• 제목/요약/키워드: 2-gel-electrophoresis

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Gel filtration chromatography와 propionic acid/urea polyacrylamide gel electrophoresis를 이용한 봉독 성분의 분리 (Purification of Peptide Components including Melittin from Bee Venom using gel filtration chromatography and propionic acid/urea polyacrylamide gel electrophoresis)

  • 최영권;최석호;권기록
    • 대한약침학회지
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    • 제9권2호
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    • pp.105-111
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    • 2006
  • Objectives : This study was conducted to carry out Purification of Melittin and other peptide components from Bee Venom using gel filtration chromatography and propionic acid/urea polyacrylamide gel electrophoresis Methods : Melittin and other peptide components were separated from bee venom by using gel filtration chromatography on Sephadex G-50 column in 0.05M ammonium acetate buffer. Results : Melittin and other peptide components were separated from bee venom by using gel filtration chromatography on Sephadex G-50 column in 0.05M ammonium acetate buffer. The fractions obtained from gel filtration chromatography was analyzed by using SDS-PAGE and propionic acid/urea polyacrylamide gel electrophoresis. The melittin obtained from the gel filtration contained residual amount of phospholipase $A_2$ and a protein with molecular weight of 6,000. The contaminating proteins were removed by the second gel filtration chromatography. Conclusion : Gel filtration chromatography and propionic acid/urea polyacrylamide gel electrophoresis are useful to separate peptide components including melittin from bee venom.

역전장 전기영동장치를 이용한 대형 DNA 분리에 관한 연구 (Separation of large DNA molecules by pulsed field gel electrophoresis)

  • 주이석;;윤용덕
    • 대한수의학회지
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    • 제33권1호
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    • pp.81-85
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    • 1993
  • Gel electrophoresis has proven to be one of the most useful of DNA separation and purification. The new technique of pulsed field gel electrophoresis (PFGE) is high resolution separation of large size DNA moleculs. Conventional continuous gel electrophresis can not be separation of large DNA fragments(20~50 k base). Field inversion gel electrophoresis(FIGE) is very useful for large DNA molecules. We have found that a pulse ratio ; 2 : 1, time ; 24hrs., volts ; $10^{volts}/_{cm}$, start ; 0.45sec, end ; 1sec, is most effectively resolves DNA fragment in the 6~50k base.

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보리품종 구분에 적합한 전기영동법과 효소 (Appropriate Electrophoresis Techniques and Isozymes to Identification of Barley Cultivars)

  • 손응룡;이용세;윤경은;하용웅
    • 한국작물학회지
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    • 제30권4호
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    • pp.405-411
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    • 1985
  • 본 실험은 보리품종의 구분에 가장 적합한 전기영동법과 효소를 구명하고자 6개 보리품종(알찬보리, 수원 216호, 조풍보리, 사천 6호, 향맥, 히노데하다가)의 종실 단백질을 7.5% polyacrylamide slab gel, 2-30% polyacrylamide porosity gradient tube gel, isoelectricfocusing(pH 4-9)과 starch gel을 사용 전기영동 후 protein band pattern과 esterase, acid phosphatase, malate dehydrogenase, glutamate dehydrogenase 및 leucine aminopeptidase의 동위효소 pattern을 관찰하였던 결과는 다음과 같았다. 1. 7.5% polyacrylamide slab gel에서 단백질 pattern과 2-30% polyacrylamide porosity gradient tube gel에서의 단백질과 esterase의 band pattern이 품종간 뚜렷한 차이를 보여 보리품종구분에 가장 적합하였다. 2. Acid phosphatase, malate dehydrogenase, glutamate dehydrogenase 및 leucine aminopeptidase 등의 동위효소 pattern은 모든 실험한 품종이 동일한 형태를 보여 품종구분에 이용하기에는 적합하지 않았다.

