Ethanol often causes critical health problems by altering the neuronal activities of the central and peripheral nerve systems. One of the cellular targets of ethanol is the plasma membrane proteins including ion channels and receptors. Recently, we reported that ethanol elevates membrane excitability in sympathetic neurons by inhibiting Kv7.2/7.3 channels in a cell type-specific manner. Even though our studies revealed that the inhibitory effects of ethanol on the Kv7.2/7.3 channel was diminished by the increase of plasma membrane phosphatidylinositol 4,5-bisphosphate (PI(4,5)P2), the molecular mechanism of ethanol on Kv7.2/7.3 channel inhibition remains unclear. By investigating the kinetics of Kv7.2/7.3 current in high K+ solution, we found that ethanol inhibited Kv7.2/7.3 channels through a mechanism distinct from that of tetraethylammonium (TEA) which enters into the pore and blocks the gate of the channels. Using a non-stationary noise analysis (NSNA), we demonstrated that the inhibitory effect of ethanol is the result of reduction of open probability (PO) of the Kv7.2/7.3 channel, but not of a single channel current (i) or channel number (N). Finally, ethanol selectively facilitated the kinetics of Kv7.2 current suppression by voltage-sensing phosphatase (VSP)-induced PI(4,5)P2 depletion, while it slowed down Kv7.2 current recovery from the VSP-induced inhibition. Together our results suggest that ethanol regulates neuronal activity through the reduction of open probability and PI(4,5)P2 sensitivity of Kv7.2/7.3 channels.
저농도의 ethanol(3-7%, v/v)을 tryptic soy broth (TSB)에 첨가하여 L. monocytogenes의 증식과 생존에 미치는 효과를 이 세균의 최적온도(35$^{\circ}C$)와 저온(-20, 5$^{\circ}C$) 및 고온(45, 50, 55$^{\circ}C$)에서 검토하였다. 35$^{\circ}C$에서의 L. monocytogenes의 증식은 ethanol농도의 증가와 더불어 저해되었으며, 5% ethanol의 존재하에서는 긴 유도기를 거친 후에 증식이 시작되었으나 ethanol 7%에서는 생균수가 계속 감소하였다. 3-7%의 ethanol을 함유한 TSB에 $10^{5}$-$10^{6}$ cells/$m\ell$의 L. monocytogenes를 접종하여 저온(5$^{\circ}C$, -2$0^{\circ}C$)에 저장하였을 때 5$^{\circ}C$에서 세균은 5% 이하의 ethanol 첨가시에는 증식하였으나 -2$0^{\circ}C$에서는 저장초기에 생균수가 빠르게 감소한 후 감소속도는 느리게 진행되었다. 냉장과 동결저장에서 3%의 ethanol첨가로서 control의 90% 이상의 세균이 제거되었다. $10^{6}$-$10^{7}$ cells/$m\ell$의 L. monocytogenes를 접종하여 고온(45, 50, 55$^{\circ}C$)에 저장한 경우, L. monocytogenes의 생균수는 45$^{\circ}C$에서는 느리게 감소하였으며 3% 이하의 ethanol 첨가에 의한 항균효과는 뚜렷한 차이가 없었다. 5$0^{\circ}C$와 55$^{\circ}C$에서 생균수가 빠르게 감소하였는데 특히 55$^{\circ}C$에서는 3, 5, 7%의 ethanol첨가로서 세균의 사멸속도는 각각 control의 1.5배, 3배, 5배 정도 증가하였다.다.
5종류의 식중독세균 (Aeromonas hydrophila, Escherichia coli O157:H7, Listeria monocytogenes, Staphylococcus aureus 196E, Salmonella typhimurium)에 대하여 솔잎 ethanol 추출물의 항균작용을 조사하였다. 솔잎 ehanol 추출물을 0-2% (w/v) 함유한 tryptic soy broth(TSB)에 각 식중독세균을 약 $10^4$-$10^{6}$ CFU/ml 정도 되게 접종하여 35$^{\circ}C$에서 48시간 배양하면서 증식억제 정도를 생균수 변화로서 비교하였다. Gram 양성균인 L. monocytogenes, S. aureus와 Gram 음성균인 A. hydrophila는 솔잎 ehanol 추출물에서는 0.5% 이상의 농도에서 증식이 억제되어 솔잎 ethanol 추출물의 항균활성이 우수하였다. 그러나 Gram 음성균인 E. coli O157:H7과 S. typhimurium은 2%의 솔잎 ethanol 추출물에서 약간 증식이 억제되었으나 대체로 두 균주 모두 솔잎 ethanol 추출물에 대하여 강한 내성을 나타내었다. 솔잎 ethanol 추출물에 의한 증식억제 효과는 S. aureus > A. hydrophila> L. monocytogenes > E. coli O157:H7의 순으로 나타났으며 S. typhimurium에서 가장 강한 내성을 나타내었다.
