Shiga-like toxin-II(SLT-II)-producing Escherichia coli 0157 : H7 strain B2387이 분비하는 SLT-II가 gnotobiotic자돈에서의 뇌혈관 병변을 일으키는 pathogenesis에 관해서 실험을 했다. 제왕절개 수술로 태어난 자돈들을 두 그룹으로 나누어서, 한 그룹에는 SLT-II 중화항체를 포함한 혈청을 구강을 통해서 수동면역을 시키고, 또다른 한 그룹에는 SLT-II 중화항체가 포함되어 있지 않은 혈청을 구강을 통해서 수동면역시켰다. 24시간후 두 그룹 모두에게 SLT-II producing Escherichia coli O157 : H7 strain B2387를 구강으로 접종했다. SLT-II 중화항체가 포함되어 있지 않은 혈청으로 수동면역시킨 그룹의 자돈들은 설사와 맹결장염, 신경증상, 뇌혈관병변을 일으키고, plasma의 prostacyclin의 level이 증가했다. 하지만 SLT-II 중화항체가 포함되어 있는 혈청으로 수동면역시킨 그룹의 자돈들은 설사와 맹결장염은 유발했지만, 신경증상과 뇌혈관병변은 관찰되지 않았고, prostacyclin의 level도 증가하지 않았다. 이런 실험결과는 SLT-II 중화항체는 뇌혈관병변은 방어하지만 맹결장염은 방어하지 못한다는 의미를 나타내며, prostacylin의 증가는 뇌혈관의 endothelium의 병변을 의미한다.
This study has been carried out to secretion antibodies for the purpose of preventing the infection of Helicobacter pylori and using them as a supplement for treatment. This experiments have been separated antigens from H. pylori and observed into antibody production and the agglutination of H. pylori for the separated antigens. As major antigenic proteins separated from H. pylori, the following could be verified: 12 kinds of band for whole cell (WC), seven kinds of band for outer membrane protein (OMP), three kinds of band for crude urease, and one kind of band for lipopolysaccharide (LPS). The IgG anti-H. pylori antibody of separated antigens showed $77.9{\pm}6.4{\mu}g/ml$ for we (L), $84.9{\pm}6.4{\mu}g/ml$ for OMP, and $123.8{\pm}2.9{\mu}g/ml$ for crude urease, at the same antigen concentration of $20{\mu}g/100ull$, which showed the most at the crude urease. And it turned out that the IgA antibodies were generated with $2.5{\pm}0.32{\mu}g/ml$ for WC (L), $2.0{\pm}0.43{\mu}g/ml$ for OMP, and $1.3{\pm}0.25{\mu}g/ml$ for crude urease, which demonstrated the most for WC (L) antigens. As a result of verifying the immunogenecity of antigenic protein through the Western blotting, major antigenic substances could be confirmed as follows: 10 kinds for WC, six kinds for OMP and three kinds for crude urease. The agglutination values on the H. pylori of the antibody were $2^5,\;2^5,\;2^6\;and\;2^7$ at the antigen serums of anti-WC (H), anti-WC (L), anti-OMP and anti-crude urease, respectively, which indicated the highest for the antigen serum of anti-crude urease. The urease activation-inhibiting absorbance of antigen serum created by each antigen was $0.14{\pm}0.01$ for WC (H), $0.16{\pm}0.01$ for WC (L), $0.18{\pm}0.03$ for OMP, and $0.18{\pm}0.04$ for urease, demonstrating a significant inhibiting effect, compared with $0.26{\pm}0.02$ of the control group.
An enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) was studied for the rapid diagnosis of the flacherie virus (FV) of the silkworm, Bombyx mori. The optimised concentration of rabbit anti-FV IgG and enzyme conjugate for the this technique were 15$\mu\textrm{g}$/$m\ell$ and 1:100 dilution, respectively. In ELISA, the detectable concentation of purified FV was 15ng/$m\ell$, and the flacherie viral antigens in the larval extracts were detected as early as 24 hours after the experimental infection. The results indicated that ELISA technique proved to be applicable for the rapid diagnosis of flacherie virus disease.
