• 한국가축번식학회지
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• 제15권2호
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• pp.149-155
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• 1991

본 실험은 H-Y 항원 유전자 크로닝을 위한 기초연구로서 H-Y 항원의 특성을 규명하기 위하여 친화성 크로마토그래피에 의하여 H-Y 항원을 분리·정제하였다. 정소 추출액을 항체가 결합된 column에 결합시킨 뒤 10% acetic acid로 용출시켰다. 용출된 분획을 모아 농축한 후 HPLC와 SDS-PAGE를 실시하여 H-Y 항원의 분자량은 약 6,7000달톤 임을 알 수 있었으며 isoelectric focusing에 의하여 등전점(pI)은 5.0인 것으로 측정되었다. H-Y 항원에 대한 단일클론항체와 표지항원으로는 H-Y 항원-ABEI(aminobutylethyl isoluminol)를 사용하여 H-Y 항원 정량을 위한 화학발광면역분석법을 개발하였다. 항원항체 반응후 빛의 측정은 NaOH 존재하에서 microperoxidase/H2O2를 이용한 산화반응으로 실시하여 10초간 측정한 빛의 양을 적분하였다. H-Y 항원의 농도와 빛의 양과는 역비례하였으며 감도는 11.8ng/tube 정도이었다.

• 미생물학회지
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• 제27권3호
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• pp.169-175
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• 1989

포유동물 세포내에서 간염 바이러스의 내면항원의 발현과 전위내면 항원(precore) 부위의 역할을 규명하기 위하여 고등동물세포 발현용 벡터에 전위내면항원 부위를 갖거나 또는 갖지 않는 내면항원 유전자를 클로닝 하여 COS 세포내에서의 발현을 조사하였다. 전위내면항원 부위를 포함한 내면항원 유전자를 갖는 플라스미드로감염시킨 COS 세포는 항원들이 세포추출물과 배양액에서 검출되었다. 분비된 항원의 증가율은 감염후 2일과 3일 사이가 가장 높았고, 부분결실된 제조합 플라스미드 중 내면항원의 ATG codon에서 180bp 떨어진 것이 가장 발현이 잘 되었다. 전위내면항원을 갖지 않거나 하나의 염기가 첨가되어 변형된 전위내면항원을 갖는 제조합 플라스미드의 경우 항원들이 세포 추출물에서만 검출되었다. 이러한 사실은 전이내면항원 부위가 HBe 항원의 분비에 관여 한다는 경우 항원들이 세포 그러나 대장균이나 효모 세포의 경우는 전위내면항원의 존재와 상관없이 항상 세포추출물에서만 존재하는 것으로 보아 이들 세포의 경우에서는 전위내면항원 부위가 HBe 항원의 분비에 영향을 줄 수 없음을 의미한다.

• 한국잠사곤충학회지
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• 제15권2호
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• pp.69.2-69
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• 1973

미립자병을 진단하기 위한 방법으로 1972년에 면역형광염색법을 적용한바 있으나 항원취급의 위험성 때문에 병원체를 -5$^{\circ}C$, -4$0^{\circ}C$ 및 -8$0^{\circ}C$에 불화화 시킨후 항원으로 사용할 경우 그 항원 설을 검토한바 저온처리 되지 않은 항원과 동일한 항원성을 나타내어 발표코저 한다.

• Parasites, Hosts and Diseases
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• 제24권2호
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• pp.145-158
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• 1986

