• 한국자원식물학회지
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• 제27권5호
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• pp.401-414
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• 2014

기존의 HPLC 분석법에 활성을 접목시킨 실시간 분석법을 활용한 새로운 표준화 방법을 시도하였다. 항산화, 항염증, 항암작용을 포함한 다양한 생리 활성을 가지고 있는 한약재인 감초를 대상으로 산지가 다른 아홉 종류의 감초 추출물을 시료로 하여 분석을 실시한 결과 영주산 감초에서 라디칼 소거능이 가장 우수하게 나타났으며 실시간 활성 측정법에 의해 세 개의 활성 peak가 확인되었다. 이를 대상으로 크로마토그래피를 실시하여 세 개의 활성 피크의 물질을 각각 dehydroglyasperin C, dehydroglyasperin D, isoangustone A로 동정하였으며 감초의 항산화 지표 성분으로 설정하였다. 실시간 활성 분석법에 대한 validation을 수행한 결과 다른 물질과의 간섭이 없는 특이성, 상관계수 0.99~1.00의 직선성, 일내와 일간 정밀도의 RSD 값이 2% 이내의 정밀성 갖으며, 회수율 98~100%의 정확성을 보여 이 분석방법에 대한 신뢰도와 재현성이 검증되었다. 특히, 실시간 활성측정법은 활성 물질의 정성 및 정량분석을 동시에 측정할 수 있어 빠른 시간내 효과적으로 시료를 비교 분석할 수 있는 장점을 가지고 있다. 결과적으로 ABTS를 이용한 라디칼 소거능을 접목시킨 실시간 활성 분석법은 활성을 기반으로 한 천연물 소재의 표준화 연구 접근법 중의 하나로 유용하게 사용될 것으로 기대된다.

• Macromolecular Research
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• 제14권3호
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• pp.287-299
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• 2006

To successively synthesize star-branched polymers, we developed a new iterative methodology which involves only two sets of the reactions in each iterative process: (a) an addition reaction of DPE or DPE-functionalized polymer to a living anionic polymer, and (b) an in-situ reaction of 1-(4-(4-bromobutyl)phenyl)-1-phenylethylene with the generated 1,1-diphenylalkyl anion to introduce one DPE functionality. With this methodology, 3-, 4-, and 5-arm, regular star-branched polystyrenes, as well as 3-arm ABC, 4-arm ABCD, and a new 5-arm ABCDE, asymmetric star-branched polymers, were successively synthesized. The A, B, C, D, and E arm segments were poly(4-trimethylsilylstyrene), poly(4-methoxystyrene), poly(4-methylstyrene), polystyrene, and poly(4-tert-butyldimethylsilyloxystyrene), respectively. All of the resulting star-branched polymers were well-defined in architecture and precisely controlled in chain length, as confirmed by SEC, $^1H$ NMR, VPO, and SLS analyses. Furthermore, we extended the iterative methodology by the use of a new functionalized DPE derivative, 1-(3-chloromethylphenyl)-1-((3-(1-phonyletheny1)phenyl) ethylene, capable of introducing two DPE functionalities via one DPE anion reaction site in the reaction (b). The number of arm segments of the star-branched polymer synthesized by the methodology could be dramatically increased to 2, 6, and up to 14 by repeating the iterative process.

• Investigative Magnetic Resonance Imaging
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• 제12권2호
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• pp.100-106
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• 2008

