다양한 탄소원을 사용하였을 시, 세포성장에 미치는 영향은 배양 5일제 glucose를 사용한 배양세포에서 dry cell weight가 11.2 g/L, wet cell weight가 310.8 g/L로 가장 높았다. 이후 배양 10일차에는 오히려 sucrose를 탄소원으로 사용한 배양세포에서 dry cell weight가 13.4 g/L, wet cell weight가 480 g/L로 가장 높이 성장한 것을 확인할 수 있었다. Total secreted protein의 경우는 배양 10일차에 sucrose를 기본 탄소원으로 사용하였을 때 110.3 mg/L로 가장 높게 나왔다. Total secreted protease 역시, 배양 10일차에 sucrose를 기본 탄소원으로 사용한 배양씩에서 3950 U/L로 가장 많은 양이 측정되었다. 최종적으로 재조합된 단백질인 hGM-CSF의 생산량에 대한 측정결과, sucrose를 기본 탄소원로 사용한 배지에서 배양 10일차에 56 mg/L로 가장 높게 측정됨을 확인할 수 있었다. 이 외에 다양한 탄소원 농도변화에 따른 total secreted protein과 hGM-CSF의 안정성 평가를 확인해본 결과, total secreted protein의 경우, 비교대상으로 사용한 sucrose에서는 농도변화에도 큰 손실률을 보이지는 않았으나, sorbitol, mannitol, fructose, glucose의 경우에는 농도가 높아질수록 배양액내의 protein의 손실률이 증가 하였다. 총 분비된 hGM-CSF 역시 sucrose에 비해 sorbitol, mannitol, fructose, glucose에서는 분비된 hGM-CSF의 양이 크게 감소하는 것을 확인할 수 있었고, 탄소원의 농도가 높아질수록 hGM-CSF의 양이 감소하는 경향이 크게 나타났다.
Zymolyase 조효소로부터 분리, 정제되었고, 효모세포벽 용해 촉진물질로 밝혀진 바 있는 Arthrobacter luteus로부터 유래한 염기성 protease(AL-protease)의 효소학적 성질 및 활성 아미노산 잔기를 검색한 결과는 다음과 같다. 1. AL-pretense는 저해제 DFP 및 PMSF에 의해서 그 Protease 활성 및 용해 촉진활성이 동시에 완전히 소멸 되었으며, 그 저해 반응속도는 chymotrypsin에 대한 것에 비하여 대단히 완만하였다. 1.반응에서 AL-protease와 DFP의 결합 mole비는 1:1로 추정 되었다. 2. 정제된 AL-protease의 동결건조품 중에는 종래효모세포벽 용해반응에 관여하는 것으로 알려진 yeast phosphomannase를 비롯한 다당류 가수분해효소들의 활성은 그 어느 것도 인정되지 않았다. 3. AL-protease의 casein에 대한 최적 pH 및 최적 온도는 pH 10.5와 $65^{\circ}C$이었고, 그 활성은 pH 5${\sim}$11 사이와 $65^{\circ}C$이하에서 안정하였다. 또한, AL-Protease의 활성에 미치는 여러가지 금속이온의 영향은 인정되지 않았다. 4. [$^{32}P$]-DFP에 의하여 화학수식된 [$^{32}P$]-DIP-AL-protease에 대한 활성부위의 아미노산 잔기를 검색, 동정하기 위하여 조제용 PAG-전기영동, SDS-PAG-전기영동, Dowex 이온교환 크로마토그래피 및 고압 여지 전기영동을 실시하였고, 그 결과, AL-protease는 활성 부위에 1분자당 1 mole의 serine 잔기를 가지는 염기성 protease로 밝혀졌다.
In this paper, we have taken step in the direction to establish weak, strong and strict converse duality theorems for three types of dual models related to multiojective fractional programming problems involving ($H_p$, r)-invex functions.
파장 가변 필터는 부품의 소재나 동작 방식에 따라 그 특성이 다르기 때문에 시스템의 용도와 목적에 맞는 필터를 선택하여 사용하기 위해서는 이에 대한 충분한 이해가 필요하다. 이를 위해 본 고에서는 파장 가변 필터를 구현하기 위한 여러 가지 기술들에 대한 동작 원리를 살펴보았다. 현재까지 개발되어 상용화된 파장 가변 필터와 현재 연구중에 있는 새로운 개념의 파장 가변 필터에 대해서도 그 특성을 비교 분석하였다.