이 연구는 특이 단세포군항체를 이용하여 친화 크로마토그래피를 실시함으로써 유구낭미충의 낭액에 특이한 항원을 순수분리하고 분리한 항원의 진단용 항원으로서의 특성을 관찰하고자 실시하였다. 유구낭미충 낭액을 BALB/c 마우스에 면역시켜 얻은 비장세포와 마우스 형질세포종을 융합하여 얻은 하이브리도마세포가 분비하는 항체의 항원 결합특이성을 면역효소측정 법으로 먼저 관찰하였다. 하이브리도마 세포는 대부분(54.9%) 유구낭미충 낭액에만 반응하는 항체를 생산하였다. 그러나 낭액항원과 기타 기생충항원에 같이 반응하는 항체 또는 기타 기생충항원 한가지에만 반응하는 항체등을 분비하는 하이브리도마세포 집락도 있었다. 무한대 희석법으로 하이브리도마세포를 희석 분주하여 단세포배양을 하였다. 이 경우에도 배양액에 분비한 단세포군 항체는 낭액항원에만 반응하는 경우에 대부분이었으나 기타 기생충 항원에 반응하는 단세포군 항체도 얻을 수 있었다. 따라서 유구낭미충 낭액에는 낭액에 특이한 항원결정기 이외에 유구낭미충의 두절 및 낭벽항원, 무구조충 및 간흡충등과 같은 항원결정기도 갖고 있음을 알 수 있었다. 단세포군 항체중 낭액항원과 가장 높은 항원항체 반응을 일으키며 두절 및 낭벽항원에도 약한 반응을 보였던 단세포군 항체를 선택하고 이를 이용하여 친화 크로마토그래피를 시행하였다. 낭액항원은 순수분리항원(A-Ag) 및 단세포군 항체와 결합하지 않았던 단백질의 총합(U-Ag)으로 분리하였다. 폴리아크릴아마이드 젤 전기영동법으로 낭액항원, A-Ag 및 U-Ag의 단백질 조성을 관찰한 바 낭액항원과 U-Ag는 6개의 band로 되어 있었으나 A-Ag은 band A 및 band C 두가지로 구성되어 있고 그중 대부분은 band C이었다. 순수분리한 A-Ag의 진단용 항원으로서의 가치를 면역효소측정법으로 관찰하였다. 낭액항원을 이용하여 혈청 및 뇌척수액내 IgG 항체가가 양성이었던 뇌유구낭미충증 환자에 대하여 A-Ag(같은 단백질함량)를 항원으로 면역효소측정법을 실시한 바 민감도는 낭액 항원이나 U-Ag에 비하여 70%로 낮아졌다. 그러나 낭액항원 및 U-Ag이 무구조충 감염자, 스파르가눔증 환자 및 체흡충증 환자에 대해 나타내는 교차반응이 A-Ag를 항원으로 사용하였을 때에는 모두 사라졌다. 이와같은 결과에서 단세포군 항체를 친화 크로마토그래피의 반응고리로 사용하여 순수분리한 항원은 유구낭미충 낭액항원중 특이한 항원결정기를 갖는 단백질로 구성되어 있음을 알 수 있었다. 그러나 순수분리항원은 유구낭미충증 환자의 혈청 및 뇌척수액에 존재하는 다세포기원 항체증 A-Ag의 특이항원결정기에만 반응하는 단세포군 항체 하나 또는 몇가지와만 반응하게 함으로써 특이성은 높아지나 혈청학적 민감도는 저하하였다고 판단하였다.

• 미생물학회지
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• 제28권1호
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• pp.1-5
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• 1990

B형 간염바이러스($\alpha$dr 형)의 내면항원(HBcAg) 유전자는 두개의 단백질 합성시작 유전자 암호 ATG를 갖는다. 하나는 전위내 면항원을 다른 하나는 내면항원 유전자들 위한 ATG 부호이다. 내연항원의 발현과 전위내면항원의 역할을 연구한기 위하여 전위내면 항왼 유전자를 포함하는 것과 포함하지 않는 내연항원 유전자를 효모발현 운반체에 클j료녕 하였다. 또한 내면항원의 발현에 5 upstream 의 역할을 알아보기 위하여 여러 가지의 5’ 제거툴연변이체를 클로닝하였다. 앞에서 만들어진 플라스미드로 여러 효모 균주을 형질전환시킨 후 발헨된 내면항원과 그와 관련된 항원 HBeAg을 방사면역측정법 으로 확인하였다. 효모에서 내면항원 발현의 최적조건 허에서 가장 높은 수준의 항원은 PGK promoter 와 terminator에 내연향원 올 포함한 pGKHBc를 가진 SHY4에서 검출되었다. 전위내면부위의 존재와 우관하게 내면항원은 배양액에서는 검출되지 않고 세포내에서만 검출되었다. 이 결과는 전위내면항원이 효모 내에서 내연항왼의 분비에 영향올 주지않음을 의미한다.

• Parasites, Hosts and Diseases
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• 제35권3호
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• pp.197-202
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• 1997