본 연구는 in vivo 보다 더욱 정확하게 뇌 대사물질을 정량 분석하고자 고자장 NMR 장비 (500MHz; 11.74T)를 이용하여 동물의 뇌를 in vitro 환경에서 조사 및 분석하였다. 일반적으로 in vivo 실험은 생체 내부의 혈류나 조직의 비균질성으로 인한 자기공명분광법의 shimming에 악영향을 미치기 때문에 부정확한 결과를 산출할 수 있다. 그러나, in vitro 실험은 이에 비하여 균질한 샘플을 사용하고 보다 고자장에서 실험환경을 조성할 수 있기 때문에 더욱 정확한 대사물질의 정보를 얻을 수 있다. 본 연구에서는 개 (canine)의 소뇌 (cerebellum)조직으로부터 대사물질을 추출하고 고자장 핵자기공명분광법으로 대사물질의 절대농도를 획득 하고자 하였다. 생체 대사물질의 절대농도를 획득하기 위하여 대표적인 대사물질(i.e., NAA, Cr, Cho, Ins, Lac, GABA, Glu, Gln, Tau Ala)의 팬톰을 제작하여 그 스펙트럼을 확보하였고, 개의 소뇌 부위를 적출하여 methanol-chloroform water extraction (M/C water extraction) 방법으로 대사물질만을 추출한 후 자기공명분광법을 수행하였다. 필터링 (filtering)의 효과를 평가하기 위하여 샘플 제작 시 추출물을 필터링한 그룹과 필터링하지 않은 그룹으로 분류하여 실험을 수행하였다. 팬텀 물질과 추출물은 90% D2O 수용액으로 만든 후 5mm NMR 튜브에 담아 실험하였다. 실험 결과 조직 추출물을 필터링하는 것이 신호대잡음비(signal to noise ratio: SNR, S/N)를 향상시키는 데 기여하는 것을 확인하였다. 또한 개의 소뇌 대사물질의 절대농도는 사람보다는 쥐 (rat)의 뇌 대사물질 절대농도와 더 비슷한 것을 확인할 수 있었다. 본 연구 결과를 토대로 고자장 핵자기공명분광법을 이용한 in vitro 실험은 뇌조직 내 대사물질의 절대농도를 측정하고 기본적인 지표를 확보하는데 매우 정확하고 정량적인 방법이 될 수 있을 것으로 사료된다.

• 한국연초학회:학술대회논문집
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• 한국연초학회 1997년도 담배과학 국제학술대회
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• pp.134-152
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• 1997

담배 모자이크 바이러스(TMV)와 감자 바이러스 Y(PVY) 등 식물바이러스병은 잎담배 생산에 심한 경제적 손실을 초래하고 있다. 바이러스병 방제를 위한 여러 가지 경종적 방법은 충분한-방제 효과를 얻지 못하는 경우가 많아 바이러스의 방제에는 우수한 저항성 품종의 사용이 가장 바람직한 것으로 알려져 있다. 그러나 기존의 육종 방법이 저항성 품종 개발에 항상 바람직한 것은 아닌데 그 이유는 저항성 유전자원이 없는 경우가 많고 또한 육종을 통해 유전자원의 열등한 특성이 도입될 수 있기 때문이다. 따라서 본 연구실에서는 TMV와 PVY의 여러 가지 형태의 외피단백질(CP) (비전사부분 포함 또는 제거, 비 전사부분 등) 및 복제유전자(Nlb) (3' 및 5' 결손 유무, 돌연변이)를 상용 담배 품종인 NC 82와 Burley 21에 형질전환시켜 바이러스 저항성 개발을 시도하였다. 각각의 유전자 cDNA를 1-2개의 35S promotor를 가진 식물발현벡타에 클로닝한 후 Agrobacteriupn (upnefaciens LBA 4404를 이용하여 식물의 잎조직에 도입시킨 후 kanamycin 함유 MS 배지에서 식물체를 재닥화하였다. 재분화 식물체는 TMV와 PVY에 대한 저항성 검정을 하였다. 그 결과 TMV에 저항성인 TMV CP 형질전환 식물체와 8 가지 Nlb 형질전환 식물체 계통 중에 6 계통의 저항성 형질전환 식물체를 획득하였다. 여기에서는 TMV와 PVY의 접종시험을 통하여 각각의 바이러스에 대한 형질전환 담배의 계통별 저항성 정도를 조사하고, 저항성 형질전환 식물체에서의 도입 유전자 확인하며, 세대별 저항성의 유전 및 안정성을 살펴보고자 한다. 또한 유망 저항성 형질전환 계통의 식물체 내에서의 바이러스 증식 및 이동과 관련된 저항성 기작, 여러 가지 PVY 계통에 대한 저항성 유무, 수량, 생육 특성 및 주요 화학 성분 함량 등을 발표하고자 한다.-glucose로 구성된 다당류 이었다. 아미노산은 Asp 및 Glu의 산성 아미노산과 Ala, Leu 등의 함량이 높게 나타났으며, 비알칼리 추출물에서 Ser과 Thr의 함량이 높게 나타났다. 다당류 T-AS는 평균 분자량이 2,000 kD와 12kD에서 주 peak를 나타냈으며, 수용성 분획의 평균 분자량은 12kD이고 비수용성 분획은 36~2,000 kD의 평균 분자량 분포를 갖는 것으로 나타났다. IR과 NMR 분석 결과 890 cm-1에서 흡수 peak를 나타내어 $\beta$-(1,3)0glucan과 $\beta$-(1,6)-glucan의 구조를 갖는 다당류로 확인 되었다. T-AS 분획은 C:H:O:N의 함량비가 38.9:5.7:49.6:1.84%이며, 이 물질의 융점은 163 $^{\circ}C$로 연한 갈색을 나타낸다. 분리된 GLG의 항암활성 기전 규명을 위해, in vivo 항암실험, 항보체 활성능, 항체 생성능, serum protein 분비능, 대식세포의 탐식능과 활성능 및 세포간 물질 분비 등의 상관관계를 조사하였다. 다당류 GLG 분획물들 가운데 항보체의 활성이 높았던 분획은 sarcome 180에 대한 항암 활성이 높게 나타났다. 다당류 T-AS의 보체 활성화 기작은 classical과 alternative complement pathway의 양 경로를 통해 활성화 되었다. T-AS 분획은 mouse내의 특정 혈청단백을 증가시켰으며, 항체 생성능의 증가가 관찰되어 effect T 세포의 활성화가 나타나고 있음을 알 수 있었다. T-AS는 생체내 투여시에 대식세포의 탐식능이 증진되었으며, 대식세포 기능 저해제에 의한 대식세포의 기능 저해 현상이 회복되었다. 이와 같은 결과들로부터, T-AS의 항암 활성은 활성화된 보체 성분 및 당 수용체들이 존재하는 대식세포의 개입을 시사한다.가능성과

