This survey was carried out to investigate the occurrence of reproductive disorders in Korean native cattle (Hanwoo). The general management status such as barn type, feed intake, parity and type of reproductive disorders were examined in the Hanwoo farms. In this survey, the total incidence of reproductive disorders that was assessed from 54 Hanwoo farms was 11.6% (73/ 631). We first examined the incidence of reproductive disorders following herd size per farm. The rates of reproductive disorders in under 10 heads, 10 to 20 heads and over 20 heads were 25.2%, 9.4% and 8.3%, respectively (P<0.05). The rate of reproductive disorders in tie stall barn was significantly (P<0.05) higher than that in free stall barn (14.9% vs. 8.1%). The major types of reproductive disorders were follicular cysts (21.8%), fat necrosis (21.8%), and repeat breeding (17.8%). The rate of reproductive disorders assessed by the parity tended to decrease as the parity increased. The relationship between incidence of reproductive disorders and body condition score (BCS) was investigated in 203 Hanwoo. The incidence of reproductive disorder was 80.0%, 8.8%, 9.4%, 10.0%, 33.3% and 57.1% at 1.5, 2.0, 2.5, 3.0, 3.5 and 4.0 of BCS, respectively. These data show that the increase of herd size, barn type and BCS affect the incidence of reproductive disorders such as follicular cysts, fat necrosis and repeat breeding in Hanwoo.
The objective of this study was to investigate response of corpus luteum, recovery rate of embryos and production of transferable embryos according to superovulation by PEG 30% FSH in Hanwoo. Cows were selected as recipient, subsequent were superovulated with a total of 400 mg NIH-FSH-P1(Folltropin-V, Canada) given by one shot subcutaneously. At the time of five days after Folltropin injection, 25mg of a PGF$_2$a was injected and cows were inseminated 12 and 24h after the onset of estrus. Seven days after insemination, embryos were collected non-surgically and were cryopreserved by direct transfer methods. The results are summarized as follows : 1. Response of corpus luteum following the superovulation in Hanwoo, right ovary were 52.8%(271/513) and left ovary were 47.1%(242/513), respectively (P<0.05). 2. Recovery rate of embryos following the number of corpus luteum were 83.0%(426/513). 3. Mean number of embryos recovered and transferable embryos were 7.74 and 6.43, respectively (P<0.05). 4. In the total number of transferable embryos per flush were collected 6.4 and all saved transferable embryos were 355.
Lee J. W.;Jung S. Y.;Son B. H.;Han K. H.;Oh I. S.;Seo H. J.;Kong I. K.
Journal of Embryo Transfer
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v.20
no.1
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pp.55-62
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2005
This study was undertaken to access the effect of collection methods on the collection efficiency, blastocyst rate and pregnancy rate after IVP embryo transfer. The ovaries of Hanwoo were obtained from an abattoir and kept on 25 to $28^{\circ}C$ and transported to laboratory within 4 hrs. The oocytes were collected by aspiration of follicles $(2\~6\;mm)$ with or without slicing of ovaries after aspiration. The oocytes were matured in vitro (IVM) for 20 to 24 hrs in TCM-199 supplemented with $10\%$ fetal bovine serum at $39^{\circ}C$ under $5\%\;CO_{2}$ in air. Following routine IVM/IVF procedure, the oocytes and presumed zygotes were cultured for three day in CRlaa medium with BSA. The cumulus cells at 2 to 8-cell stage of embryos removed then the embryos and were cultured in CRlaa medium containing $10\%$ fetal bovine serum in $5\%\;CO_{2}$ at $39^{\circ}C$. The fresh blastocysts cultured for 7 to 9 days were transferred into recipients. The numbers of oocytes recovered form two different methods, the aspiration and slicing after aspiration, were compared to know what. The number of oocytes per ovary was 8.2 and 6.5 in aspiration combining slicing, and aspiration groups, respectively (p<0.05). The cleavage rate in aspiration method are significantly (p<0.05) high than those in slicing post aspiration $(27.9\%)$, and aspiration $(25.5\%)$. The pregnancy .ate in aspiration method $(62.5\%)$ was high than that in slicing method after aspiration $(54.4\%)$. The pregnancy rates of aspiration method and slicing method after aspiration in nullipara $(58.1\%\;vs\;68.2\%)$ was high than that in pluripara $(49.5\%\;vs\;53.2\%)$. The results obtained that the increased number of oocytes per ovary in slicing method after aspiration could be better than that in aspiration method. Pregnancy rate in aspiration method was slightly higher in than that in slicing method after aspiration.