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소의 갑상선에 있는 크산친 옥시다아제에 관한연구 [제2보] 효소의 조성과 특성- (Studies on Xanthine Oxidase from Bovine Thyroid Glands -[Part 2] Composition and Some Properties-)

  • 이효사
    • Applied Biological Chemistry
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    • 제21권3호
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    • pp.137-143
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    • 1978
  • 소의 갑상선에 있는 xanthine oxidase 효소도 flavin adenine dinucleotide(FAD), 모리브덴 및 철을 cofactor로서 가지고 있었으며 그 비율은 1 : 0.36 : 1.6이었다 갑상선 xanthine oxidase의 분자량은 gel filtration과 gel electrophoresis방법으로 측정하였을 때 우유에서 추출한 xanthine oxidase의 분자량과 큰 차이가 없었다. 그 효소의 활성도는 pH7.8에서 가장 높았고 isoelectric point는 electrofocusing으로 측정하였을 때 pH 6.2 였다. SDS-polyacrylamide gel electrophoresis 실험 결과는 소의 갑상선에서 추출된 xanthine oxidase가 세개의 subunit로 분해되었음을 지적했고, 최소 단위분자량 65,000정도의 polypeptide 4개로서 완전한 xanthine oxidase 한 분자를 구성하고 있을 가능성을 보였다. 갑상선 호소의 absorption spectrum을 우유에서 추출된 효소와 비교하였을 때 상당한 상이점을 나타내었다.

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Electrophoretic Analysis of Haemolymph Proteins during Silkworm (Bombyx mori L.) Ontogenesis

  • Staykova, Teodora
    • International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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    • 제14권1호
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    • pp.37-44
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    • 2007
  • A study was made of the haemolymph protein spectrum of mulberry silkworm (Bomhyx mori L.) from the first larval instar to imago. Horizontal starch gel electrophoresis was used. Sixteen races and eight F1 interracial hybrids, raised in Bulgaria, were analyzed. During the ontogenesis, a total of 17 protein bands (15 cathodic and 2 anodic) were detected. Distinct dynamics in the haemolymph protein spectrum was observed, in result of different expression during the individual development associated with the processes of growth, histolysis and histogenesis. Based on the ontogenetic dynamics found, a correspondence was assumed between some proteins detected by us using the starch gel electrophoresis and major haemolymph proteins (SP1, SP2, MHPs and Vg) detected by other authors using the polyacrilamide gel electrophoresis. Intraracial and interracial polymorphism was observed in four protein zones. The effect of four polymorphic loci with codominant and null alleles was suggested.

소의 갑상선에 있는 크산친 옥시다아제에 관한 연구 -[제1보] 효소의 정제와 기질특이성- (Studies on Xanthine Oxidase from Bovine Thyroid Glands -[Part 1] Purification and Substrate Specificity-)

  • 이효사
    • Applied Biological Chemistry
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    • 제21권2호
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    • pp.112-118
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    • 1978
  • 소의 갑상선에서 추출한 Xanthine oxidase를 disc gel eleectrophoresis로서 정제도(Purity)를 측정하여 Xanthine oxidase 이외의 다른 불순 단백질이 나타나지 않을 때까지 정제하였다. 그 정제 과정은 Pancreatin digestion, butanol 추출, ammonium sulfate 단백질 침전, calcium phosphate gel-cellulose column chromatography, gel filtration, preparative Sephadex G-25 column electrophoresis와 Preparative polyacrylamide gel electrophoresis 등을 포함하고 있다. 이러한 과정을 통하여 갑상선 Xanthine oxidase는 1,000배 정도 정제되었다. 그러나 효소의 비활성도(Specific activity)는 우유에서 추출한 이 효소에 상응하는 정도로 정제된 효소의 비활성도와 비교 되었을 때 지극히 낮았다. 갑상선 Xanthine oxidase도 효소 반응에 필요한 기질과 electron acceptor의 특수성(Specificity)이 어느 특수한 한 기질에 한정되지 않았음을 보였고 Kinetic 성질도 우유에서 추출된 Xanthine oxidase와 비교하였을 때 가장 일반적인 Xanthine oxidase 기질에 대한 Michaelis 상수(Km)가 약간의 예외도 있었으나 상당히 비슷하였다.