The previous monoclonal antibody labeling method for bone marrow immunoscintigrapy was complicated and laborious for clinical application. Also it showed a relatively low labeling efficiency. To improve this procedure, we compared several direct labeling methods of $^{99m}Tc$. 1) The labeling efficiency in the method using gluconate as a transchelator was low (40-70%), but immunoscintigraphy using this radiotracer produced a clear image. 2) To improve labeling efficiency, ${\beta}$-mercaptoethanol was removed after reduction. The labeling efficiency was improved up to 70-80%, but the radioactivity of the blood pool was high. 3) The higest labeling efficiency (>90%) and best quality images could be obtained by using MDP as a transchelating agent. It did not require additional procedures for separation of labeled antibodies. The immunoreactivity of this antibody was 60%. Residual MDP which can be taken up by the bone could be removed by PD-10 column. The reduced antibodies were stable with a high labeling efficiency (>90%) for up to 47 days by deep freezing. We concluded that the improved procedure for $^{99m}Tc$ labeling of anti-NCA-95 monoclonal antibody using MDP as a transchelating agent will be a simple and useful method for clinical application.
Kang, So Young;Shin, Chung Ho;Yang, Sei Won;Park, Myoung Hee;Yu, Jeesuk
Clinical and Experimental Pediatrics
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v.48
no.6
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pp.624-633
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2005
Purpose : This study analyzed the expression of HLA-DR and DQ genotypes and anti-thyroid autoantibodies[anti-thyroid peroxidase(TPO) and anti-thyroglobulin(TG) antibodies] in Korean patients with type 1 diabetes(T1DM) to investigate the susceptible HLA alleles to T1DM in Korea and the prevalence of thyroid autoantibodies and their significance for the development of thyroid disorders. Methods : A total of 59 Korean patients with type 1 diabetes[26 males, median age 13.7 years(range 5.7-29.9 years), diabetes duration 7.6 years(-1.7-22.5 years)] were enrolled in this study, and 200 healthy Koreans without a family history of diabetes were selected as a normal control for the comparison of HLA genotypes. Seventeen patients with anti-TPO or anti-TG were followed [median duration 3.96 years(1 day-10.7 years)] with measurement of anti-TPO, anti-TG, $T_3$, $T_4$ or free $T_4$, TSH levels and physical examinations. HLA-DR and DQ genotyping were done by PCR-SSO, PCR-SSCP, PCR-RFLP and PCR-SSP methods. Results : HLA analysis showed higher frequencies of HLA-DRB1*0301, *090102 and DQB1*0201, *030302 alleles, DRB1*0301/*090102, *090102/*090102 and DQB1 *0201/*030302, *030302/*030302, *0201/ *0302 genotypes in T1DM patients compared to controls(Pc<0.05). Fifteen(25.4 percent) had anti-TPO antibody, 12(20.3 percent) had anti-TG, 17(28.8 percent) had either autoantibody and 10(16.9 percent) had both autoantibodies. No clinical or subclinical hypothyroidism developed during follow-up after the first detection of anti-thyroid autoantibody. There was no significant correlation between thyroid autoimmunity and gender, onset age of T1DM, and diabetes duration, respectively(P>0.05). Conclusion : We thought this unique HLA-DR, DQ allele distribution might be an important factor for the low incidence of T1DM in Korea. And a high prevalence of thyroid autoantibodies in these populations suggests examinations of thyroid antibodies should be performed regularly. Optimal age for the initial screening and the frequency of re-screening for associated thyroid autoimmune diseases in T1DM remains to be determined through prospective follow-up.
Lee, Hyunju;Park, So Eun;Lim, Soo Young;Choi, Kyong Min;Lee, Hoan Jong;Kim, Kyung Hyo
Clinical and Experimental Pediatrics
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v.50
no.5
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pp.449-456
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2007
Purpose : Antibody persistence after primary series of Haemophilus influenzae type b (Hib) vaccine and responses to a boosters are little known in Korean children. We performed this study to evaluate the antibody titer in relation with a booster immunization of Hib vaccine in Korean children. Methods : One hundred forty-four children aged 12-23 months old were enrolled in three university hospitals. The immunogenicity of a boosters with Hib vaccine was assessed in children previously primed with Hib vaccine. Antibody persistence was also assessed in children who had received 3 doses of Hib vaccine without a booster. Anti-polyribosylribitol phosphate (PRP) IgG antibody levels and bactericidal titers were determined by enzyme immunoassay and bactericidal assay at the Center for Vaccine Evaluation and Study, Medical Research Institute, Ewha Womans University. Results : Prior to a booster in the second year of life, geometric mean antibody concentrations were $2.39{\mu}g/mL$ and the percent of subjects who had a anti-PRP antibody level ${\geq}1{\mu}g/mL$ was 68.6%. After boosting, antibody concentration was $19.09{\mu}g/mL$ and the percent of subjects who had a anti-PRP antibody level ${\geq}1{\mu}g/mL$ was 96.5%, which reflects previous immune priming. In subjects who had finished primary immunization only, the bactericidal titer was 3,946 and in subjects who had a booster, it was 11,205. Anti-PRP antibody level was correlated with serum bactericidal titer. Conclusion : Many children aged 12-23 month old still had protective antibodies after recommended primary immunization only. A booster dose seemed to induce good anamnestic antibody responses in Korean children.