This study was undertaken to compare the efficiency of recovery rate and development rate of follicular oocytes collected either by aspiration or by slicing method. The follicular oocytes collected by the two methods matured in TCM199 supplemented with 10% steer serum at 39$^{\circ}C$ in a humidified atmosphere of 5% $CO_2$in air. After 22 h of culture, the oocytes were inseminated with frozen-thawed semen (2$\times$10$^{6}$ sperm/ml of final concentration) prepared with Percoll-density gradient in IVF-TALP medium for 16 h. Later, sets of 15 presumptive zygotes were transferred into 50 $\mu$L, droplets of CR1aa medium. On day 4 of the culture, embryos were transferred to TCM199 until day 9. The percentages of nuclear maturation to pre-metaphase II in the oocytes collected by aspiration are significantly (P<0.05) higher than that by slicing (83% vs. 62%, respectively). The mean number of oocytes recovered by slicing per ovary is significantly (P<0.05) higher than that by aspiration (15.1 vs. 6.7, respectively). Although the rates of cleavage and development to blastocyst of oocytes collected b)\\\\`aspiration are significantly (P<0.05) higher than that by slicing, the number of transferable embryos obtained by slicing method is significantly (P<0.05) higher than that by aspiration. From the results. we may conclude that slicing method is better than aspiration method for obtaining large number of transferable embryos per ovary.
The effects of exogenous spleen cells on the progesterone and insulin like-growth factor-I (IGF-I) secretions in luteal cells were studied by using in vitro luteal cell culture system in the Hanwoo luteal cells. The corpora lutea(CL) were collected and pooled from the Korean native cattle(Hanwoo) ovaries from a local slaughter house. After enzymatic dissociation, combined large and small luteal cells(LLC and SLC)(1.0$\times$10$^{6}$ cells/$m\ell$) were incubated in D-MEM media containing antibiotics and 10% FCS. Spleen cells (1.0$\times$10$^{6}$ cells/$m\ell$) obtained from castrated adult male Hanwoo were added to luteal cells and co-cultured for 24 h in the absence or presence of luteinizing hormone (LH) (100 ng). Progesterone contents from luteal tissues were increased at CL-3 stage during each stage of estrous cycle. Progesterone secretion from luteal cell culture by the presence of LH (100 ng/$m\ell$) was positively stimulated compared with control. However, progesterone secretion was not changed by the addition of 5, 10 and 20% of spleen cells in the absence of LH. Co-culture of luteal cells with 10% of spleen cells in the presence of LH(l00ng/$m\ell$) significantly. enhanced after 24 h of culture. IGF-Isecretion from in vitro luteal cells co-culture by the addition of spleen cells (5%, 10% and 20%) was not significantly effected. Besides, in the presence of LH (100ng/$m\ell$), IGF-Isecretions from luteal cells by addition of spleen cells were higher than control media. However, LH alone significantly increased IGF-I secretion at 24 h of culture. These data provide the demonstrate that spleen cells can enhance LH action so as to stimulate progesterone secretion from Hanwoo luteal cells but have no effect to stimulate IGF-I secretion.
핵 이식에 공여되는 수핵난자의 효과적인 동결보존을 위하여 한우 성숙난자를 1.0 M dimethylsulfoxide(DMSO) 또는 1.0 M glycerol이 함유된 동결보호제를 이용하여 처리하거나, 동결보호제 처리 후 완만동결법을 이용한 동결융핼르 시행하여 상기 실험처리로 야기되는 투명대 경화현상을 관찰하였다. 도축장 유래의 난소에서 미성숙난자를 채취한 후 10% 소 태아혈청을 함유한 TCM-199을 이용하여 22∼24 시간 동안 체외성숙배양을 이해하였다. 배양후 작출된 성숙난자를 각각의 동결보호제로 처리, 혹은 처리 후 동격융해한 후 protease를 이용하여 투명 대의 경화현상 발생의 빈도를 조사하였다. 또한 동격란을 동결정액을 이용한 체외수정에 공여한 후 정자 침입농도능을 조사하였다. 동결보호제로 처리한 난자에 있어서 보호제의 종류와 관계없이 투명대 경화현상이 유의적 (P<0.05) 으로 증가하였으나 이후의 동결융해 처리에 의한 추가적인 경화현상의 발생은 증가하지는 않았다. 또한 투명대 경화현상의 발생양상을 동결보호제 처리 후 10분 간격으로 측정한 결과 DMSO의 경우 처리후 10분, glycerol의 경우 처리 후 20분 후부터 유의적으로 차를 발견할 수 없었으며, 수정율 및 난자 1개당 침입한 정자의 수는 동결란에서 유의적으로 증가하지 않았다. 본 연구의 결과 동결난자의 투명대 경화현상은 동결보호제 처리과정에서 이미 일어나지만, 이러한 투명대 경화현상이 난자의 동결보존 후 수정능에는 현자한 영향을 미치지 않는다는 사실이 규명되었다.