Cellulose 및 hemicellulose 를 함유하는 볏짚 등 농산폐자원을 Trichoderma로 만든 Koui와 효모를 동시에 처리하여 단일공정으로 ethanol과 xylose 를 생산할 수 있었다. 볏짚 50g을 처리하여 ethanol 18mι와 xylose 2.7g 을 생산할 수 있었으며 옥수수속대 50g에서 ethanol 3.8mι와 xylose 10.8 g을 얻을 수 있었다. 이 처리에서 토양 분리균 Tri-choderma sp. KI 7-2로 만든 Koji가 T. reesei 의 그것보다 높은 효모활성을 보였다. 볏짚의 alkali 전처리는 ethanol 및 xylose의 생산에 큰 효과가 없었으며 이에 대하여 논하였다
물김치에 ethanol. 또는 유기산 중 adipic acid, citric acid, acetic acid을 첨가하였을 때 김치의 발효 지연효과를 pH, 산도, 미생물수의 변화를 측정하여 조사하였으며 동시에 ethanol과 유기산을 첨가한 이 김치의 기호성을 살펴보아 다음과 같음 결과를 얻었다. 물김치에 ethanol을 0~5% 첨가하여 pH 변화를 조사한 결과 ethanol 함량이 높을수록 pH의 저하가 지연되었다. ethanol은 특히 발효 초기에 pH 저하 지연효과를 보여 2$0^{\circ}C$의 경우 발효 초기에 ethanol를 첨가하지 않은 김치는 pH 5.7에서 4.13까지 감소하는 반면 ethanol 5%를 첨가한 김치에서는 pH 5.8에서 5.14로 약간 감소하는데 그쳤다. 산도의 경우도 ethanol 함량이 높을수록 산도가 낮게 나타났으며 ethanol를 첨가하지 않은 김치에서는 산도 0.7~0.8%까지 증가하였으나 ethanol 5%를 첨가한 김치에서는 산도가 0.5~0.6%로 산도 증가가 억제되었다. 물김치에서 유기산 종류와 농도를 달리하여 첨가하였을 경우 사용된 유기산 중 adipic acid 첨가시 가장 발효 지연 효과가 컸으며 adipic acid 농도가 높아질수록 pH와 산도 변화가 적었다. Ethanol 2%와 adipic acid 0.1%를 병용 첨가한 결과에서는 유기산만을 첨가한 효과와 유사한 경향을 보였다. Ethanol를 2% 첨가한 물김치의 미생물 변화는 발효 중반이후 미생물 수가 낮게 나타났다. 물김치에 위에 사용된 유기산들을 0.025~0.2% 첨가하였을 때 대체적으로 유기산의 함량이 높을수록 균수가 감소하였으며 유기산 중 adipic acid에서 총균수와 젖산균수의 억제 효과가 가장 컸다. 물김치에 ethanol과 adipic acid을 첨가한 경우가 미생물 균수가 억제에 가장 효과가 있었다. Ethanol과 유기산 농도를 달리하여 제조한 김치의 기호도를 조사한 결과 맛과 향에서 control과 ethanol 2%를 첨가한 김치는 알콜 내, 알콜 맛에서만 유의적인 차이를 나타낸 반면 ethanol 2%와 adipic acid 0.1%를 병용 첨가한 김치는 전 항목에서 유의적인 차이를 나타내었다. 또한, 전반적인 기호도에서는 control이 3.4점으로 ethanol을 첨가한 김치와 같은 기호성을 나타내었고 ethanol 2%와 adipic acid 0.1%를 첨가한 김치도 3.2점으로 유사한 기호성을 보였다.