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전기영동법 (SDS-PAGE, PAGIF)에 의한 잔디 분류에 관한 연구 (Studies on the Identification of Turfgrass by Electrophoresis (SDS-PAGE, PAGIF))

  • 박재복;김영후;이수영
    • 아시안잔디학회지
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    • 제5권1호
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    • pp.11-22
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    • 1991
  • This experiment was executed to investigate the possibility of the application of taxonomic method through the isoelectric focusing with polyacrylamide gel and sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis with seeds in the identification of turfgrasses. The sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis was used to investigate the pattern of seed proteins which were extracted from 18 cultivars of cool season turfgrass and 4 cultivars of warm season turfgrass. The isoelectric focusing with polyacrylarnide gel was used to investigate the activity of the three isozymes of esterase, peroxidase and phosphoglucose isomerase which were extracted from 18 cultivars of cool season turfgrass and 4 cultivars of warm season turfgrass. The results were summarized as follows. 1. The difference of the patterns of seed proteins was observed with sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis. The identification of intra-genus was easily detected. 2. The three isozymes of esterase, peroxidase and phosphoglucose isomerase were investigated through isoelectric focusing with polyacrylamide gel. As a result, esterase was most effective among three isozymes in the identification of turfgrass cultivars 3. In the past cultivar identification was primarily based on visual morphological characters, but there was a lot of difficulty. If we should use electrophoresis, we will be able to identifvturfgrass cultivars more effectively.

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한국인삼의 연근별 단백질 및 아미노산 조성 (Proteins and Amino Acid Composition of Korea Ginseng Classified by Years)

  • 최청;윤상홍;배만종;안봉전
    • 한국식품과학회지
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    • 제17권1호
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    • pp.1-4
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    • 1985
  • 연근별로 인삼 단백질의 생화학적 특성을 체계적으로 규명하기 위하여 polyacrylamide gel 전기영동, SDS-PAGE, gel filteration 및 아미노산 자동분석기에 의한 실험결과는 다음과 같다. 인삼의 수용성 단백질을 Sephadex G-200으로 분획하여 얻은 2개의 peak 중주 단백질은 SDS-polyacrylamide gel 전기영동에 의해 분자량은 43,000으로 추정되었다. Polyacrylamide gel 전기영동 및 SDS-PAGE에 의한 band의 수는 연근에 따라 별 차이 없이 각각 8 및 $7{\sim}11$개 확인되었다. 인삼의 수용성 단백질과 그의 주 단백질을 아미노산 분석한 결과 arginine이 각각 45.17과 57.36%로 최대의 함량을 나타내었고 methionine과 cystine의 함량은 매우 낮았다.

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Starch gel 전기영동법에 의한 한국산 초파리의 alcohol dehydrogenase (ADH)에 관한 연구 (A Study of Alcohol Dehydrogenase of Drosophila melanogaster in Korea by Starch Gel Electrophoresis)

  • Chung, Yong-Jai
    • 한국동물학회지
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    • 제16권1호
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    • pp.67-77
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    • 1973
  • 한국산 초파리(Drosophila melanogaster)의 starch gel 영동상을 조사하기 위하여 춘천, 진주, 신촌(서울), 대전의 초파리 4계통을 starch gel media를 사용하여 벤드의 분포, 염색강도 및 이동도를 비교 검토한 결과는 다음과 같다. 1) 춘천, 진주, 신촌(서울)의 3계통은 벤드의 수와 분포, 염색강도, 이동도가 다 같이 심한 변이를 나타내고 있는데 반하여 대전계통은 변이가 거의 없다. 2) 이러한 전기영동상의 차이는 대전 계통의 초파리 집단이 ADH구성에 관하여 동질적(homogeneous)이고 다른 3계통의 집단은 이질적(heterogeneous)이라는 것을 암시하고 있다. 3) 전기영동상이 4계통의 초파리에서 다 같이 암$\\cdot$수에 따라 차이를 보이고 있는데 이것은 설명하기 매우 어려운 문제로서 장차 분석 검토할 필요가 있다고 본다. 4) Starch gel media가 cellulose acetate media보다 해상력이 월등하다는 것이 재확인 되고 있다. 5) Agar gel이나 acrylamide gel 같은 다른 영동 media를 써서 ADH의 전기영동 실험을 하여 starch gel media를 사용한 본 실험의 결과와 비교하는 것과 ADH에 관한 유전적 분석이 시급히 요구되는 앞으로의 과제이다.

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