Jeong, Chan Sung;Jang, Sun Sik;Lee, Sung Sill;Moon, Yea Hwang
Journal of agriculture & life science
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v.50
no.4
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pp.113-125
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2016
This study was conducted to investigate the effect of low feeding level of concentrate after sexual maturity(14 month old) on the growing and breeding performances in Hanwoo cows. Eighteen cows(average body wt. 251kg) were alloted to two groups by completely randomized design, and fed a commercial formula feed by 0.8%(T1) and 1.2%(T2) of body weight for 30 months of total experimental period(feeding trial of 20 months, breeding trial of 10 months). When the results of this experiment compared to the Korean feeding standard for Hanwoo(2012), the reason of low growing performance in T1 was induced from low protein intake rather than energy. The change of body size by feeding levels was significantly appeared at chest width and body length, particularly chest width of cows in T1 was rather reduced by 3.7% in the final than the initial measurement. Ovarian size of T1 was only 63% of T2, and pregnancy rate(33.3% : 77.8%) and birth wight of calf(22.5kg : 29.5kg) were also seriously repressed by low intake of dietary protein after sexual maturity in Hanwoo cow. It was appeared that the growing and breeding performances of Hanwoo cows were more affected by the level of dietary protein rather than energy in the feeding after sexual maturity.
These studies were conducted to monitor developmental competence of follicular oocytes collected from the carcass of the high meat quality in Korean native cattle using each individual protocol of IVM, IVF and IVC. The follicular oocytes that were collected from the ovaries of the cow yielded 1, $1^+\;and\;1^{++}$ meat quality were matured, fertilized and cultured using each individual protocol of IVM, IVF and IVC. As results, the number of follicular oocytes collected from individual fundamentally-registered cows yielded 1, $1^+\;and\;1^{++}$ meat grade were 28.9, 28.8 and 29.6 per head, respectively. The rates of blastocyst formation after IVM, IVF and IVC were 27.2, 28.7 and 32.9% in the cows yielded 1, $1^+\;and\;1^{++}$ meat quality, respectively. The rate of blastocyst formation was 8.4 per head. The number of follicular oocytes collected from pedigree registered cows yielded 1, $1^+\;and\;1^{++}$ meat quality were 25.8, 27.1 and 27.0 per head, respectively. The rates of blastocyst formation were 23.0, 33.7 and 42.6% in the meat quality of 1, $1^+\;and\;1^{++}$ after in vitro-manipulation, respectively (p<0.05). The rate of blastocyst formation was 8.5 per head. In conclusion, these results suggest that in vitro embryo production system using individual culture system including IVM, IVF and IVC can make good use of the gene from the carcass of the high meat quality in Korean native cattle.
Proceedings of the Korean Society of Developmental Biology Conference
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2003.10a
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pp.117-117
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2003