Ethanol 충격에 의한 Campylobacter jejuni 의 생존성 및 ethanol 충격 단백질의 합성과 내성반응을 연구하였다. 1% 의 ethanol 충격에 대해서는 60분, 3% 의 ethanol 충격에서는 30분, 5%의 ethanol 충격에서는 10분대데, 분자량이 90, 66, 60, 45, 24 kd 인 충격 단백질이 합성되는 것을 autoradiography 로 확인하였다. C. jejuni 를 1% 와 3% 의 ethanol 에서 30 분간 충격을 준후 각각 3% 와 5% 의 농도에 노출시켰을때의 생존율은 ethanol 충격엾이 직접 3% 와 5% 의 ethanol에 노출시켰을 때보다 $10^{1}$$-10^{2}$ 정도 높게 나타났다. 또 5% 에서 10분간 충격을 준후7% 의 ethanol 에 노출시켰을 때에도 직접 7% 에 노출시켰을 때보다 생존율이 $10^{2}$ 정도 높게 나타났다. 그러므로 1-5% 의 ethanol 로 충격을 받은 C. jejuni 는 그보다 높은 농도의 ethanol 에 대하여 ethanol 충격단백질에 의한 내성반응이 나타나 생존율의 감소가 훨씬 적어졌다.
Objectives The purpose of this study was to investigate the Anti-oxidation and anti-inflammatory effects of ethanol extract from asiasari radix (AR) on lipopolysaccharide (LPS)-induced in RAW 264.7 Cells Methods Anti-oxidative effects of AR were measured by scavenging activities of 1,1-diphenyl-2-picryl-hydrazyl (DPPH), 2,2'-azinobis (3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) (ABTS) and production of reactive oxygen species (ROS) in RAW 264.7 cells. Anti-inflammatory effects of AR were measured by mediators including nitric oxide(NO), interleukin-$1{\beta}$ (IL-$1{\beta}$), interleukin-6 (IL-6), tumor necosis factors-${\alpha}$ (TNF-${\alpha}$) and iNOS, IL-$1{\beta}$, IL-6, TNF-${\alpha}$ mRNA expression in RAW 264.7 cells. Results Total phenolic content was expressed $28.77{\pm}1.67$. DPPH radical Scavenging was increased depend on AR ethanol extract. ABAT radical Scavenging was increased depend on AR ethanol extract. Production of ROS was significantly decreased by AR ethanol extract on concentration of 100 (${\mu}g/ml$). Production of NO was significantly decreased by AR ethanol extract on concentration of $100({\mu}g/ml)$. Production of IL-$1{\beta}$, interleukin-6 and TNF-${\alpha}$ were increased depend on AR ethanol extract. And Production of interleukin-6, TNF-${\alpha}$ were significantly decreased AR ethanol extract. iNOS, IL-$1{\beta}$, IL-6, TNF-${\alpha}$ mRNA expression of RAW 264.7 cells was increased depend on AR ethanol extract. Conclusions According to this study, AR ethanol extract has anti-oxidative and anti-inflammatoy effects.
As a part of studios on the Quality control of index components in crude drug preparations, extraction yields of ginseng saponins from crude drug extracts were identified by TLC and quantified by HPLC. So-Shi-Ho-Tang(小柴胡湯), Sa-Kun-Ja-Tang(四君子湯), Yook-Kun-Ja-Tang(六君子湯) and In-sam-Tang(人蔘湯) were extracted with water, 30%-ethanol, 50%-ethanol, 80%-ethanol and absolute ethanol to analyze ginseng saponins in the crude drug extracts prepared with various concentrations of ethanol. Ginseng saponins were extracted considerably more from the extracts with higher concentrations of ethanol than those with water or lower concentrations of ethanol. Extraction yields of ginseng-side-Rb$_1$, -Rb$_2$ and -R$_c$ from four crude drug preparations were the lowest as 4.9~45.9%, 5.0~40.1, and 6.3~43.7% in water extract and the highest as 29.5~62.6%, 26.7~61.4% and 31.4~62.0% in absolute ethanol extract, compared with those of 80%-methanol extracts.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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