해 결정하였다. 통계처리는 일원배치 분산분석법을 이용하였다(p<0.05). 3. 결과 A. actinomycetemcomitans 지질다당질은 기질금속단백분해효소-8의 분비를 증가시켰다. 기질금속단백분해효소-8의 분비는 항세포표면 항원무리14에 의해서 억제되었지만, 항 Toll-like 수용기2, 항 Toll-like 수용기4 항체는 억제시키지 못했다. $NF-{\kappa}$ B 억제제는 A. actinomycetemcomitans의 지질다당질로 유도된 $NF-{\kappa}$ B 결합 활성도와 기질금속단백분해효소-8 분비를 억제하였다. 미세섬유 중합반응 억제제는 A. actinomycetemcomitans의 지질다당질로 유도된 기질금속단백분해효소-8의 분비를 억제시켰으나, 미세관 중합반응억제제는 억제시키지 못했다. 4. 결론 위의 연구결과를 종합하여 볼 때, 기질금속단백분해효소-8은 A. actinomycetemcomitans의 지질다당질로 유도되며, 세포표면 항원무리-$NF-{\kappa}$ B 경로를 통하여 분비되고, 이 분비 과정은 미세섬유 계통이 관여하는 것으로 보인다.
Purpose: Although several reports have described the relationship between periodontal disease and cardiovascular disease, information about the association between periodontal disease and the progression of degenerative aortic stenosis (AS) is lacking. Therefore, we performed a retrospective, single-center, pilot study to provide insight into this potential association. Methods: Data from 45 consecutive patients (19 men; median age, 83 years) with mild or moderate degenerative aortic stenosis were analyzed for a mean observation period of 3.3±1.9 years. The total amount of Aggregatibacter actinomycetemcomitans and Porphyromonas gingivalis and titers of serum immunoglobulin G (IgG) against periodontal bacteria and high-sensitivity C-reactive protein (hs-CRP) were evaluated. Aortic valve area (AVA), maximal velocity (Vmax), mean pressure gradient (mean PG), and the Doppler velocity index (DVI) were evaluated. The change in each parameter per year ([ParameterLATEST-ParameterBASELINE]/Follow-up Years) was calculated from the retrospective follow-up echocardiographic data (baseline vs. the most recently collected data [latest]). Results: No correlation was found between the concentration of periodontopathic bacteria in the saliva and AS status/progression. The anti-P. gingivalis antibody titer in the serum showed a significant positive correlation with AVA and DVI. Additionally, there was a negative correlation between the anti-P. gingivalis IgG antibody titer and mean PG. The hs-CRP concentration showed positive correlations with Vmax and mean PG. Meanwhile, a negative correlation was observed between the anti-P. gingivalis IgG antibody titer and ΔAVA/year and Δmean PG/year. The hs-CRP concentration showed positive correlations with Vmax and mean PG, and it was significantly higher in patients with rapid aortic stenosis progression (ΔAVA/year <-0.1) than in their counterparts. Conclusions: Our results suggest that periodontopathic bacteria such as A. actinomycetemcomitans and P. gingivalis are not directly related to the status/progression of degenerative AS. However, inflammation and a lower immune response may be associated with disease progression.
Objectives; Bioassay-directed fractionation of the dried roots of Salvia miltiorrhiza led to the isolation of abietane tanshinones, crptotanshinone and dihydrotanshinone. Methods: Their structures were elucidated using 1H-and 13C-NMR, UV, IR and mass spectral analysis. Result and Conclusions : These compounds exhibited a moderate antimicrobial activities against Staphylococcus epidemidis, Staphylococcus aureus, Staphylococcus pyogene. Actinobacillus actinomycetemcomitans, Escherichia coil, Enterbacter cloacae, Pseudomonas aeruginosa, Citrobacter freundii, and Samonella typhimurium.
소아에서 치주 병원균의 조기 집락은 향후 치주 질환으로 발전될 위험 인자로 작용할 수 있으므로 원인균의 조기 진단과 예방이 최선의 치료라 할 수 있다. 이 연구는 치주적으로 건강한 어린이와 청소년에서 타액과 치태를 채취하고, PCR을 사용하여 주요 치주 질환 원인균 5종의 분포 정도를 조사하였으며, 나아가 타액과 치태의 검출 차이를 비교 분석하였다. A. actinomycetemcomitans와 P. intermedia는 고등학생(만17세)에서, T. forsythia와 F. nucleatum는 초등학생(만8세)에서 가장 많이 검출되었다. 반면, P. gingivalis는 모든 대상에서 발견되지 않았다. 그리고 치은연상치태보다 타액에서 유의하게 검출이 더 잘 된 것으로 나타났다. 치주 병원균이 상대적으로 더 많이 검출된 청소년기에서는 치주 질환 예방을 위한 구강위생교육이 더욱 강화될 필요가 있으며, 치주 질환의 조기진단 및 관련 연구에 있어서 타액은 보다 유용한 도구가 될 것이라 사료된다.
