Objectives: Poncirus trifoliata Rafinesque has been known to have anti-allergic effects in skin diseases. However, anti-atopic dermatitis effects of P. trifoliata Rafinesque have not been studied yet in skin diseases. The present study evaluated the anti-atopic dermatitis effects of P. trifoliata Rafinesque (PTR) using external treatments on AD. Methods: AD lesions were induced by the repeated application of 2, 4-Dinitrochlorobenzene (DNCB) on the shaved back of BALB/c mice. $100{\mu}{\ell}$ of PTR extracts was applied to the AD lesions for 11 days. Histological assessments, mast cells count and serum levels of IgE were analyzed. The anti-pruritic effects of PTR were examined by the change of scratching frequency and nerve growth factor (NGF) expression. In addition, the anti-inflammatory effects of PTR were examined by the expressions of Th2/Th1 cytokines and pro-inflammatory in dorsal skin. Results: Histopathological findings showed that topical application of PTR decreased the thickness of dermal and epidermal skin compared with the DNCB group. PTR also notably decreased the mast cells count and serum IgE. The scratching behavior of mice and expression of NGF were significantly reduced. In addition, PTR group significantly suppressed the IL-4, IL-6, IFN-${\gamma}$ and TNF-${\alpha}$ cytokines compared to the DNCB group. Conclusions: These results indicated that P. trifoliata Rafinesque possess anti-pruritus and anti-atopic dermatitis properties. Therefore, P. trifoliata Rafinesque might be used for treatment of pruritus and atopic dermatitis.
Objectives : The purpose of this study is to investigate effectiveness of KamiCheongsimyeonjatang(KCSYJT) medicines to suppress atopic dermatitis in mouse model experimentally. Methods : First, in vitro, we isolated B cells from 18 weeks of atopicdermatitis-like skin NC/Nga mouse. Then we analyzed FACS(Fluorescence Activated Cell Sorter) by intracellular staining of IFN-$\gamma$, GATA-3+ analyzed cytokines by using real-time PCR. Secondly, in vivo, after administration of KCSYJT to atopic dermatitis NC/Nga mouse at 12 weeks of age, we analyzed serum IgE and the change of activated cell in PBMCs(Peripheral Blood Mononuclear Cells). Results : In vitro, KCSYJT medicines supressed IL-1$\beta$, IL-6, TNF-$\alpha$, and TGF-$\beta$ mRNA and increased IL-10 mRNA in B cells. Also, KCSYJT medicines decreased the levels of GATA-3$^+$CD4$^+$ and increased the levels of IFN-$\gamma^+$CD4$^+$T Cell. In vivo, serum IgE levels dreased in KCSYJT group than control group and In PBMCs, the activated cell percentage of granulocytes, CD3+, CD3+/CD4+, B220+/CD23+, and CCR3+ decreased and CD19+, CD3+/CD8+ increased in KCSYJT group than control group. Conclusions : This study demonstrates immunological activity of KCSYJT on atopic dermatitis-like model mice.
Herbal medicine has a high body absorption rate when it ferments. Biological and clinical research on the fermented herb gradually increases because it has effective materials for the treatment of a disease and it is a little bitter. In this study, we investigated the effect of fermented Baedokhwanbalhyobang (BDHBH) on attenuation of the development of atopic dermatitis in NC/Nga mice by evaluating the cytokine level in serum, the mRNA expression of cytokine and histological alteration of the skin, and the skin severity. We have come to the following conclusion. BDHBH led to a significant decrease in the skin severity score (63.1%) as compared to the control group. CD4+/CD45+, CD4+, B220+/CD23+, and CD11b+/Gr-1+cells of peripheral mononuclear cells (PBMCs) in the BDHBH-treated group were decreased to 6.7%, 31.1%, 22.4%, 36.6%, respectively. CD3+and CD11b+/Gr-1+immune cells in dorsal skin of the BDHBH-treated group were decreased to 52.9% and 28.0%. The levels of IL-5 and IL-13 in serum of the BDHBH-treated group were inhibited to 18.8% and 5.1%. The mRNA expressions of IL-5 and IL-13 in dorsal skin were also decreased to 30.6% and 27.8% after the treatment of BDHBH. BDHBH inhibited the proliferation and differentiation of eosinophils. In histological examination, BDHBH decreased the thickness of epidermis and dermis, and infilatration of mast cells as compared to the control group. These results indicate that BDHBH inhibits the pathogenic development of atopic dermatitis in NC/Nga mice. These results may indicate that BDHBH attenuates the development of atopic dermatitis-like lesions by lowering immune cells and inflammatory cytokine levels, and that it is valuable in drug development for the treatment of atopic dermatitis. Further experiments on the components of BDHBH will be needed to better understand the effect of a fermented herb as compared to a herb.