Kim, Wan-Soo;Rumohr, Heye;Schimid, Michael K.;Koh, Chul-Hwan
Journal of the korean society of oceanography
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제31권3호
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pp.117-122
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1996
Oxygen consumption by the Manila clam, Ruditapes philippinarum (Bivalvia: Veneridae) maintained in a culture tank for 7-10 weeks was measured with an automatic intermittent-flow-respirometer (AIFR). There was evidence for an endogenous tidal rhythm of 12.4 h in oxygen consumption, at irregular intervals of between about 7 and 18 hours during experiments of between 22 h 5 min and 70 h 32 min (duration) recording for fasting animals in constant darkness at constant temperatures in the absence of tidal rhythms.
Kinetic studies of the reactions of N-methyl-Y-${\alpha}$-bromoacetanilides with substituted X-benzylamines have been carried out in dimethyl sulfoxide at $25.0^{\circ}C$. The Hammett plots for substituent X variations in the nucleophiles (log $k_N$ vs ${\sigma}_X$) are slightly biphasic concave upwards/downwards, while the Bronsted plots (log $k_N$ vs $pK_a$) are biphasic concave downwards with breakpoints at X = H. The Hammett plots for substituent Y variations in the substrates (log $k_N$ vs ${\sigma}_Y$) are biphasic concave upwards/downwards with breakpoints at Y = H. The cross-interaction constant $\rho_{XY}$ values are all negative: $\rho_{XY}$ = -0.32 for X = Y = electron-donating; -0.22 for X = electron-withdrawing and Y = electron-donating; -1.80 for X = electron-donating and Y = electronwithdrawing; -1.43 for X = Y = electron-withdrawing substituents. Deuterated kinetic isotope effects are primary normal ($k_H/k_D$ > 1) for Y = electron-donating, while secondary inverse ($k_H/k_D$ < 1) for Y = electronwithdrawing substituent. The proposed mechanisms of the benzylaminolyses of N-methyl-Y-${\alpha}$-bromoacetanilides are a concerted mechanism with a five membered ring TS involving hydrogen bonding between hydrogen (deuterium) atom in N-H(D) and oxygen atom in C = O for Y = electron-donating, while a concerted mechanism with an enolate-like TS in which the nucleophile attacks the ${\alpha}$-carbon for Y = electronwithdrawing substituents.
The present study was conducted to investigate the influence of embryo cell stage at 18h post-fusion and oocyte preactivation on sebsequent in vitro developmental potential in the nuclear transplant rabbit embryos. The embryos of 16-cell stage were collected and synchronized to G$_1$ phase of 32-cell stage. The recipient cytoplasms were obtained by removing the first polar body and chromosome rnass from the oocytes collected by non-dis-ruptive microsurgery procedure. The separated G$_1$ phase blastomeres of 32-cell stage were injected into non-preactivated recipient cytoplasms. Otherwise, the enucleated recipient cytoplasms were preactivated by electrical stimulation at 18h post-hCG injection and the separated G$_1$ phase blastomeres of 32-cell stage were injected. Mter culture until 20h post-hOG injection, the nuclear transplant oocytes were electrofused by electrical stimulation. The fused nuclear transplant embryos were classified into 3~4-cell, 2-cell and 1-cell stage at 18 hrs post-fusion and cultured until the embryos reached blastocyst stage. The developmental rate to blastocyst stage was significantly (P <0.05) higher in all the reconstituted embryos of 3~4-cell stage(58.0%) than in 2 and icell stage. The developmental rate to blastocyst stage in the embryos of 3~4-cell stage at 18 hrs post-fusion was significantly (P<0.05) higher in the reconstituted without oocyte preactivation(77.8%) than in the oocyte-preactivated embryos (33.3%). These results indicated that the higher rate of in the in vitro development to blastocyst stage might be obtained form the embryos which were reconstituted with nuclear donor of G$_1$ phase and non-preactivated oocyte, and developed more rapidly for 18 hrs post-fusion.