Objectives: This study was conducted to examine the subjects' oral health status and changes in the oral environment after mouthwash with effervescent Vitamin C and its intake and to understand the impact on changes in the number of bacteria causing periodontal diseases in the oral cavity based on the oral health status and oral environmental condition. Methods: After obtaining approval from the Institutional Review Board of D-University, 45 people (24 in an experimental group and 21 in a control group) who participated in the oral health program were selected, among visitors of the Clinical Dental Hygienics Laboratory of D. University in B. Results: Based on the subjects' periodontal health status, the number of bacteria causing periodontal diseases in the oral cavity decreased in both experimental and control groups before and after the experiment. However, in the experimental group, it was significant when the Bleeding on Probing(BOP) level was below average, and Calculus index(CAL) was above average, in Aggregatibacter actinomycetemcomitans and the red complex. It was also significant when CAL was above average in the orange complex in the control group. Regarding bacterial changes in periodontal diseases based on the subjects' oral environmental condition, there was a significant change in the Adenosine Tri Phosphate (ATP : intraoral contaminants test) test in the oral cavity in A. actinomycetemcomitans and the red complex in the experimental group and in the O'Leary index in the control group. Further, there was a significant change in the orange complex in the ATP test in the experimental group. Conclusions: A comprehensive analysis of the results revealed that the oral health care program for dental hygiene decreased the number of bacteria causing periodontal diseases in the oral cavity in both experimental and control groups.
The purpose of this study was two-fold. First was to evaluate whether the molecular sieving model was appropriate for ionic dissociation experiment. Second was to compare the dissociation of calcium and hydroxyl ions from five types of calcium hydroxide pastes (Pure calcium hydroxide paste, DT temporary $dressing^{\circledR},{\;}Metapaste^{\circledR},{\;}Chidopex^{\circledR},{\;}Metapex^{\circledR}$) in three vehicles (aqueous, viscous and oily) and the antibacterial effect. Each calcium hydroxide pastes was placed into 0.65ml tube with cap and then 15% polyacrylamide gel was placed onto calcium hydroxide pastes. After the gel was hardened, the tubes were filled with tridistilled water (pH 7.14) and closed with cap. The tubes were stored in $37^{\circ}C$ 100% incubator The pH reading and the concentration of calcium ions were taken at 1, 4, 7. 10, and 14 days. The brain heart infusion agar plates with S. mutans and A. actinomycetemcomitans were used far antibacterial activity test. Middle of agar plate was filled with the calcium hydroxide pastes. The plates were incubated at $37^{\circ}C$ and observations were made to detect the zones of inhibition. These data were evaluated statistically by use of the analysis of variance and duncan test. The results were as follows. 1. In fresh mixing state, the pH of five types of calcium hydroxide pastes were measured between 12.5 and 12.8. 2. The pH was increased in all five types of calcium hydroxide pastes compared with control group. In 14 days, Pure calcium hydroxide paste (11.45) and DT temporary $dressing^{\circledR}$ (11.33) showed highest pH, followed by $Metapaste^{\circledR}$ (9.49), $Chidopex^{\circledR}$ (8.37) and $Metapex^{\circledR}$ (7.59) 3. Calcium was higher in all five types of calcium hydroxide pastes compared with control group. In 14 days, Pure calcium hydroxide paste (137.29 mg%) and DT temporary $dressing^{\circledR}$ (124.6 mg%) showed highest value, followed by $Metapaste^{\circledR}$ (116.74 mg%), $Chidopex^{\circledR}$ (111.84 mg%) and $Metapex^{\circledR}$ (60.22 mg%). 4. The zones of bacterial inhibition were seen around all five types of calcium hydroxide pastes. $Chidopex^{\circledR}{\;}and{\;}Metapex^{\circledR}$ groups which include iodoform were observed significantly larger zone of inhibition in A. actinomycetemcomitans compared with the other calcium hydroxide groups (p<0.05) However, $Metapex^{\circledR}$ showed the least antibacterial effect on S. mutans compared with other groups (p<0.05). The molecular sieving model was found to be acceptable in dissociation experiment of hydroxyl and calcium ions when compared with the previous tooth model study. But this model was not appropriate for the antibacterial test.
The treatment and prevention of periodontitis is focused on the reduction and the elimination of pathogenic bacteria, especially A. actinomycetemcomitans and black pigmented bacteria such as P. gingivalis. To prevent recurrent disease, the recolonization of these bacteria should be inhibited in the periodontal pocket. Since the replacement therapy was introduced in periodontics by Hillman et al, Jeong et al reported that hydrogen peroxide-producing Lactobacillus acidophilus V-20 completely inhibited P. gingivalis and A. actino - mycetemcomitans in vitro and mouth gargling with Lactobacillus acidophilus V-20 in periodontitis patients during the maintenance phase improved clinical condition and reduced the No. of P. gingivalis and A. actinomycetemcomitans at 4 weeks of treatment. Prior to replacement therapy with bacteria, dynamics of microbial colonization should be considered. This study was performed to evaluate the change in the viable cell number of Lactobacilli and P. gingivalis after oral administration of L. acidophilus V-20. In periodontal health, gargling increased the No. of Lactobacilli in saliva, buccal mucosa, supragingival plaque from the first week, which maintained for 2-3 weeks after gargling stop, and then returned to the undetectable baseline level at the ninth week. In the periodontal pocket of moderate periodontitis patients, daily irrigation for 1 week and weekly irrigation for subsequent 3 weeks decreased the viable cell number of P. gingivalis during the period of irrigation and increased the number of Lactobacilli, which was maintained from the second to the seventh week. L. acidophilus V-20 was isolated for the first 2 weeks of oral administration, and the 3 different strains of Lactobacilli were isolated continuously for remaining period and identified as L. ali - mentarius, L. casei subspecies casei and L. fructosus. The first two Lactobacilli strains completely inhibited P. gingivalis in vitro and all the isolated Lactobacilli strains reduced the artificial plaque formation by 55-63%. These results showed that mouth gargling or pocket irrigation with L. acidophilus V-20 increased the No. of intraoral Lactobacilli and caused to decrease in the No. of P. gingivalis. This suggests that the replacement therapy by these Lactobacilli might be useful in the maintenance care of periodontal patients.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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