Park, Jin-Ki;Yeo, Joon Mo;Cho, Kwanghyun;Park, Hyun-Jung;Lee, Won-Young
한국동물생명공학회지
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제37권3호
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pp.169-175
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2022
Bovine mammary epithelial (MAC-T) cells are commonly used to study mammary gland development and mastitis. Lipopolysaccharide is a major bacterial cell membrane component that can induce inflammation. Autophagy is an important regulatory mechanism participating in the elimination of invading pathogens. In this study, we evaluated the mechanism underlying bacterial mastitis and mammary cell death following lipopolysaccharide treatment. After 24 h of 50 ㎍/mL lipopolysaccharide treatment, a significant decrease in the proliferation rate of MAC-T cells was observed. However, no changes were observed upon treatment of MAC-T cells with 10 ㎍/mL of lipopolysaccharide for up to 48 h. Thus, upon lipopolysaccharide treatment, MAC-T cells exhibit dose-dependent effects of growth inhibition at 10 ㎍/mL and death at 50 ㎍/mL. Treatment of MAC-T cells with 50 ㎍/mL lipopolysaccharide also induced the expression of autophagy-related genes ATG3, ATG5, ATG10, ATG12, MAP1LC3B, GABARAP-L2, and BECN1. The autophagy-related LC3A/B protein was also expressed in a dose-dependent manner upon lipopolysaccharide treatment. Based on these results, we suggest that a high dose of bacterial infection induces mammary epithelial cell death related to autophagy signals.
Objectives: To expand and provide information on the efficacy of herbal medicines, anti-obesity effects were evaluated. In many studies, plant-derived components with anti-obesity efficacies have been investigated for their potential inhibitory effects on 3T3-L1 preadipocyte cells. The purpose of this study was to investigate the anti-obesity effects of 65 herbal medicine in 3T3-L1 preadipocyte cells. Methods: Preferentially, 3T3-L1 cells were treated with 65 herbal medicines (500 ㎍/mL) during differentiation for 8 days. Next, 3T3-L1 cells were treated with selected herbal medicines at concentrations ranging from 50 to 200 ㎍/mL during differentiation for 8 days. The accumulation of lipid droplets was determined by Oil Red O staining. The expressions of genes related to adipogenesis were measured by reverse transcription polymerase chain reaction and Western blot analyses. Results: Among the 65 kinds of herbal medicines, 13 herbal medicines that been shown to be effective against the accumulation of lipid droplets were selected. Finally, selected Banhasasim-tang and Samhwangsasim-tang showed inhibitory activity on adipocyte differentiation at 3T3-L1 preadipocytes without affecting cell toxicity. In addition, Banhasasim-tang and Samhwangsasim-tang significantly reduced the expression levels of several adipocyte marker genes including peroxisome proliferator activated receptor-γ and CCAAT/enhancer binding protein-α. Conclusions : These results suggest that the ability of Banhasasim-tang and Samhwangsasimtang has inhibited overall adipogenesis and lipid accumulation in the 3T3-L1 cells. Banhasasim-tang and Samhwangsasim-tang may be a promising medicine for the treatment of obesity and related metabolic disorders.
Objective : Obesity, which has recently been rapidly increasing in the obese population, is caused by an imbalance in energy intake and consumption. The reason why we need to manage obesity well is that the prevalence of complications such as diabetes, atherosclerosis, insulin resistance, and cardiovascular disease increases. In this study, the effect of FO (Fragaria orientalis) water extract on fat metabolism in 3T3-L1 cells was observed to develop a new anti-obesity material based on Mongolian medical books. Methods : The effect of FO extract on adipogenesis in 3T3-L1 cells was observed using DPPH scavenging, pancreatic lipase inhibitory activity, MTT analysis and Oil-red-O staining method. And the expression of proteins related to lipid metabolism was analyzed by Western blot. Results : The FO group significantly increased the DPPH radical scavenging activity at 5 mg/ml compared to the positive control BHA at 0.1 mg/ml. In oil red O staining at a safe concentration without cytotoxicity, lipid accumulation was significantly inhibited by less than 80% compared to the control group at all concentrations. Moreover, treatment of FO significantly increased the expression of proteins related to lipid metabolism, such as p-AMPK and p-ACC, in 3T3-L1 cells, and the expression of CPT-1 tended to increase in a dose-dependent manner. However, the expression of PPAR-γ was significantly decreased in a dose-dependent manner. Conclusion : These results suggest that FO water extract has a potential anti-obesity effect and are expected to be utilized in the development of materials for obesity prevention and treatment.
