This study has demonstrated the molecular variation of 5S rRNA genes in 15 Allium subgenus Rhizirideum and 1 Allium subg. Allium. For cloning of the 5S rRNA genes, PCR products were obtained from amplification with oligonucleotide primers which were derived from the conserved coding region of 5S rRNA genes. These amplified PCR products were cloned and identified by FISH and sequence analysis. The 5S rRNA loci were primarily located on chromosomes 5 and/or 7 in diploid species and various chromosomes in alloploid species. The size of the coding region of 5S rRNA genes was 120 bp in all the species and the sequences were highly conserved within Allium species. The sizes of nontranscribed spacer (NTS) region were varied from 194 bp (A. dektiude-fustykisum, 2n=16) to 483 bp (A. sativum). Two kinds of NTS regions were observed in A. victorialis var. platyphyllum a diploid, A. wakegi an amphihaploid, A. sacculiferum, A. grayi, A. deltoide-fistulosum and A. wenescens all allotetraploids, while most diploid species showed only one NTS region. The species containing two components of NTS region were grouped with different diploid species in a phylogenetic tree analysis using the sequences of 5S rRNA genes and adjacent non-coding regions.
Journal of Korean Society of Environmental Engineers
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v.38
no.4
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pp.169-176
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2016
This research explored the feasibility of preparing and utilizing preformed polymeric solution of Fe(III) as coagulants for water treatment. The differentiation and quantification of hydrolytic Fe(III) species in coagulant was done by utilizing spectrophotometric method based on the interaction of Fe(III) with Ferron as a complexing agent. The properties of the synthesized polymeric iron chloride (PICl) showed that the quantity of polymeric Fe(III) produced at r = 1.5 was 20% of the total iron in solution, as showing maximum contents. Coagulation experiments were conducted under the condition of various coagulant doses and pH for each coagulant prepared. From the comparison of the characterization of coagulation for $FeCl_3$ (r = 0.0) and PICl (r = 0.5, 1.0, 1.5) coagulants, PICl (r = 0.5, 1.0, 1.5) coagulants was found to be more effective than other coagulant for the removal of organic matters. The experimental results for the coagulation tests at various pH ranges showed that the PICl was least affected by the coagulation pH and PICl was very effective for the removal of turbidity and organic materials over wide pH range (pH 4-9) tested.
Background and Objectives: Myocardial ischemia-reperfusion injury (MIRI) refers to the damage of cardiac function caused by restoration of blood flow perfusion in ischemic myocardium. However, long non-coding RNA prostate androgen regulated transcript 1 (PART1)'s role in MIRI remain unclear. Methods: Immunofluorescence detected LC3 expression. Intermolecular relationships were verified by dual luciferase reporter assay. 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide, flow cytometry and transferase-mediated dUTP nick-end labeling (TUNEL) assays analyzed cell viability and apoptosis. The release of lactate dehydrogenase was tested via enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Left anterior descending coronary artery surgery induced a MIRI mouse model. Infarct area was detected by 2,3,5-triphenyltetrazolium chloride staining. Hematoxylin and eosin staining examined myocardial injury. ELISA evaluated myocardial marker (creatine kinase MB) level. Results: PART1 was decreased in hypoxia/reoxygenation (H/R) induced AC16 cells and MIRI mice. PART1 upregulation attenuated the increased levels of Bax, beclin-1 and the ratio of LC3II/I, and enhanced the decrease of Bcl-2 and p62 expression in H/R-treated cells. PART1 upregulation alleviated H/R-triggered autophagy and apoptosis via miR-302a-3p. Mechanically, PART1 targeted miR-302a-3p to upregulate transcription factor activating enhancer-binding protein 2C (TFAP2C). TFAP2C silencing reversed the protected effects of miR-302a-3p inhibitor on H/R treated AC16 cells. We further established TFAP2C combined to dual-specificity phosphatase 5 (DUSP5) promoter and activated DUSP5. TFAP2C upregulation suppressed H/R-stimulated autophagy and apoptosis through upregulating DUSP5. Overexpressed PART1 reduced myocardial infarction area and attenuated MIRI in mice. Conclusion: PART1 improved the autophagy and apoptosis in H/R-exposed AC16 cells through miR-302a-3p/TFAP2C/DUSP5 axis, which might provide novel targets for MIRI treatment.
