The genome of Hantaan virus, the prototype of the hantavirus genus, is composed of three segmented, single stranded negative sense RNA genome. The 5' and 3' termini of the Hantaan virus RNA genome contain noncoding regions (NCRs) that are highly conserved and complementary to form panhandle structures. There are some reports that these NCRs seems to control gene expression and viral replication in influenza virus and vesicular stomatitis virus. In this study, we examined whether NCRs in Hantaan virus playa role in expression of the viral nucleocapsid protein (Np) and foreign (luciferase) gene. The 5' and/or 3' NCR-deleted mutants were constructed and analysed. The Np expression of 5' NCR-deleted clone was similar to that of the clone containing full S genome. In the case of 3' NCR-deleted clone, it showed 40% reduction. To investigate the role of NCR in foreign gene expression, the clones which are replaced ORF of Hantaan viral Np gene with that of luciferase gene were constructed. The results were similar to those of the experiments using Np gene. These results suggest that 3' NCR is more important than 5' NCR in protein expression. To find out a critical region of 3' NCR in protein expression, several clones with a deleted part of 3' NCR were constructed and analyzed. The deletion of the conserved region in 3' NCR showed $20{\sim}30%$ decrease in Np expression. However there were no change in luciferase activities between clones with or without non-conserved region of 3' NCR. These results suggest that the 3' NCR of Hantaan virus S genome, especially conserved region in 3' NCR, plays an important role in the expression of Hantaan viral Np and foreign genes.
Purpose: Use of radiotherapy combined with chemotherapy is increasing in hypopharyngeal cancer. However, many show residual tumor after radiotherapy. Timing for treatment evaluation and salvage therapy is essential. However, optimal timing for salvage surgery has not been suggested. In this study, we tried to evaluate optimal timing for salvage surgery. Methods and Materials: Patients who were diagnosed with hypopharyngeal squamous cell carcinoma between 2006 and 2015 were retrospectively analyzed. All patients received definitive radiotherapy with or without chemotherapy. Response of all treated patients were analyzed at 1, 3, and 6 months after radiotherapy. Any patients with progression before 6 months were excluded. Results: A total of 54 patients were analyzed. Complete remission (CR) rates at 1 month (CR1), 3 months (CR3) and 6 months (CR6) were 66.7%, 81.5%, and 90.7%, respectively. Non-CR at 1 month (NCR1), 3 months (NCR3), and 6 months (NCR6) showed poor locoregional recurrence-free survival rates (1-year rates of 63.7%, 66.7%, and 0.0%, respectively) compared to CR1, CR3, and CR6 (1-year rates 94.3%, 88.0%, and 91.5%, respectively). Particularly significant differences were seen between CR6 and NCR6 (p < 0.001). Of 10 patients with NCR3, 5 showed CR at 6 months (NCR3/CR6). There was no statistical difference in locoregional recurrence-free survival between CR3 and NCR3/CR6 group (p = 0.990). Conclusion: Our data suggest half of patients who did not show CR at 3 months eventually achieved CR at 6 months. Waiting until 6 months after radiotherapy may be appropriate for avoiding additional salvage therapy.
Journal of Information Science Theory and Practice
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제1권2호
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pp.69-83
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2013
This paper aims to determine the preference and use of electronic information and resources by blind/visually impaired users in the leading National Capital Region (NCR) libraries of India. Survey methodology has been used as the basic research tool for data collection with the help of questionnaires. The 125 in total users surveyed in all the five libraries were selected randomly on the basis of willingness of the users with experience of working in digital environments to participate in the survey. The survey results were tabulated and analyzed with descriptive statistics methods using Excel software and 'Stata version 11'. The findings reveal that ICT have a positive impact in the lives of people with disabilities as it helps them to work independently and increases the level of confidence among them. The Internet is the most preferred medium of access to information among the majority of blind/visually impaired users. The 'Complexity of content available on the net' is found as the major challenge faced during Internet use by blind users of NCR libraries. 'Audio books on CDs/DVDs and DAISY books' are the most preferred electronic resources among the majority of blind/visually impaired users. This study will help the library professionals and organizations/institutions serving people with disabilities to develop effective library services for blind/visually impaired users in the digital environment on the basis of findings on information usage behavior in the study.