Obesity increases the risk of many adult diseases, such as atherosclerosis, diabetes, hypertension, ischemic heart disease and breast cancer. Inhibition of adipogenesis is an effective way in the anti-obesity management. Because of main components of Saururus chinensis is flavonoid, it has been showed some improvement by its antioxidant effects on the atherosclerosis, heart disease and diabetic hyperlipidemia. But mechanism of anti-obesity effect of S. chinensis is not clear. We investigated the effects of ethanol extracts of S. chinensis on adipogenesis in the 3T3-L1 pre-adipocyte. The 3T3-L1 cell line is commonly used to study adipogenesis in vitro. In this study, ethanol extracts of S. chinensis significantly decrease the lipid accumulation in the 3T3-L1 cells proved by measuring triglyceride contents and Oil red O staining. The proposed mechanism of inhibition of adipogenesis in the 3T3-L1 cells with ethanol extracts of S. chinensis is down-regulation of transcriptional factors and adipocyte-specific genes such CCAAT/enhancer binding protein ${\alpha}$ ($C/EBP{\alpha}$) and Peroxisome proliferator activated receptor ${\gamma}$ ($PPAR{\gamma}$) in concentration dependent pattern. These results suggest that ethanol extracts of S. chinensis inhibits adipognesis in the 3T3-L1 cells and can be used as a safe and efficient natural substance to manage anti-obesity.
Epigallocatechin-3-gallate(EGCG)는 녹차에 함유된 flavonoid 계열 화합물로, 녹차의 대표적인 유효성분으로 알려져 있다. 본 연구는 3T3-L1 세포에서 EGCG의 항비만 작용 및 항산화 효소 활성을 평가하였다. EGCG는 지방세포 분화를 유의적으로 억제하였으며, 지방세포 분화와 관련된 단백질인 $C/EBP{\alpha}$와 aP2의 발현을 감소시켰다. 동시에 EGCG는 GSH의 활성을 유도하였으며, 항산화 효소인 SOD, CAT, GPx 및 GR의 활성을 증가시켰다. EGCG는 지방세포 분화 동안 활성산소종의 형성을 감소시켰다. 체내 phase II 효소인 HO-1과 GCLC는 EGCG에 의해 발현이 유도되었다. 따라서 EGCG는 3T3-L1 세포에서 항산화 효소의 활성화를 유도하며 동시에 지방세포로의 분화를 억제하는 것으로 나타났다. 또한, EGCG는 활성산소종의 생성을 억제하였으며, 이는 EGCG의 항산화 작용에 의한 지방세포 분화 억제 작용이 관련이 있는 것으로 판단된다. EGCG에 의한 항비만 효과와 항산화 작용을 연구한 본 연구는 녹차를 활용한 체지방 감소 효능을 지닌 식품 개발에 기초 자료로 활용될 수 있을 것으로 생각된다.
This study examined the antioxidative and lipid accumulation inhibitory effects of 14 plants from Mongolia and Myanmar on 3T3-L1 and HepG2 cells. The total phenolic and flavonoid contents (TPC and TFC) of 14 plant extracts were measured, and the antioxidative activities were analyzed using DPPH, ABTS, FRAP, and ORAC. After measuring the pancreatic lipase levels and performing the thiobarbituric acid assay, the degree of lipid accumulation was determined by lipid (Oil Red O) staining and triglyceride assay in 3T3-L1 and HepG2 cells. M. paniculate (259.43 mgGAE/g) and C. benghalensis (130.78 mgNAE/g) had the highest TPC and TFC, respectively, among the 14 plants. R. acicularis Lindl. had the highest antioxidant activity in DPPH. The ABTS, FRAP, and ORAC results showed that the antioxidant activity of 11 species was higher than that of the positive control. The pancreatic lipase inhibitory effect of C. angustifolium Scop. was reduced to 23.65% at 0.1 mg/mL, and the level of lipid peroxidation of C. abrorescens Lam. was 0.63 nmol/mg. Five selected plants inhibited the lipid accumulation and triglyceride content, respectively, in 3T3-L1 and HepG2 cells. These results provide scientific evidence for developing functional foods using 14 plants from Mongolia and Myanmar, which have antioxidant activities and lipid accumulation reduction effects.
[Purpose] In vivo studies have demonstrated the ergogenic benefits of eleutherococcus senticosus (ES) supplementation. ES has been observed to enhance endurance capacity, improve cardiovascular function, and alter metabolic functions (e.g., increased fat utilization); however, the exact mechanisms involved remain unknown. We aimed to determine whether ES could effectively induce fat loss and improve muscle metabolic profiles through increases in lipolysis- and lipid metabolism-associated protein expression in 3T3-L1 adipocytes and C2C12 skeletal muscle cells, respectively, to uncover the direct effects of ES on adipocytes and skeletal muscle cells. [Methods] Different doses of ES extracts (0.2, 0.5, and 1.0 mg/mL) were added to cells (0.2 ES, 0.5 ES, and 1.0 ES, respectively) for 72 h and compared to the vehicle control (control). [Results] The intracellular triacylglycerol (TG) content significantly decreased (p < 0.05 for 0.2 ES, p < 0.01 for 0.5 ES and 1.0 ES) in 3T3-L1 cells. Adipose triglyceride lipase, which is involved in active lipolysis, was significantly higher in the 1.0 ES group than in the control group (p < 0.01) of 3T3-L1 adipocytes. In C2C12 cells, the mitochondrial protein voltage-dependent anion channel (VDAC) was significantly increased in the 1.0 ES group (p < 0.01). Furthermore, we found that 1.0 ES activated both 5' AMP-activated protein kinase (AMPK) and acetyl-CoA carboxylase (ACC) in skeletal muscle cells (p < 0.01). [Conclusion] These findings suggest that ES extracts decreased TG content, presumably by increasing lipase in adipocytes and metabolism-associated protein expression as well as mitochondrial biogenesis in muscle cells. These effects may corroborate previous in vivo findings regarding the ergogenic effects of ES supplementation.
