Guizhi Meng;Hongjuan Duan;Jingying Jia;Baobao Liu;Yun Ma;Xiaoyan Cai
Animal Bioscience
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v.37
no.3
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pp.509-521
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2024
Objective: It was shown that microRNAs (miRNAs) play an important role in milk protein synthesis. However, the post-transcriptional regulation of casein expression by exogenous miRNA (xeno-miRNAs) in ruminants remains unclear. This study explores the regulatory roles of alfalfa xeno-miR162 on casein synthesis in bovine mammary epithelial cells (bMECs). Methods: The effects of alfalfa xenomiR-162 and G protein subunit gamma 11 (GNG11) on proliferation and milk protein metabolism of bMECs were detected by 5-Ethynyl-2'-Deoxyuridine (EdU) staining, flow cytometry, cell counting kit-8 (CCK-8), enzyme-linked immunosorbent assay, quantitative real-time polymerase chain reaction (qRT-PCR), and Western blot. Dual-luciferase reporter assay was used to verify the targeting relationship between GNG11 and xenomiR-162. Results: Results showed that over-expression of xenomiR-162 inhibited cell proliferation but promoted apoptosis, which also up-regulated the expression of several casein coding genes, including CSN1S1, CSN1S2, and CSN3, while decreasing the expression of CSN2. Furthermore, the targeting relationship between GNG11 and xenomiR-162 was determined, and it was confirmed that GNG11 silencing also inhibited cell proliferation but promoted apoptosis and reduced the expression of casein coding genes and genes related to the mammalian target of rapamycin (mTOR) pathway. Conclusion: Alfalfa xenomiR-162 appears to regulate bMECs proliferation and milk protein synthesis via GNG11 in the mTOR pathway, suggesting that this xeno-miRNA could be harnessed to modulate CSN3 expression in dairy cows, and increase κ-casein contents in milk.
A universal set of genes encodes the components of dissociated. type II. fa11y acid synthase system that is responsible for producing the multitude of fa11y acid structures found in bacterial membranes. We examined the biochemical basis for the production of fatty acids by bacteria. Several genes from HaemophHus influenzae Rd and three genes from Enterococcus faecalis V583 were predicted to encode homologs of the ${\beta}$-ketoacyl-acyl carrier protein synthases I or II or III of Escherichia coli(FabB or BabF, or FabH)were identified in the genomic database. The protein products were expressed. purified, and biochemically characterized. efFabH and hF abH carried out the initial condensation reaction of fatty acid biosynthesis with acetyl-Coenzyme A as a primer. and hFabB and efFabF1 carried out the elongation condensation reaction of fatty acid biosynthesis with myrixtoyl-ACP.
Spirulina is known to be more useful abroad than in Korea because it contains more protein than Chlorella, the same microalgae. In the past, sources of animal protein were diverse, but since it takes a long time to receive protein along with environmental pollution, we thought that spirulina could attract attention as a new protein source. In this study, application cases were analyzed in foods in the fields of acorn cake, tofu, dumpling skin, fish cake, white bread, pound cake, salad dressing, and yogurt and so on. As a result of centrally analyzing antioxidant and sensory evaluation, it was confirmed that the results were effective enough to develop products in tofu, dumpling skin, fish cake, and pound cake. It is thought that development of food in other fields will be possible if an additive amount that can match the consumer's preference is found by supplementing the mixing ratio. If it is used as a main raw material for existing food rather than as a raw material for health functional food, consumer preference can increase and quality can be further improved, and it can be suggested as a good alternative for an aging society.
To study the differentiated expression of the proto-oncogene Pokemon in nasopharyngeal carcinoma (NPC) cell lines and tissues, mRNA and protein expression levels of CNE1, CNE2, CNE3 and C666-1 were detected separately by reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR), real-time PCR and Western-blotting. The immortalized nasopharyngeal epithelial cell line NP69 was used as a control. The Pokemon protein expression level in biopsy specimens from chronic rhinitis patients and undifferentiated non keratinizing NPC patients was determined by Western-blotting and arranged from high to low: C666-1>CNE1>CNE2> CNE3>NP69. The Pokemon mRNA expression level was also arranged from high to low: CNE1>CNE2>NP69>C666-1>CNE3. Pokemon expression of NP69 and C666-1 obviously varied from mRNA to protein. The Pokemon protein level of NPC biopsy specimens was obviously higher than in chronic rhinitis. The data suggest that high Pokemon protein expression is closely associated with undifferentiated non-keratinizing NPC and may provide useful information for NPC molecular target therapy.
Protein methylase I has been partially purified from hog pancreas with a 11% yeild. The final preparation is completely free of any other protein-specific methyltransferases and endogenous substrate proteins. The enzyme has an optimum pH of 7.2 and the approximate molecular weight is above 800 thousands dalton. The Km values for S-adenosyl-L-methionine and histone type II-A are 1.32$\times$10$^{-5}$M. The Ki value for S-adenosyl-L-homocysteine is 1.52$\times$10$^{-6}$M. The effect of enyzme concentration on the activity showed a slight sigmoidal curve suggesting the involvement of certain cofactors. Even though the purified enzyme showed two bands on polyacrylamide gel electrophoresis, the enzyme is highly specific for the arginine residues of protein and specifically, highly specific for histone, suggesting histonespecific protein methylase I.