Barley yellow dwarf virus PAV (BYDV-PAV) has a 5.7-kb positive-sense single-stranded RNA genome that contains six open reading frames (ORFs). BYDV-PAV produces three subgenomic RNAs (sgRNAs). The largest of which encodes the coat, 17-kDa, and readthrough proteins from two initiation codons. To investigate the role of intergenic and 3'-proximal noncoding regions (NCRs) in coat protein (CP) expression and BYDV-PAV replication, a full-length infectious cDNA of the RNA genome of an Illinois isolate of BYDV-PAV was constructed downstream of the Cauliflower mosaic virus-35S promoter. Linear DNA molecules of these cDNAs were infectious, expressed the 22-kDa CP, and produced both genomic RNA sgRNAs in ratios similar to those observed in protoplasts inoculated with viral RNA. The portion of 5'NCR of sgRNA1 between ORFs 2 and 3 was not required for, but enhanced translation of CP from ORF3. Mutants containing deletions in the NCR downstream of ORF5 failed to replicate in oat protoplasts. These results indicate that an intact 3$^1$NCR is required for BYDV-PAV replication.
C 언어로 만든 VLSI 레이아웃 언어를 사용하여 CMOS PLA를 설계한다. PLA cell의 library를 만들고 Protector 회로의 제어논리로 사용되는 PLA를 NCR 설계법칙을 이용하여 설계하고 레이아웃 프로그램을 만든다. 관련되는 프로그램 기법을 논의하고 레이아웃을 display할 수 있도록 한다.
Santos, Francisco J. Perez-de los;Garcia-Ortega, Luis Fernando;Robledo-Marquez, Karina;Guzman-Moreno, Jesus;Riego-Ruiz, Lina
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제31권5호
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pp.659-666
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2021
After Candida albicans, Candida glabrata is one of the most common fungal species associated with candidemia in nosocomial infections. Rapid acquisition of nutrients from the host is important for the survival of pathogens which possess the metabolic flexibility to assimilate different carbon and nitrogen compounds. In Saccharomyces cerevisiae, nitrogen assimilation is controlled through a mechanism known as Nitrogen Catabolite Repression (NCR). NCR is coordinated by the action of four GATA factors; two positive regulators, Gat1 and Gln3, and two negative regulators, Gzf3 and Dal80. A mechanism in C. glabrata similar to NCR in S. cerevisiae has not been broadly studied. We previously showed that in C. glabrata, Gln3, and not Gat1, has a major role in nitrogen assimilation as opposed to what has been observed in S. cerevisiae in which both factors regulate NCR-sensitive genes. Here, we expand the knowledge about the role of Gln3 from C. glabrata through the transcriptional analysis of BG14 and gln3Δ strains. Approximately, 53.5% of the detected genes were differentially expressed (DEG). From these DEG, amino acid metabolism and ABC transporters were two of the most enriched KEGG categories in our analysis (Up-DEG and Down-DEG, respectively). Furthermore, a positive role of Gln3 in AAA assimilation was described, as was its role in the transcriptional regulation of ARO8. Finally, an unexpected negative role of Gln3 in the gene regulation of ABC transporters CDR1 and CDR2 and its associated transcriptional regulator PDR1 was found. This observation was confirmed by a decreased susceptibility of the gln3Δ strain to fluconazole.
The RNA genome of poliovirus encodes a long polyprotein precursor and this polyprotein is cleaved proteolytically by viral protease to yield mature proteins. The mature proteins derived from the P1 polyprotein precursor are the component of capsids. To further delineate the process of capsid assembly and encapsidation, in a first attempt, a cell line which expresses the authentic P1 polyprotein was established. CV-1 cells were transfected with the pRCRSVS1P1 plasmid DNA which contains 5'ncr sequences, whole authentic capsid gene of poliovirus and neomycin resistance gene. These cells were treated with G418 for 3 months, and eventually G418 resistant cells were selected and formed colonies. Each colony was picked and grown in the media containing G418. DNA analysis indicated that 1 of 13 neomycin resistant cell lines (R2-18) contains whole poliovirus P1 capsid gene segment which was incorporated into the genome. Immuneprecipitation of cell lysates with sera from rabbit immunized with inactivateded Sabin type 1 particles demonstrated the constitutive expression of the poliovirus P1 capsid protein from R2-18.