고양이 4마리의 폐흡충 피낭유충을 50마리씩 감염시키고, 1주부터 13주까지 감염단계별 혈청을 채취하고 폐흡충 충란, 피낭유충, 4주, 7주 및 16주 충체 추출물 항원에 대한 항체 반응을 관찰하였다. 초기 항채 반응은 감염 3주 후부터 관찰되었다. 항원별로는 4주 충체 항원에 대한 항체가가 가장 먼저, 높게 증가하였고, 7주, 16주 충체 항원에 대한 반응이 그 다음으로 높았다. 충란 항원에 대한 항체 반응은 10주 이후 증가하였다. 피낭유충 충체 항원에 대한 반응은 관찰한 초기 감염 전체 기간에 걸쳐 비교적 낮았다. Immunoblot을 실시한 결과, 충란 항원 특이 28, 46, 94 kDa 항원대에 대한 반응은 10주 이후부터 관찰할 수 있었다. 4주 충체 항원은 10-25, 29, 31 kDa 등이 감염 초기부터 항원성을 나타내고 있었고, 그 중에는 감염 13주 혈청에 대하여 이미 반응이 약하게 된 항원대도 있었고 다른 기생충 질환 혈청과 교차반응을 나타내는 것이 알려진 항원도 있었다. 16주 성충 충체 항원의 32, 35 kDa 항원대는 감연 4주 후부터 특이한 반응을 나타내고 있었다. 이상의 결과, 감염 경과에 따라 폐흡충 항원단백질의 항원 결정기도 성충의 것으로 바뀌는 것을 알 수 있었고 성충 충체항원의 32 및 35 kDa 단백질은 4주 이후 초기 폐흡충증도 진단할 수 있는 항원 성분으로 생각하였다.

• 한국균학회지
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• 제17권2호
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• pp.66-75
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• 1989

임상가검물(臨床可檢物)로부터 분리(分離)된 Aspergillus fumigatus 균주(菌株)의 항원조성(抗原造成)과 이균에 감염(感染)된 환자의 항체반응(抗體反應)의 다양성을 Immunoblotting으로 관찰하였다. SDS-PAGE와 immunoblots상에 나타난 결과를 보면 비교분석된 배양려액항원(培養慮液抗原)의 조성에 있어서 균주간(菌株間)에 정성(定性) 및 정량적(定量的) 차이가 있음을 알수 있었다. 혈청학적(血淸學的) 반응력(反應力)과 특이성(特異性)이 비교적 높은 항원성분(抗原成分)을 동정(同定)하기 위해 그러한 항원들이 비교적 많이 함유된 AFG7을 선택하였다. 전기영동(電氣泳動)으로 분리하여 nitrocellulose paper로 전이흡착(轉移吸着)시켜 A. fumigatus나 기타 진균항원(眞菌抗原)에 양성침강항체(陽性沈降抗體)(면역확산시험(免疫擴散試驗)에서)를 가진 혈청과 반응시킨 결과 적어도 36개의 항원성분이 검출되었다. 그러나 혈청학적 진단가치가 있는 항원성분은 4개 정도에 불과했다. 특이성과 반응력이 가장 높아 표준항원(標準抗原)에 반드시 함유되어야 할 것으로 보는 항원성분은 분자량(分子量)이 82 KD 정도되는 항원이었고 그 외에 11 KD, 26 KD, 30 KD 및 31 KD 등도 우수한 항원성분으로서 앞으로 더 연구검토되어야 할 것으로 본다. 반응력이 큰 항원이면 Coomassie청(靑)에는 흐리게 염색되어도 immunoblots상에는 짙게 염색되는데 비해 반응력이 약한 항원은 그와 반대현상을 나타내어 immunoblotting 분석법이 항원의 반응력과 특이성 관찰에 매우 유용함을 알 수 있다. 많은 항원성분이 균종특이(菌種特異) 항원결정기(抗原決定基)와 함께 광범한 균군(菌群)에 분포하는 항원결정기(抗原決定基)도 가지고 있었다.

• Parasites, Hosts and Diseases
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• 제27권1호
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• pp.9-14
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• 1989

폐흡충중의 진단은 일반적으로 객담에서 충란을 검출하는 것이 가장 확실한 진단법으로 간주되고 있지만 이소기생의 경우는 물론, 본 기생충의 감염자 및 감염 강도의 감소로 인해 실제 폐에 기생한 경우에 있어서도 객담 검사의 민감도가 매우 낮아져 혈청학적 검사의 필요성이 점차 대두되고 있다. 따라서 식염수 추출액을 항원으로 하여 효소면역 측정법을 실시하는 방법으로 면역 진단을 실시하고 있으나 조항원의 단백 구성이 복잡하여 간흡충을 비롯한 몇몇 흡충류 감염자 혈청에서 교차 반응이 야기되고 있다. 그동안 정제 항원을 만들고자 하는 시도가 많았음에도 불구하고 특이 항원의 분리는 실제로 불가능하였다. 이와 같은 문제점을 보완하기 위하여 폐흡충 조항원을 SDS-PAGE로 전기영동한 다음 EITB를 이용하여 항원대별 항원성 및 특이성을 관찰하여 폐흡충 조항원의 폐흡충증 혈청에 대한 특이 반응대를 확인해 보고자 하였다. 실험에 사용된 항원은 실험적으로 개에 감염시켜 24주만에 얻은 폐흡충 성충의 식염수 추출액이며 3∼20%의 linear gradient gel에서 SDS-PAGE하였다. Silver 염색한 결과 229 kDa∼10kDa 사이에서 26개의 항원대를 구성하고 있었으며 주요 항원대에 대하여 EITB를 실시한 결과 폐흡충 감염자 혈청은 229, 91, 60, 50, 35∼31, 27, 25, 21, 17, 11 및 10kDa의 분자량을 갖는 항원대와 반응하였다. 간흡충 감염자 혈청은 35∼31, 19, 11및 17 kDa의 항원대와 반응하였고 낭미충 감염자 혈청은 229, 31∼31, 27, 25 및 17kDa의 항원대와 반응하였다. 광절열두조충 1예도 17 kDa의 항원대와 반응하였다. 따라서 91, 60, 21 및 10kDa의 항원대 중 일부가 폐흡충 조항원에 있어서 체홉충에 대한 종특이 항원대로 생각되었으며 향후 immunoblot을 이용한 폐흡충중의 면역진단에 이용될 수 있는 항원대로 간주할 수 있었다.