Park, Jae Eun;Kim, Hyeon Woo;Yun, Sung Hwan;Kim, Sun Jung
Journal of Ginseng Research
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v.45
no.6
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pp.754-762
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2021
Background: Ginsenoside Rh2, a major saponin derivative in ginseng extract, is recognized for its anti-cancer activities. Compared to coding genes, studies on long noncoding RNAs (lncRNAs) and microRNAs (miRNAs) that are regulated by Rh2 in cancer cells, especially on competitive endogenous RNA (ceRNA) are sparse. Methods: LncRNAs whose promoter DNA methylation level was significantly altered by Rh2 were screened from methylation array data. The effect of STXBP5-AS1, miR-4425, and RNF217 on the proliferation and apoptosis of MCF-7 breast cancer cells was monitored in the presence of Rh2 after deregulating the corresponding gene. The ceRNA relationship between STXBP5-AS1 and miR-4425 was examined by measuring the luciferase activity of a recombinant luciferase/STXBP5-AS1 plasmid construct in the presence of mimic miR-4425. Results: Inhibition of STXBP5-AS1 decreased apoptosis but stimulated growth of the MCF-7 cells, suggesting tumor-suppressive activity of the lncRNA. MiR-4425 was identified to have a binding site on STXBP5-AS1 and proven to be downregulated by STXBP5-AS1 as well as by Rh2. In contrast to STXBP5-AS1, miR-4425 showed pro-proliferation activity by inducing a decrease in apoptosis but increased growth of the MCF-7 cells. MiR-4425 decreased luciferase activity from the luciferase/STXBP5-AS1 construct by 26%. Screening the target genes of miR-4425 and Rh2 revealed that Rh2, STXBP5-AS1, and miR-4425 consistently regulated tumor suppressor RNF217 at both the RNA and protein level. Conclusion: LncRNA STXBP5-AS1 is upregulated by Rh2 via promoter hypomethylation and acts as a ceRNA, sponging the oncogenic miR-4425. Therefore, Rh2 controls the STXBP5-AS1/miR-4425/RNF217 axis to suppress breast cancer cell growth.
From a cluster of structural rRNA genes which has previsouly been cloned (Hwang and Kim, in submission; J. Microbiol. Biotechnol.), a 1.0-kb Eco RI fragment of DNA which shows significant homology to the 25S and rRNA s of Tricholoma matsutake was used for sequence analysis. Nucleotide sequence was bidirectionally determined using delection series of the DNA fragment. Comparing the resultant 1016-base sequence with sequences in the database, both the 3'end of 25S-rRNA gene and 5S rRNA gene were searched. The 5S rRNA gene is 118-bp in length and is located 158-bp downstream of 3'end of the 25S rRNA gene. IGSI and IGS2 (partial) sequences are also contained in the fragment. Multiple alignment of the 5S rRNA sequences was carried out with 5S rRNA sequences from some members of the subdivision Basidiomycotina obtained from the database. Polygenetic analysis with distance matrix established by Kimura's 2-parameter method and phylogenetic tree by UPGMA method proposed that T. matsutake is closely related to efibulobasidium allbescens. Secondary structure of 5S rRNA was also hypothesized to show similar topology with its generally accepted eukaryotic counterpart.
A total of 220 adult male mice (18-20g) of the S.M. strain were divided into ten experimental and control groups. The total-body X-ray irradiation doses used were 50 r, 100r, 200r, 400r, 600r, 800r, 1,000r, 1,200r, 1,400r, and1,600r. The respiratory arrest (mortality) caused by each irradiation doses were observed for 30 days. Relationships between irradiation doses and survival time and percentage of response were examined. From this experiment, a formula was obtained to express the relationship among three factors, which may be presented as follows : {{{{{{{{P= { 10} over { SQRT { 2 pi } } INT _{ - INF }^{ p'} e-{(p'-50)^2 } over {200 }dp···(a) p'=100 LEFT { t^0.3- LEFT ( { { 16.9965} over {D-60 } } RIGHT ) ^{ { 1} over {2.5 } } } / LEFT { LEFT ( { 26372.43} over {D-81.86 } RIGHT ) ^{ { 1} over {2.5 } } -( { { 16.9965} over {D-60 } } RIGHT ) ^{ { 1} over {2.5 } } ···(b) p= { (D-60) t^0.75-16.9965} over {0.2186 t^0.75 +263.55434 }····(c) }} {{{{P= { 10} over { SQRT { 2 pi } } INT _{ - INF }^{ p'} e-{(p'-50)^2 } over {200 }dp···(a) p'=100 LEFT { t^0.3- LEFT ( { { 16.9965} over {D-60 } } RIGHT ) ^{ { 1} over {2.5 } } } / LEFT { LEFT ( { 26372.43} over {D-81.86 } RIGHT ) ^{ { 1} over {2.5 } } -( { { 16.9965} over {D-60 } } RIGHT ) ^{ { 1} over {2.5 } } ···(b) p= { (D-60) t^0.75-16.9965} over {0.2186 t^0.75 +263.55434 }····(c)
The purpose of this study was to classify the contents of self-image of college men and to investigate how clothing behavior was influenced by self-image, age, major, and the expenses of clothing. Samples were 342 male students of univer-sity in Seoul. Results of this study were following : 1. Four factors of self-image derived by factor analysis : F. 1‘mature-unmatured’;F. 2‘characteristic-ordinary’; F. 3‘conservative-open’; F. 4‘dominant-submissive’.2. 5 variables of clothing behavior were influenced by real self-image. Fashion was influenced by characteristic, open, dominant image, and the expenses of clothing. The ex-planatory power of the 4 variables was 29.3%. Aesthetics was influenced by characteristic, submissive, conservative image, the expenses of clothing, and age(R2=28.7%). Modesty was influenced by conservative and ordinary im-age(R2=6.5%). Coformity was influenced by ordinary image and the expenses of clothing (R2=5.7%). Comfort was influenced by dominant image and age(R2=5.3%). 3. 5 variables of clothing behavior were influenced by ideal self-image. Fashion was influenced by unmatured, characteristic, sub-missive image, and the expenses of clothing (R2=28.9%). Aesthetics was influenced by characteristic image, the expenses of clothing, and age(R2=23.5%). Modesty was influenced by conservative, mature, and ordinary image (R2=8.3%). Coformity was influenced by ordinary image(R2=1.9%). Comfort was influenced by mature image and age(R2=5.6%). The findings indicated that self-image had a significant effect on fashion and aesthetics, and characteristic image and conservative image were important variables that affected clothing behavior of college men.