Ferritin is known to be the principle iron-storage protein in a wide variety of rganisms. The electrophoretic mobility and immunological cross-reactivity of dog splenic ferritin were compared with those of horse, bovine, and pig splenic ferritin after isolation using heat treatment, salting out, column chromatography, and ultrafiltration. These isolation methods allowed the recovery of $\~84{\mu}g$ of the ferritin per g of spleen. The iron content in the dog ferritin was $22.7\%$, which appeared to be higher than those in the other mammalian ferritins tested. The electrophoretic mobility of the dog ferritin under nondenaturing conditions was similar to its bovine counterpart, whereas it was more identical to pig and horse ferritins on an SDS-polyacrylamide gel. The molecular weight of the dog ferritin subunit was 19.5 kDa on an SDS-polyacrylarnide gel, and the subunit was unable to bind with iron. The polyclonal anti-dog ferritin raised in rats was able to cross-react with the pig, bovine, and horse ferritins, upon Ouchterlony double immunodiffusiion. A Western blot analysis also revealed that the anti-dog ferritin, which specifically bound with the dog ferritin subunit, could also recognize the horse, bovine, and pig ferritin subunits and the maximum cross-reactivity was exhibited with the pig ferritin subunit, indicating that the dog ferritin is immunochemically more similar to the pig ferritin than its other mammalian counterparts. Accordingly, these results elucidate the biochemical and immunochemical characteristics of dog ferritin that might have a potential to be applied as an oral iron supplement to treat iron deficiency anemia.
Monoclonal antibodies against the zoospores of Allomyces macrogynus were prepared using standard hybridoma technique. Mice were immunized either with the fixed zoospores or the zoospore proteins, and the production of the antibodies from the resulting hybridomas were screened by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Thirty hybridomas were initially identified ans six hybridomas were purified to the single cell clones. Culture supernatants from the hybridomas were tested for the effects on the growth of the germ tubes, and some of the hybridoma culture supernatants studied showed growth stimulatory effects.
돈단독(豚丹毒)에 대한 돼지 항체(抗體)를 검출(檢出)할 수 있는 실용적(實用的)인 혈청학적(血淸學的) 방법(方法)은 아직까지 없다. 그리고 보체결합반응(補體結合反應)은 가장 우수(優秀)하고 예민(銳敏)한 혈청학적반응(血淸學的反應)이긴 하지만 돼지 혈청(血淸)이 항체(抗體)이면 면양적혈구항가토혈청(緬羊赤血球抗家兎血淸) 및 기니픽 보체(補體)로 구성되는 용혈계하(溶血系下)에서는 돼지 혈청(血淸)의 친보체작용(親補體作用) 때문에 보체결합반응(補體結合反應)이 불가능하다. 이 연구(硏究)에서는 정상가토혈청(正常家兎血淸)이나 다른 정상소(正常素)를 반응계(反應系)에 첨가하여 친보체작용(親補體作用)을 없애는 개량보체결합반응(改良補體結合反應)으로 돈단독(豚丹毒) 항체(抗體) 1 항원(抗原)의 특이적(特異的)인 결합(結合)을 가능하게 하였다. 즉, 1/2 단위(單位)의 항원(抗原), 2정확단위(正確單位)의 기니픽보체(補體), 2단위(單位), 2% 감작면양적혈구(感作緬羊赤血球) 그리고 0.04 ml의 가토정상소(家兎正常素)는 돈단독(豚丹毒) 항원일항체결합물(抗原一抗體結合物)에 보체(補體)가 특이적(特異的)으로 결합(結合)되게 하였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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