• 레드리본
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• 통권71호
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• pp.14-15
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• 2006

에이즈 검사는 크게 항원 검사와 항체 검사로 나눌 수 있다. 에이즈 바이러스(HIV)가 항원이며 이것이 우리 몸에 침입하였을 때 이 항원의 모양에 맞게 항체가 형성된다. 항원검사는 보조검사이고 항체검사가 확진검사로 사용되고 있으나 이번 호에서는 에이즈의 전반적인 검사를 모두 실어 이해를 돕고자 한다.

• Journal of Oral Medicine and Pain
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• 제30권1호
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• pp.15-23
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• 2005

Mucin 당단백질은 인체 타액 성분 중 혈액형 항원을 표지하는 주요 성분으로 알려져 있다. 본 연구의 목적은 보관중인 타액 검체에서 일어나는 분해과정 중에 A형 혹은 B형 혈액형 항원이 H형 항원으로 변환이 일어나는 지를 조사하는데 있다. A형과 B형 각각 20명씩 총 40명의 분비자로부터 채취한 전타액과 상층액을 실온에서 1주일간 보관한 다음, SDS-PAGE와 immunoblotting법을 이용하여 혈액형 항원의 변환 여부를 조사하였다. 전타액에서 변환을 보인 연구대상 중에서 A형과 B형 각각 4명씩 총 8명에서 이하선 타액과 악하선-설하선 타액을 채취하였고, 악하선-설하선 타액과 악하선-설하선 타액 및 이하선 타액의 혼합액을 실온에서 1주일간 보관하였으며, 같은 방법으로 혈액형 항원의 변환 여부를 조사하여 다음과 같은 결론을 얻었다. 1. 전타액 상층액을 1주일 보관한 검체의 경우, A형 항원이 분해되지 않은 경우가 5%, 분해된 경우가 95%이었고, A형 항원의 H형 항원으로의 변환이 5명(25%)의 연구대상에서 관찰되었다. 원심분리하지 않은 전타액 검체에서는 90%의 경우에서 A형 항원이 분해된 형태로 관찰되었고 10%에서는 관찰되지 않았으며, 혈액형 항원의 변환은 4명(20%)의 연구대상에서 관찰되었다. 2. 전타액 상층액을 1주일 보관한 검체의 경우, B형 항원이 분해되지 않은 경우가 20%, 분해된 경우가 65%이었고 15%에서는 관찰되지 않았으며, B형 항원의 H형 항원으로의 변환이 7명(35%)의 연구대상에서 관찰되었다. 원심분리하지 않은 전타액 검체에서는 5%의 경우 B형 항원이 분해되지 않은 형태로 관찰되었고, 65%의 경우에서 분해된 형태로 관찰되었으며 30%에서는 관찰되지 않았다. 이 경우 혈액형 항원의 변환은 2명(10%)의 연구대상에서 관찰되었다. 3. 개별 타액선 타액검체의 경우, 4명중 각각 1명에서 A형 항원 혹은 B형 항원에서 H형 항원으로의 변환이 관찰되었다. 이 경우 혈액형 항원의 변환은 악하선-설하선 타액과 악하선-설하선 타액 및 이하선 타액의 혼합액 모두에서 일어났다. 그 외 3명의 검체에서는 항원의 분해나 변환이 관찰되지 않았다. 이상의 결과는 타액에서 혈액형 항원의 변환이 일어남을 보여주는 것으로 타액에 이러한 변환을 가능하게 하는 효소가 존재함을 암시해 주었다. 그러므로 향후 혈액형 항원 변환의 정량적 연구와 함께 타액에 존재 가능성이 있는 특정 당분해효소의 근원이나 활성에 대한 추가 연구가 필요하다.