• 한국자기공명학회논문지
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• 제10권1호
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• pp.105-114
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• 2006

Purpose: We achieved high resolution MR imaging and spectra of human skin in vitro with using a 14.1 T MRI/MRS system, and evaluated the hydration effect of various cosmetic products by measuring the skin's. moisture concentration. Materials and Methods: We used the Bruker 14.1 T MRI/MRS system with a vertical standard bore that was equipped with a DMX spectrometer gradient system (200 G/cm at a maximum 40 A), RF resonators (2, 5 and 10 mm) and Para Vision software. Spin echo and fast spin echo pulse sequences were employed for obtaining the high resolution MR images. The 3D-localized point resolved spectroscopy (PRESS) method was used to acquire the MR spectra. Results: The high resolution MR images and spectra of human skin in vitro were successfully obtained on a 14.1 T system. The water concentration of human skin after applying a moisturizer was higher than that before applying a moisturizer. Conclusions: The present study demonstrated that the high-resolution MR images and spectra of human skin from a high field NMR instrument could be applicable to evaluating the hydration state of the stratum corneum.

• Journal of Applied Biological Chemistry
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• 제58권2호
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• pp.109-112
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• 2015

Fruits of Rhus parviflora were extracted with 80% aqueous methanol (MeOH), and the concentrated extract was partitioned using ethyl acetate (EtOAc), n-butanol (n-BuOH), and $H_2O$, successively. Purification of EtOAc fraction led to isolation of fifteen polyphenols of which structures were identified by spectroscopic methods including 2D-NMR. Most compounds apart from compound 10 inhibited low density lipoproteinoxidation within $IC_{50}$ value of $10{\mu}M$. Among compounds, taxifolin (2), quercetin 3-O-${\alpha}$-L-rhamnopyranoside (13), agathisflavone (5) sulfuretin (4), and aureusidin (3) showed $IC_{50}$ values 0.9, 0.8, 5.8, 2.9, and $2.4{\mu}M$ which were of highly significant in comparison positive control butylated hydroxytoluene with $IC_{50}$ value of $2.1{\mu}M$. The results indicate fruits of R. parviflora as a source of antihypercholesterolemic compounds.