본 연구에서는 각종 구조물 철거 시 발생하는 폐콘크리트를 파쇄 처리하여 생산된 순환골재의 크기를 세 종류(10-13mm, 13-20mm, 20-25mm)로 나눈 다음, 순환골재의 pH 저감방법과 순환골재 처리방법에 따른 파쇄값을 실험 분석하였다. 순환골재 침출수의 pH는 골재 크기에 관계없이 약 11 정도로 일정하였으며, 이를 1000ml 증류수에 넣고 pH가 약 5 정도인 커피박을 10, 30, 또는 50g 혼합하여 시간에 따른 pH 변화를 측정하였다. 커피박을 50g 넣은 경우 24시간 후 pH가 최대 6.2까지 떨어지는 결과를 얻었다. 또한 마이크로웨이브(microwave)를 쪼여 가열하는 방법이나, pH가 2인 식초에 순환골재를 1일 침지시켜 중성화시키는 화학적인 방법을 이용하여 순환골재의 파쇄값을 비교 분석하였다. 무처리한 경우보다 마이크로웨이브를 쪼인 경우 평균 3.3% 정도 파쇄값이 증가하였으며, 중성화시키는 방법은 6.2% 정도 파쇄값이 증가하여 상대적으로 파쇄효과가 더 높았다. 순환골재 파쇄시험에서 표준 시료 높이 100mm 보다 높은 120mm로 시험한 경우 파쇄값이 6.3% 증가하였으며, 400kN을 연속으로 재하하는 경우보다 100kN씩 4단계로 재하한 경우 파쇄값이 7.1% 더 증가하였다.
This study evaluated the influence of cell stage of donor nucleus on nuclear injection, electrofusion and in vitro development in the rabbit to improve the efficiency of nuclear transplantation in the rabbit. The embryos of 8-, 16- and 32-cell stage were collected from the mated does by flushing viducts with Dulbecco's phosphate buffered saline(D-PBS) containing 10% fetal calf serum(FGS) at 44, 54 and 60 hours after hCG injection. The blastorneres separated from these embryos were used as donor nucleus. The ovulated oocytes collected at 14 hours after hCG injection were used as recipient cytoplasm following removing the nucleus and the first polar body. The separated blastomeres were injected into the enucleated oocytes by micromanipulation and were electrofused in 0.28 M mannitol solution at 1.5 kV /cm, 60 $\mu$sec for three times. The fused oocytes were cocultured with a monolayer of rabbit oviductal epithelial cells in M-199 solution containing 10% FGS for 72~120 hours at 39$^{\circ}C$ in a 5% $CO_2$ incubator. The cultured nuclear transplant embryos were stained with Hoechst 33342 solution and the number of cells were counted by fluorescence microscopy. The successful injection rate of 8-, 16- and 32-cell-stageblastomeres into enucleated oocytes was 86.7, 91.0 and 93.9%, respectively. The electrofusion rate of 8-, 16- and 32-cell-stage blastomeres with enucleated oocytes was 93.3,89.3 and 79.0%, respectively. Development of blastomeres to blastocyst was similar with 8-,16- and 32-cell-stage donor nuclei(26.2, 25.8 and 26.6%, respectively, P<0.05). The mean number of cell cycle per day during in vitro culture in nuclear transplant embryos which received 8-, 16- and 32-cell- stage nuclei was 1.87, 1.81 and 1.43, respectively.
Flow-Accelerated Corrosion Behavior of SA106 Gr.C steel in room temperature alkaline solution simulating the CANDU primary water condition was studied using Rotating Cylinder Electrode. Systems of RCE were set up and electrochemical parameters were applied at various rotating speeds. Corrosion current density decreased up to pH 10.4 then it increased rapidly at higher pH. This is due to the increasing tendency of cathodic and anodic exchange half-cell current. Corrosion potential shifted slightly upward with rotating velocity. Passive film was formed from pH 9.8 by the mechanism of step oxidation and the subsequent precipitation of ferrous species into hydroxyl compound. Above pH 10.4, the film formation process was active and the film became stable. Corrosion current density showed increment in pH 6.98 with the rotating velocity, while it soon saturated from 1000 rpm above pH 9.8. This seems that activation process which represents formation of passive film on the bare metal surface controls the entire corrosion process
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[게시일 2004년 10월 1일]
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