목 적: Transfusion-transmitted virus는 간염과의 연관성이 아직 명확하지 않지만 특정 유전형이 원인불명의 간염 병원체로 작용하거나 다른 간염 바이러스와 중복 감염되어 임상 경과에 영향을 줄 가능성에 대한 연구가 필요하다. 본 연구는 국내 소아 B형 간염, C형 간염 및 원인 불명의 간염 환자의 TTV DNA 양성률과 유전형의 분포를 알아보기 위해 시행하였다. 방 법: 간 기능이 정상인 소아 88명을 대조군으로 하였으며 B형 간염 환자 14명, C형 간염 환아 12명, 2001년 6월부터 2004년 6월까지 인제의대 상계백병원을 방문한 원인 불명의 간염 환자 25명을 대상으로 하였다. 환아의 혈청 검체를 대상으로 N22 시발체를 이용한 PCR과 5'NCR 시발체를 이용한 PCR을 시행하였다. 또한 TLMV DNA 검출을 위한 seminested PCR을 시행 하였다. N22 primer를 이용한 PCR 양성 산물을 대상으로 염기서열의 직접 분석이 시행되었다. 결 과: 1) N22 시발체를 이용한 TTV DNA 양성률은 대조군에서 11.3%, 간염군에서 19.6%였다(p=0.105). B형 간염의 28.5%, C형 간염의 25%, 원인 불명의 간염 24%에서 TTV DNA가 양성이었으며 대조군에 비해 유의한 차이는 없었다. 2) 5'NCR 부위 시발체를 이용한 TTV DNA 양성률은 대조군에서 32.9%, 간염군에서 54.9%였다. B형 간염의 71.4%, C형 간염의 50%, 원인 불명의 간염 48%에서 TTV DNA가 양성이었다. B형 간염 환자군에서 양성률이 대조군에 비해 높았다(p=0.008). 3) 5'NCR 부위 시발체를 이용한 TLMV DNA양성률은 간염 환자군과 정상 대조군에서 각각 29.4% (15/51명), 48.9% (43/88명)였다. B형 간염 21.4% (3/14), C형 간염 16.6% (2/12), 원인 불명의 간염 환자에서 40% (10/25)였다. 4) 염기 서열 분석: N22 시발체를 이용해서 PCR 반응 산물 중 총 29예(간염 환자 8명, 대조군 11명)의 염기서열을 분석한 결과 G1 유전형은 10예(52%)였고 이 중 G1a형이 7예였다. G2 유전형은 3예, G3 유전형은 2예였으며 나머지는 정확한 분류가 되지 않았다. 결 론: 국내 소아에 감염된 TTV 유전형 중 가장 흔한 것은 G1형이었다. TTV DNA 양성률은 대조군과 원인 불명의 간염군 간에 차이는 없었으며, B형 간염군에서 대조군에 비해 높았다.
We have determined and analyzed the full-length cDNA sequence of a coxsackievirus B3 (CVB3) Korean isolate (CVB3-Korea/97) which has been known as a general human pathogen. The whole genome contains 7,400 nucleotides and has a single large open reading frame with 6,555 nucleotides that encodes a potential polyprotein precursor of 2,185 amino acids. The genome also contains a 5' non-coding region (NCR) of 741 bases and a 3' NCR of 104 bases followed by poly(A) tail. Sequence homologies of nucleotides and deduced amino acids between the CVB3-Korea/97 strain and the prototype (Nancy strain) were 81.7% and 91.5%, respectively. The genes encoding the functional proteins including viral protease and RNA dependent RNA polymerase showed higher homology than those encoding the structural proteins. We have further analyzed the sequences of 5' NCR, VP1 and VP2 of CVB3-Korea/97, which are known as cardiovirulent determining factors at the nucleotide and amino acid levels. Although the CVB 3-Korea/97 strain was isolated from an aseptic meningitis patient without cardiomyopathy, its 234th nucleotide and 165th amino acid were uracil and Asn as same as those of other cardiovirulent strains one. However, the 155th amino acid of VP1, which closely associated with cardiovirulence, was replaced with $Arg^{155}$ by single nucleotide substitution from $A^{2916}$ to $T^{2916}$. Moreover, additional amino acid substitutions were observed in the flanking region of $Asp^{155}$. Taken together, amino acid(s) substitution in VP1 may playa critical role in determining cardiovirulence of the CVB3-Korea/97 strain rather than individual nucleotide replacements in the 5' NCR and/or an amino acid substitution in VP2.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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