• Journal of Ginseng Research
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• 제44권3호
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• pp.405-412
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• 2020

Background: Root rot is a serious destructive disease of Panax notoginseng, a famous cultivated araliaceous herb called Sanqi or Tianqi in Southwest China. Methods: The chemical substances of Sanqi rot roots were explored by chromatographic techniques. MS, 1D/2D-NMR, and single crystal X-ray diffraction were applied to determine the structures. Murine macrophage RAW264.7 and five human cancer cell lines were used separately for evaluating the antiinflammatory and cytotoxic activities. Results and Conclusion: Thirty dammarane-type triterpenes and saponins were isolated from the rot roots of P. notoginseng. Among them, seven triterpenes, namely, 20(S)-dammar-25-ene-24(S)-hydroperoxyl-3β,6α,12β,20-tetrol (1), 20(S)-dammar-3-oxo-23-ene-25-hydroperoxyl-6α,12β,20-triol (2), 20(S)-dammar-12-oxo-23-ene-25-hydroperoxyl-3β,6α,20-triol (3), 20(S)-dammar-3-oxo-23-ene-25-hydroperoxyl-12β,20-diol (4), 20(S),24(R)-epoxy-3,4-seco-dammar-25-hydroxy-12-one-3-oic acid (5), 20(S),24(R)-epoxy-3,4-seco-dammar-25-hydroxy-12-one-3-oic acid methyl ester (6), and 6α-hydroxy-22,23,24,25,26,27-hexanordammar-3,12,20-trione (7), are new compounds. In addition, 12 known ones (12-16 and 19-25) were reported in Sanqi for the first time. The new Compound 1 showed comparable antiinflammatory activity on inhibition of NO production to the positive control, whereas the known compounds 9, 12, 13, and 16 displayed moderate cytotoxicities against five human cancer cell lines. The results will provide scientific basis for understanding the chemical constituents of Sanqi rot roots and new candidates for searching antiinflammatory and antitumor agents.

• 폴리머
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• 제35권4호
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• pp.350-355
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• 2011

고분자의 주사슬에 광반응을 할 수 있는 phenyldiacryloyl 그룹을 가지고, 곁사슬에 액정분자와 비슷한 메조겐인 biphenyl을 에테르 결합을 통해서 도입된 가용성 광반응성 폴리아미드를 합성하였다. 합성된 폴리아미드 고분자는 0.65 dL/g의 대수점도를 가지며, 일반적인 코팅 방법으로 여러 기질의 표면에 잘 도포되는 성질을 보였다. 광반응성 폴리아미드 고분자의 화학 구조는 $^1H$ NMR과 Fourier transform infrared(FTIR) spectroscopy를 이용해서 확인하였다. 합성된 고분자의 유리전이온도는 $150^{\circ}C$까지 관측되지 않았으며, 열분해 온도는 $280^{\circ}C$로 관측되어, 열안정성이 높음을 확인하였다. 합성된 폴리아미드 고분자 박막을 비편광된 자외선을 노광시켜 노광하는 에너지에 따른 변화를 조사했을 때, 좋은 광반응성을 보였다. 광반응성 폴리아미드를 이용하여 선편광된 자외선을 노광하여 제작한 액정 셀 내에서, 액정분자들은 노광된 선편광 자외선의 electric vector 방향의 수직으로 배향되는 것이 관측되었으며, 이러한 현상은 선편광 자외선의 노광량에는 무관함을 보였다. 액정 셀 내에서 액정분자들의 pretilt angle은 선편광된 자외선의 노광량에 따라 약간의 차이를 보이며 $0.2^{\circ}$에서 $0.5^{\circ}$사이의 값을 보였다.