This study was conducted to investigate the anti-adipogenic activity of esculetin (ECT) which is reported to be attributable to the modulation of antioxidant enzymes during adipogenesis. After six days of ECT treatment of 3T3-L1 cells, lipid accumulation was determined by Oil red O staining. The levels of glutathione (GSH) and reactive oxygen species (ROS), and the activities of antioxidant enzymes including glutathione reductase, glutathione peroxidase (GPx), and catalase were examined. In addition, the protein expression of glutamate-cysteine ligase catalytic subunit (GCLC) and heme oxygenase-1 (HO-1) was measured by Western blot. ECT significantly inhibited lipid accumulation by approximately 80% and ROS production in a concentration-dependent manner. GSH level and GPx activity were increased by ECT by approximately 1.3-fold and 1.7-fold compared to the control group, respectively. GCLC and HO-1 expression were elevated by ECT. These results showed that ECT treatments strongly inhibit adipogenesis, increase GSH level, and upregulate the expression of GCLC and HO-1, possibly by decreasing ROS production in 3T3-L1 cells during adipogenesis.
In order to promote the value of the flowers as new agricultural products, we investigated the biological activities of rape, arrowroot, and rose extracts. Biological activities investigated included antioxidant activity and the effects on 3T3-L1 fibroblast cells. When each flower was extracted with methanol, the antioxidant index and electron donating activity of roses was the highest $(IC_{50}$ of rose extract was $17.6 \mu{g}/m\ell$). When 3T3-L1 fibroblast cells were treated with extracts made with hexane, ethyl acetate, and ether, the rape extracts had a cytotoxic effect on the cells. 12.2% of cells survived when treated with a 3mg/$m\ell$ ether extract while those treated with the same concentration of hexane and ethyl acetate had survival rates of 76.2% and 78.6% respectively. In contrast to rape, the ether extract of arrowroot and rose stimulated the growth of 3T3-L1 cells. The effect of rose extracts was much bigger than those of other extracts. Although every rose extract stimulated the growth of the 3T3-L 1 cells, the ether extract stimulated growth up to 168.6% compared to the control at the concentration of $0.3mg/m\ell$, and 148.3% at the concentration of $1mg/m\ell$. The toxicity on cells treated with $H_2 O_2$ of $450\mu{M}l$was decreased with the addition of rose extract. The survival rate after treatment with rose extract at the concentration of $100\mu{g}/m\ell$ was increased to 71% compared to the 32% survival rate of control. From these results, it can be concluded that the extracts of arrowroot and rose seem to stimulate cells, whereas the extract of rape has a cytotoxic effect. Biological activities of ether extract were the strongest compared to those of other extracts at the tested concentrations.
Conjugated linoleic acid (CLA)는 전지방세포의 증식 및 분화를 억제시키므로서 포유동물에서 지방의 축적을 감소시키는 것으로 알려져 있다. 논 연구의 목적은 diglyceride(DG), CLA, 및 DG-CLA가 전지방세포의 증식 및 분화를 억제시키는지를 알아보고자, 세포생존측정, glycerol-3-phosphate dehydrogenase (GPDH) 활성측정, 지방축적에 대한 Oil red O 염색을 실시하였다. DG, CLA, 및 DG-CLA의 처치는 전지방세포의 증식을 농도 의존적으로 감소시켰으며, 그러한 효과는 CLA에서 가장 강하게 나타났다. 이들 시험물질의 $100 {\mu}g/ml$ 농도에서 DG, CLA, DG-CLA는 유의적으로 GPDH의 활성을 낮추었으며(p<0.05), 이러한 결과는 전지방세포의 분화를 억제하는 것을 의미한다. 더불어 이들 시험물질은 전지방세포의 분화과정 중에 지방축적을 효과적으로 억제시켰다. 더욱이 DG-CLA가 DG 혹은 CLA보다 분화 및 지방축적에 대해 더 강한 효과를 보였다. 이러한 결과로부터 DG-CLA의 섭취는 사람에서 체중조절의 유용한 효과를 얻을 수 있을 것이다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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