본 연구는 세균과 진균에 대한 항균작용, 살충작용, 항아토피 활성, 항염증 효과, 혈압강하 및 스트레스 완화 효과 등이 있는 것으로 알려진 편백 정유를 이용하여, 마우스에서의 급성경구독성시험을 수행하였다. 편백 정유를 마우스에 0, 125, 250, 500, 1,000, 2,000 mg/kg body weight의 농도로 각각 1회 경구투여한 결과, 마우스 암 수 모두 2,000 mg/kg에서 모두 생존하였으며, 모든 투여군의 체중 및 모든 혈액학적 혈액생화학적 지표값들이 대조군과 비교하여 통계적으로 유의적인 차이를 보이지 않았다. 따라서 편백 정유의 마우스에서의 $LD_{50}$은 2,000 mg/kg body weight 이상으로 확인되었다.
Objectives : This study aims to evaluate the effects of natural herb mixutre (NHM) on atopic dermatitis and skin regeneration using in vivo test. Methods : NHM was prepared with DW. 25% of NHM was applied to skin lesion, where atopic dermatitis was induced by DNCB in NC/Nga mice. The levels of cytokines (IL-4, IL-5, IL-6, IL-13, TNF-a, and $IFN-{\gamma}$), and IgE in serum were measured by Luminex. Immune cells (WBC, eosinophil, lymphocyte, and monocyte) in blood were counted by coulter counter. The gross investigation of atopic dermatitis index score test were performed during the NHM treatment period. Also, the histopathological change of dorsal skin was observed by H&E and M&T staining. Results : NHM showed the levels of IL-4, IL-5, IL-6, IL-13, IgE, WBC, eosinophil, lymphocyte, and monocyte in serum or blood were significantly decreased. On the contrary, the productions of FGF, and VEGF were increased in the serum. Also, atopic dermatitis index score in NHM-treated mice were observed in the similar levels to those of normal group. Histological examination demonstrated that NHM suppressed immune cell infiltration and thickening of epidermis, meanwhile the extraction induced collagen production in the dorsal skin. Conclusion : This study demonstrated that NHM is appeared to be effective on atopic dermatitis and skin regeneration efficacy based on the observations with hematologic, gross, and histologic examinations. Therefore, we suggest that NHM could be effectively used as an external therapeutics against atopic dermatitis and a consequence skin damage.
본 연구에서는 아로니아 추출물의 항산화제와 항알레르기 치료제로써의 유효성을 알아보기 위해 페놀성 화합물 및 플라보노이드 함량과 DPPH 라디칼 포착효능, superoxide 음이온 라디칼 포착효능, 5-LO억제 효능 및 COX억제효능을 측정하였다. 측정결과 아로니아는 유효성분으로 예상되는 페놀성 화합물과 플라보노이드가 각각 $745.4{\pm}3.7\;mg/g$, $74.63{\pm}2.2\;mg/g$으로 상당량 함유되어 있으며, 상당히 낮은 농도($6.15{\pm}0.343\;ppm$, $6.99{\pm}1.26\;ppm$)에서 DPPH 라디칼과 superoxide 음이온 라디칼을 50% 소거하는 것으로 나타났다. 아로니아의 항알레르기 효능에 관하여 5-LO의 $IC_{50}$값이 $47.07{\pm}0.15\;ppm$으로, EGCG의 $IC_{50}(15.83{\pm}0.98\;ppm)$보다는 높았지만 아로니아가 EGCG와 같은 단일물질이 아니라 천연혼합물임을 감안하여 다른 천연물들의 $IC_{50}$값과 비교하였을 때 5-LO를 비교적 낮은 농도에서 억제하고 있다고 볼 수 있다. 또한, COX-1과 COX-2의 저해 비율 비교를 통해 양성대조군으로 사용한 EGCG만큼 COX-2를 선택적으로 저해하고 있음을 확인하였다. 이상의 결과에 따르면 아로니아 추출물은 항산화 및 항알레르기 효능을 갖고 있으며, 따라서 알레르기성 비염이나 아토피와 같은 알레르기 관련 질병 치료에 유효하게 사용될 것이라 생각된다.
유기농재배 콩을 다양한 용매에서 추출하여 그 추출물에 대한 항산화 효과, 항염증 효과, 대식세포의 세포사멸 보호 효과, 그리고 알레르기 저해효과를 비교하였다. DPPH 법과 SOD 효소의 활성 측정으로 항산화 능력을 평가하였으며, 항염증 효과는 LPS로 유도시킨 Raw 264.7 세포주에서 염증 매개 단백질인 Cox-2와 iNOS의 발현량을 Western blotting으로 조사하여 분석하였다. 또한 대식세포 보호 효과를 세포사멸 조절 단백질인 Bcl-xl의 발현량조사로 평가하였고, 1mM $H_2O_2$ 처리로 유도되는 세포사멸의 보호효과를 세포 수 측정법으로 조사하였다. 항알레르기 효과는 흰쥐의 비만세포인 RBL-2H3 세포주를 사용하여 IgE로 매개되는 비만세포의 탈과립화를 OPT assay로 측정하여 분석하였다. 그 결과, 유기 재배 콩의 다양한 추출물에서 항산화, 세포사멸 보호, 항염증 효과를 나타내었다. 특히 유기농 콩의 열수 추출물은 LPS로 유도시킨 염증반응을 효과적으로 억제하는 것으로 나타났다. 그러나 항알레르기 효과는 모든 추출물에서 히스타민 유리량이 약간 감소하는 것으로 나타나 유기농 콩의 특별한 효과를 확인할 수 없었다. 콩에는 많은 유용한 생리활성물질 뿐 만 아니라 알레르기 유발 물질도 존재하는 것으로 알려져 있지만 조추출물 상태에서는 특이적인 알레르기 유발보다 오히려 항알레르기 효과가 나타났다. 결론적으로, 만성 염증 및 천식, 그리고 아토피피부염과 같은 염증관련 질환에는 유기 재배된 콩이 좋은 억제 효과를 가지고 있다고 판단된다.