체외에서 한우 난포란의 감수분열과 배발달 능력의 획득에는 단백질 합성이 수반되어야 한다. 그러나 이러한 변화와 관련된 연구 보고는 거의 전무한 실정이다. 본 실험은 난자의 핵성숙과 관련된 세포질내 단백질 변화를 파악하기 위하여, 체외성숙 시간에 다른 배발달율과 세포질내 단백질을 비교하여 배발달능력 획득과 관련 있는 단백질을 규명하고자 실시하였다. 한우 난소에서 2-8mm의 가시난포로부터 난포란을 회수하였다. 회수된 난포란은 10% FBS와 호르몬이 첨가된 TCM199 용액에서 18시간 또는 24시간 체외성숙을 실시하였다. 난자 세포질내 단백질 변화는 2D gel electrophoresis를 이용하였고, 유의적인 변화를 나타낸 spot은 peptide mass fingerprinting을 통하여 단백질 동정을 실시하였다. 체외수정은 fer-TALP 용액을, 체외배양은 CR1aa 용액을 배양 3일째까지는 0.3% BSA, 그 이후에는 10% FBS와 난관상피세포를 첨가하여 사용하였다. 통계분석은 t-test를 이용하였다. 난자의 세포질에 대한 이차원전기영동 결과 29개의 단백질 spot들을 확인하였다. 한편 체외성숙 18시간째에 PB가 출현된 난자는 PB가 출현되지 않은 난자에 비하여 15개의 spot에서 유의적인 변화를 나타냈다. 이들 중 4개의 단백질 spot은 낮았고, 11개 spot의 수준은 높은 경향이었다. 체외성숙 18시간째와 24시간째의 배발달율을 조사한 결과 18시간째에서 유의적으로 높은 배반포 발달율을 나타냈다. 그리고 체외성숙 18시간과 24시간째 난자의 세포질내 단백질 spot들의 변화를 비교한 결과 PB가 출현된 난자 세포질에서 단백질의 변화와 유사한 경향이었다. 그러나 2개의 단백질 spot은 상반된 경향을 나타냈다. 따라서 본 실험에서 난자의 핵성숙과 관련 있는 15개의 spot을 확인하였고, 이들 단백질 spot중에서 2개가 배발달 능력과 관련이 있을 것으로 사료된다.보다는 육질등급에 많은 영향을 받는 것으로 판단된다. 한편 육질 1등급에서 배발달율이 낮은 이유는 육질 향상을 목적으로 암소를 비육 하는 경우 발생하는 번식장애와 밀접한 관계가 있는 것으로 사료된다.각각 가장 높았다. 배양 8일째 배반포의 세포수에 있어서 총세포수와 TE 세포수는 차이가 없었으나, ICM 세포수가 l0mg 첨가군에서 가장 높았다. 본 실험 결과에서 체외성숙 배지에 NEAA와 EAA 첨가가 배발달율에는 효과가 없었지만, 첨가농도의 증가에 따라 ICM 세포수가 증가하였다. 한편 체외성숙 배지에 LAH 첨가는 첨가 농도가 높을수록 배발달율은 낮았지만 ICM 세포수는 증가하였다.에 Csk가 관여하고 있음을 알 수 있다. 결론적으로 성적 성숙에 따른 생쥐 정소 내 Src-Csk loop의 발현과 Src kinase 활성의 변동은 정소 내 간충조직, 세정관 상피의 증식 및 기능적 분화 과정을 매개하는 생리적 활성분자 수용체 하위의 신호전달 과정에 Src-Csk loop에 의한 조절가능성을 확인할 수 있었다.rugrene의 향기성분이 주요 성분군으로 확인되었다. 2. 생강나무에서 생강의 향기를 발산하는 성분으로는 $\beta$-myrcene, o-terpinolene, phellandrone, ι-limonene, $\beta$-eudesmol, $\delta$-cadinone, elemol, trans-caryophyllene으로 동정되었으며 그 중에서도 phellandrene, $\beta$-eudesmol이 주된 역할을 하는 성분으로 확인하였다. 유의적인 관련성이 나타났고, 복부 비만의 지표인 허리엉덩이둘레비는 GPT, alkaline phosphatase, 공복시 혈당 및 MCV 등 다양한 건강지표와 관련성을 나타내어 향후 비만에 있어 다양한 혈액 성상의 변화 및 역할규명에 대한 연구가 이루어져야 할 것으로 본다.hat
A total of 1200 Korean native cow and 240 dairy cow genitalia were collected during the slaughtering process in Seoul and Kwang Ju abattoir and were examined from July 1985 to March 1986. Ovarian follicles were classified as cystic if the diameter was greater than 2.5cm or if follicles were multiple. In order to investigate the ovarian cysts, anatomical and histological examinations were performed. In addition progesterone and estrogen level in different types of cystic follicular fluid and serum were measured by radioimmunoassay. The results were summerized as follows: 1. The incidences of ovarian cysts were 2.0% in Korean native cow and 7.9% in dairy cow. 2. In distribution of cysts in the left, right and both ovaries, the most encountered ovary was right one. The frequency was 45.8% in right ovaries, 33.4% in left ovaries and 20.8% in both ovaries in Korean native cow. On the contrary the frequency was 42.1% in right ovaries, 31.8% in both ovaries and 26.3% in left ovaries in dairy cow. 3. Six speciemens (25.0%) of Korean native cow and six specimens (31.6%) of dairy cow were associated with corpora lutes in both ovaries. 4. The luteinization of theca layer was most significant in the group 2Aa (71.4%) and 2Ba (38.5%) which associated with no granulosa cell and corpora lutea in the same cystic ovaries. 5. Correlation of progesterone concentration between cystic fluid and serum was found only in the group 2Aa and 2Ab (r=0.86). Progesterone and estrogen concentrations in cystic fluid were closely related to the degree of degeneration of granulosa cell layer. The cystic follicles that consist of thickened theca and degenerated granulosa cell layers contained a large amount of progesterone, and small amount of estrogen. In conclusion, various types of ovarian cysts with various levels of progesterone and estrogen were observed in Korean native cow.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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