• Investigative Magnetic Resonance Imaging
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• 제8권2호
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• pp.94-99
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• 2004

목적 : 인체의 심근 및 간조직의 생체내 $^{31}P$ MRS에서 NOE 효과에 의한 분광신호 세기의 증가를 평가하고자 하였으며 또한 동일 장기에서 대사물질에 따른 NOE 효과의 차이를 알아보고자 하였다. 대상 및 방법: 열명의 정상 성인군(남:여=8:2, 연령분포=24-32)을 대상으로 1.5T 자기공명영상/분광 장치에서 $^1H-^{31}P$ 이중 튜닝 표면 코일을 사용하여 생체내 $^{31}P$ MRS를 시행하였다. $^{31}P$ MRS 측정은 이차원 화학변위영상기법을 사용하였으며 동일한 파라미터에서 NOE 효과 없이 그리고 $^1H$ decoupling상태에서 NOE 효과에 의한 $^{31}P$ MRS 데이터를 획득하였다. $^{31}P$ MRS raw data의 postprocessing 후 얻어진 스펙트럼에서 주요 대사물질들의 신호증가를 비교하였다. 결과: 간조직의 $^{31}P$ HRS에서 NOE 효과에 의한 신호증가율은 $\alpha-ATP\;(7\%),\;\beta-ATP\;(9\%),\;\gamma-ATP\;(17\%),\;Pi\;(1\%),\;PDE\;(19\%),\;PME\;(31\%)$였다. 간조직의 경우 크리아틴 키나제가 없기 때문에 PCr 신호는 관찰되지 않았다. 심근의 $^{31}P$ MRS은 whole body 코일이 표면 코일보다 우수한 scout 영상을 제공하여 $^{31}P$ MRS의 localization에 유리하였다. $^{31}P$ 심근 다중 체적 스펙트럼에서 , 혈액의 DPG 신호는 심근으로부터 멀어질 수록 증가하는 양상을 나타내었고 NOE 효과에 의한 신호증가율은 $\alpha-ATP\;(12\%),\;\beta-ATP\;(19\%),\;\gamma-ATP\;(30\%),\;PCr\;(34\%),\;Pi\;(20\%),\;PDE\;(51\%),\;DPG\;(72\%)$ 였다. 결론: 간조직에 비해 심근의 경우 큰 신호증가를 보였고 이는 간조직 대사물질들의 $^{31}P$가 심근과는 다른 $^1H$ coupling을 나타냄을 의미한다고 해석할 수 있다.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제14권5호
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• pp.985-990
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• 2004

Levans produced from Microbacterium laevaniformans were isolated, characterized, and fractionated by molecular weight. TLC, HPLC, and GC-MS analyses of the exopolysaccharide showed that it was a fructan-type polymer and was composed of (2,6)- and (2,1)-glycosidic linkages. $^{13}C$-NMR analysis proved that the polysaccharide was mainly a $\beta$-(2,6)-linked levan-type polysaccharide. To investigate the cytotoxicity of the acetone-precipitated levan fractions such as M1, M2, and M3, HepG2, P388D1, U937, SNU-1, and SNUC2A cell lines were screened. Among the cell lines tested, the cytotoxicity of M1- M3 fractions were detected from only SNU-1 and HepG2 cells at the dosage level of $100-800\mu\textrm{g}ml$. The M2 fraction M_r$, 80,000) at 400 $mu{g/ml}$ had the greatest cell growth inhibition (84.6%) on SNU-1, while the M1 $(M_r$, 50,000) at $800\mu\textrm{g}ml$ showed the greatest (46.32%) on HepG2. To obtain more uniform M_r$ fractions of levan, the levan was further fractionated from S1 $(M_r$ 1,000,000) to S5 $(M_r$ 10,000) using gel permeation chromatography. Again, the S1-S5 fractions had strong cytotoxicity on SNU-1 and HepG2 cell lines. The greatest inhibition effects of S4 $(M_r$ 80,000) on SNU-1 and S5 $(M_r$ 10,000) on HepG2 were shown to be 49.5% and 73.0%, respectively. The cytotoxicity of the levan fractions was more effective on SNU-1 than on HepG2. Although the relationship between the Mw and the cytotoxicity was not clear, smaller $M_r$, fractions of levan showed greater growth inhibition effect on the cancer cell lines in general. Therefore, it was indicated that a specific Mw class of levan is responsible for the effective cytotoxicity.