Autophagy is crucial for immune defense against Mycobacterium tuberculosis (Mtb) infection. Mtb can evade host immune attack and survival within macrophages by manipulating the autophagic process. MicroRNAs (miRNAs) are small, non-coding RNAs that are involved in regulating vital genes during Mtb infection. The precise role of miRNAs in autophagy with the exits of Mtb remains largely unknown. In this study, we found miR-1958, a new miRNA that could regulate autophagy by interacting with 3'UTR of autophagy-related gene 5 (Atg5). In addition, Mtb infection triggered miR-1958 expression in RAW264.7 cells. What's more, miR-1958 overexpression blocked autophagic flux by impairing the fusion of autophagosomes and lysosomes. Overexpression of miR-1958 reduced Atg5 expression and LC3 puncta while inhibition of miR-1958 brought an increase of Atg5 and LC3 puncta; the opposite results were observed in detection of p62. The survival of Mtb in RAW264.7 cells transfected with mimic of miR-1958 was enhanced. Taken together, our research demonstrated that a novel miR-1958 could inhibit autophagy by interacting with Atg5 and favored intracellular Mtb survival in RAW264.7 cells.
Kim, Kyung Min;An, Hye Young;Lim, Jun-Heok;Lee, Jea-Keun;Won, Yong Sun
Korean Chemical Engineering Research
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v.55
no.5
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pp.704-710
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2017
Although the desalination technique using gas hydrate formation is at a development stage compared to the commercially well-established reverse osmosis (RO), it still draws attention because of its simplicity and moderate operational conditions especially when using refrigerants for guest gases. In this study, DFT (density functional theory)-based molecular modeling was employed to explain the energetics of the gas hydrate formation using HFC (hydrofluorocarbon) and HCFC (hydrochlorofluorocarbon) refrigerants. For guest gases, R-134a, R-227ea, R-236fa, and R-141b were selected and three cavity structures ($5^{12}$, $5^{12}6^2$, and $5^{12}6^4$) composed of water molecules were constructed. The geometries of guest gas, cavity, and cavity encapsulating guest gas were optimized by molecular modeling respectively and their located energies were then used for the calculation of binding energy between the guest gas and cavity. Finally, the comparison of binding energies was used to propose which refrigerant is more favorable for the gas hydrate formation energetically. In conclusion, R-236fa was the best choice in terms of thermodynamic spontaneity, less toxicity, and low solubility in water.
The expression vector (pWHM3-TR1R2) for sprT gene encoding Streptomyces griseus trypsin (SGT) followed by two regulatory genes, sgtR1 and sgtR2, was introduced into Streptomyces lividans TK24 and Streptomyces griseus IFO 13350. Various media with different compositions were used to maximize the productivity of SGT in the recombinant trains. he SGT productivity was best when the transformant of S. lividans TK24 was cultivated in R2YE medium (0.74 unit/mL) at 5 days of cultivation. C5/L (0.66 unit/mL) medium also gave a good productivity, but Livid (0.08 unit/mL) and NDSK (0.06 unit/mL) yielded poor productivities. S. griseus IFO 13350/pWHM3-TR1R2 produced SGT by 1.518 unit/mL (C5/L), 1.284unit/mL (R2YE),0.932 unit/mL (NDSK), and 0.295 unit/mL (Livid) at 7 days of cultivation, which was much higher than those from S. lividans TK24/TR1R2. The SGT protein was purified from the culture broth of S. griseus IFO 13350/pWHM3-TR1R2 in C5/L to homogeneity via ammonium sulfate fractionation, and CM-sepharose and SP-sepharose column chromatographies. The specific activity of purified SGT was 69,252 unit/mg, and the final purification fold and recovery yield were 6.5 and 1.4%, respectively.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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