The dried carpophores of Sarcodon aspratus were examined for mineral elements and a protein-polysacccharide. Calcium, iron, zinc, magnesium, manganese, copper, lead, cadmium and mercury were detected in that order of contents by atomic absorption spectrometry and automatic mercury analysis. The protein-polysaccharide fraction extracted from the carpophore was found to contain 31.5% protein and 52.8% polysaccharide. The fraction showed no antitumor activity against sarcoma 180 implanted in mice.
The objectives of this study were to compare the protein expression patterns and degrees and identify the protein function of disomic addition lines (DAs) in Leymus racemosus, in order to improve the quality of wheat. Upon SDS-PAGE, L. racemosus showed two major protein bands whereas Chinese Spring (CS) had four major protein bands of high molecular weight. The DA(s) generally showed a similar protein expression pattern to that of CS, because 42 chromosomes were from CS and two chromosomes were from L. racemosus. However, only the L.r[J] line showed two protein bands of between 15 and 20 kDa, like L. racemosus. Image analysis based on 2-DE revealed that L.r[F] had the most upregulated protein spots, whereas L.r[N] had the least upregulated protein spots. For L.r[I], the frequency of the downregulated protein spots was higher than that of the upregulated ones. Using MALDI-TOF MS, the protein function was identified for each protein spot on the 2-DE polyacrylamide gel. The protein spots were classified into 11 groups according to protein function. Among the 11 groups, most protein spots of the DA(s) were identified as proteins related to metabolism. Additionally, unique protein spots of the DA(s) were related to abiotic stressors such as cold and heat. Those proteins are useful for improving wheat quality with resistance against abiotic stressors.
This investigation was to determine the changes in the trypsin inhibitor activity(TIA) and electrophoresis patterns of the soybean cotyledon and axis during germination. The TIA of the cotyledon decreased slightly and that of the axis decreased rapidly to 50% activivity after 7 day germination. At the 2nd, 3rd and 4th day's germination the TIA of the defatted dry axis was higher than that of cotyledon. However, the TIA of the fresh cotyledon was lower than that of the axis, due to its higher moisture content. Results from the electrophoretic studies showed that band 1 (polymer, 15S etc.), 2(11S), and 3(7S) whichare the major reserve proteins of soybean were decreased consid erably in cotyledon and axis and the fragments with Rm values between 0.5 and 1.0 were increased and band 5 showed up during germination. The band 4 of the cotyledon and band 6 of axis were not changed during germination. Generally speaking, the TIA and thereserve protein decreased as germination proceed.
The lonitudinal determination of specific gravity, total solid and protein contents of human milk were carried out in 27 Korean women. Human milk samples from the subjects were collected at 15, 30, 60, 90, 120, 150th days of lactation. 1) The average values of specific gravity of the milk was 1, 0281 (S.D. 0.0018, n=12), with a range of 1.0200-1.0383. 2) The average values of total soild of the milk was 12.07g/100ml(S.D. 0.38, n=112), with a range of 9.36-15.88g/100ml. 3) The average values of protein content of the milk was 1.20g/100ml (S.D. 0.14, n=112), with a range of 1.09-1.46g/100ml. A slight decrease of specific gravity and protein content in human milk was found during the course of lactation, but significant decrease was not found in total solid content.
Hamano, Y.;Yamazaki, S.;Kume, K.;Kobayashi, S.;Terashima, Y.
Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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v.11
no.5
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pp.566-572
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1998
The present study examined the effects of excessive dietary protein and energy on growth response to clenbuterol in broilers. The chicks were allocated into 6 groups at 14d old, and used for a $3{\times}2$ factorial experiment. Birds were fed six diets, the control diet containing 21% crude protein (CP) and 3,100 kcal of metabolizable energy ME/kg, a high protein (30% CP) or a high energy (3,500 kcal/ ME/kg) diet, with or without 1 ppm clenbuterol, for 18 d. Clenbuterol feeding markedly decreased (p < 0.05) body weight gain by 23% in the high energy group. Feed intake was also decreased (p < 0.05) by clenbuterol administration across diet treatments. Abdominal fat weight was reduced (p < 0.05) by clenbuterol only when chickens were fed the high energy diet. Clenbuterol increased (p < 0.05) leg muscle weight in the control diet group, but decreased (p < 0.05) it in the high energy group. Muscle protein concentration was increased by 11 % in leg muscle only of the birds at the high energy level. In leg muscle, clenbuterol enhanced the protein/DNA ratio by 18%, except for the high protein group. These results indicate that feeding a diet containing excessive amounts of protein and more energy than normal did not necessarily improve growth response to clenbuterol.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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