유기농 및 일반재배 대두를 다양한 용매에서 추출하여 그 추출물에 대한 항산화 효과, 항염증 효과, 대식세포의 세포사멸 보호 효과, 그리고 알레르기 저해효과를 비교하였다. DPPH 법과 SOD 효소의 활성 측정으로 항산화 능력을 평가하였으며, 항염증 효과는 LPS로 유도시킨 Raw 264.7 세포주에서 염증 매개 단백질인 Cox-2와 iNOS의 발현량을 western blotting으로 조사하여 분석하였다. 또한 대식세포 보호 효과를 세포사멸 조절 단백질인 Bcl-xl의 발현량 조사로 평가하였고, 1 mM $H_2O_2$ 처리로 유도되는 세포사멸의 보호효과를 세포 수 측정법으로 조사하였다. 항알레르기 효과는 흰쥐의 비만세포인 RBL-2H3 세포주를 사용하여 IgE로 매개되는 비만세포의 탈과립화를 OPT assay로 측정하여 분석하였다. 그 결과, 일반 재배보다 유기 재배 대두 추출물이 더 좋은 항산화, 세포사멸 보호, 항염증 효과를 나타내었다. 특히 유기농 대두의 열수 추출물은 LPS로 유도시킨 염증반응을 효과적으로 억제하는 것으로 나타났다. 그러나 항알레르기 효과는 모든 추출물에서 히스타민 유리량이 약간 감소하는 것으로 나타나 유기농과 일반재배의 차이를 확인할 수 없었다. 대두에는 많은 유용한 생리활성물질 뿐 만 아니라 알레르기 유발 물질도 존재하는 것으로 알려져 있지만 조추출물 상태에서는 특이적인 알레르기 유발보다 오히려 항알레르기 효과가 나타났다. 결론적으로, 만성 염증 및 천식, 그리고 아토피피부염과 같은 염증관련 질환에는 유기재배된 대두가 일반 대두보다 좋은 억제 효과를 가지고 있다고 판단된다.
기관지를 통하여 발병하는 염증은 대표적인 면역질환의 현상인데 천식이나 아토피 피부염 등에 나타난다. 신선초의 물 추출물이 항천식 활성을 나타내는지를 알아보기 위하여 ovalbumin으로 유도시킨 동물모델을 사용하였다. 마우스에 경구투여하여 폐의 조직을 Haematoxylin-Eosin 염색과 면역조직화학을 이용하여 인터루킨-4 및-13의 발현을 측정한 결과, 신선초의 물 추출물은 $CD4^+$ 세포의 수 및, 인터루킨-4 및 -13의 발현을 억제하는 것으로 나타났다. 이의 결과는 신선초의 물 추출물이 ovalbumin 으로 유도시킨 마우스의 천식 증상을 경감시키는 것으로 이의 활용이 기대된다.
인진호탕(茵蔯蒿湯)은 한의학에서 여러 가지 질환에 사용되어 왔다. 특히 간경의 습열(濕熱)로 인한 질환에 습열을 제거함으로써 증(證)의 완화에 많은 응용이 되어 왔다. 본 연구는 습열(濕熱)로 인한 질환중의 하나인 아토피 피부염에 그동안 응용이 적은 인진호탕(茵蔯蒿湯)을 실험적으로 응용함으로써 임상적인 가치를 가질 수 있는 지에 대한 기초연구를 진행하였다. 본 실험에 사용된 세포주는 rat leukemia (RBL-2H3) cells로 인진호탕(茵蔯蒿湯)은 알레르기와 관련된 사이토카인인 tumor necrosis factor (TNF)-$\alpha$, interleukin (IL)-4를 용량의존적으로 억제하였지만 세포독성은 일으키지 않았다. 그리고 동물실험에서 인진호탕(茵蔯蒿湯)은 PCA반응에서 충분한 억제효과를 나타내었다. 또한 Compound 48/80으로 유도된 anaphylaxis shock도 용량 의존적으로 억제함이 밝혀졌다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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